食管—胃交界腺癌中Snail蛋白的表达和临床意义

郭竑　谢良喜　张灏　陈跃

【摘 要】目的：檢测128例食管-胃交界腺癌标本中Snail 蛋白的表达，分析与不同临床病理特征的关系及其对转移以及预后的影响。方法：收集128例食管-胃交界腺癌标本并随访；免疫组化检测Snail 蛋白的表达情况并进行统计分析。结果：1.Snail的表达与食管-胃交界腺癌的分化程度、UICC分期密切相关，组织分化越低，临床分期级别越高，Snail蛋白的表达越强（P﹤0.05 ）。2. Snail 蛋白阴性表达组总生存率明显优于阳性表达组 （ P=0.004 ）。结论：Snail蛋白与食管-胃交界腺癌的转移有关；高表达者预后不良。

【关键词】食管-胃交界腺癌；Snail蛋白；免疫组织化学；肿瘤转移；预后

【中图分类号】R735 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）06-0005-02

Snail调控的上皮细胞-间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）被认为与肿瘤的侵袭转移密切相关[1]。目前在食管-胃交界腺癌中这方面的研究还未见报道。本实验运用免疫组化法，检测128例食管-胃交界腺癌样本中Snail 蛋白的表达，分析与不同临床病理特征的关系及其对转移以及预后的影响，探讨Snail蛋白的表达作为食管-胃交界腺癌预后指标的可行性。

1 资料与方法

1.1 临床资料：选取汕头大学医学院肿瘤医院2000年10月～2002年10月间的有完整随访资料128例食管-胃交界腺癌患者。每例均行根治术。男性106例，女性22例；年龄35～81岁，中位年龄60岁；淋巴结转移者78例，肿瘤最大径>5cm者64例；临床分期按照UICC的TNM分期：Ⅰ期6例、Ⅱ期29例、Ⅲ期59例、Ⅳ期34例。随访：128例患者中121例的临床治疗结果进行了5年及以上的随访。

1.2 试剂及来源：一抗：Snail羊抗人多克隆抗体（美国Santa Cruz公司，编号E-18），稀释度为1：100。羊抗兔（鼠）二抗、DAB显色试剂盒均为北京中杉公司产品。

1.3 免疫组化Envision二步法：所有标本均经10%甲醛固定，石蜡包埋，将石蜡标本行4?m连续切片，常规脱蜡水化，3%双氧水消除内源性过氧化物酶，高压热修复后在切片上滴加一抗，4℃孵育过夜；再加入二抗，37℃孵育30min；DAB显色，苏木素轻度复染，透明，封片。以PBS代替一抗作为阴性对照。所有操作均严格按照试剂盒说明书进行操作。

3 讨论

Snail诱导EMT过程中的上皮钙粘着蛋白下调，从而导致上皮间连接的破坏。肿瘤细胞失去极性，转化为有运动能力的间质细胞，穿透基底膜并进入循环系统，播散种植到其它器官[2]。乳腺癌[3]、食管癌[4]等都存在着Snail的高表达。我们通过分析得出Snail蛋白的表达和食管-胃交界腺癌的组织分化程度密切相关（P=0.049），相关性分析呈负相关关系。分化程度越低，Snail的阳性表达越高。同时Snail蛋白的表达和食管-胃交界腺癌的临床分期（P=001）亦密切相关，呈正相关关系。提示Snail蛋白越高表达，肿瘤的分化程度也越低，恶性程度越大，肿瘤转移的机会越大，肿瘤患者预后越差。

我们在研究了Snail蛋白的表达与治疗后转移情况之后发现阳性表达与治疗后远处转移密切相关，呈正相关关系（P=0.038）。说明Snail蛋白的表达与食管-胃交界腺癌的转移相关，Snail的高表达可能导致最初浸润的开始和正常组织形态学的破坏，提示Snail阳性表达的食管-胃交界腺癌更易于浸润和转移。

此外，通过对128名患者进行的追踪随访，我们发现Snail的阳性表达者的生存率明显低于阴性表达者（P=0.004）。进一步表明Snail阳性表达者预后不良，Snail的表达可以作为判断影响食管-胃交界腺癌患者预后的指标，通过检测Snail蛋白的表达可作为判断食管-胃交界腺癌预后的手段。

参考文献：

[1] Lee JM，Dedhar S，Kalluri R，et al. The epithelial-mesenchymai trasition： newinsights in signaling，development，and disease，J Cell Biol，2006，172（7）：973-981.

[2] Yilmaz M，Christofori G. EMT，the cytoskeleton，and cancer cell invasion. Cancer Metastasis Rev，2009，28（1-2）：15-33.

[3] Come C，Arnoux V，Bibeau F et al.Roles of the transcription factors Snail and slug during mammary morphogenesis and breast carcinoma progression [J].J Mammay Gland Biol Neoplasia，2004，9（2）：183-193.

[4] Natsugoe S，Uchikado Y，Okumura H，et al.Snail plays a key role in E-cadherin-preserved esophageal squamous oell careinoma [J].Omol Rep.2007，17（3）：517-523.