警惕前列腺增生电切术后标本中的前列腺癌

吴才良 龙琼先 刘欣雅

【摘 要】目的：探讨前列腺增生电切术后碎块组织标本的病理检查方法及免疫组化染色在诊断可疑前列腺癌病例中的作用。方法：回顾性观察738例前列腺增生电切术后碎块组织的常规HE染色及部分病例的免疫组化染色结果，统计分析其中诊断为PCa的病例。结果：738例前列腺增生术后碎块组织标本中，镜下形态结合免疫组化染色结果诊断为恶性的病例有89例（12.0%），其中88例为PCa病例，另有1例为非寉奇金氏淋巴瘤；41例可疑病例经免疫组化染色后诊断为前列腺癌的有19例。结论：前列腺增生电切术后碎块组织中可能存在前列腺癌，免疫组化染色在可疑病例中的诊断具有重要的作用。

【关键词】前列腺增生；前列腺肿瘤； 病理检查； 免疫组织化学

前列腺增生症（benign prostatic hyperplasia， BPH） 是老年男性的常见疾病，其中25%有症状的BPH需手术治疗，目前常用的手术方法是行经尿道前列腺电切术（TURP）。研究报道，前列腺增生术后标本中可能伴有前列腺癌（prostate cancer， PCa）。而临床送检标本多为前列腺碎块组织，如何在无数碎块组织的诊断中不漏诊Pca，尤其是一些疑难病例，这是病理医生必须解决的问题。为此，本文针对送检BPH碎块组织的取材、制片及诊断方法做一探讨。

1 材料与方法

1.1 材料 收集本院2009年至2012年临床诊断为前列腺增生的经尿道前列腺电切术后碎块组织标本738例，年龄38岁到87岁，平均为71岁。选用CK34βE12、P63、P504S、PSA、PSAP等抗体，抗体均从北京中杉生物公司购买。

1.2 方法 前列腺碎块组织标本经常规取材、脱水、浸蜡包埋后，切片、HE染色，显微镜下观察病变。对可疑病例进行免疫组化染色，其方法如下：石蜡切片脱蜡至水，PBS液冲洗。用PH为6.0的柠檬酸盐缓冲液对组织抗原进行修复。3% H2O2室温下孵育10min，PBS液冲洗。滴加正常山羊血清工作液，室温孵育20分钟，倾去液体。滴加稀释好的一抗（1：50）50ul，4℃孵育过夜，PBS缓冲液冲洗。滴加生物素化二抗工作液，37℃孵育15分钟，PBS冲洗。滴加辣根酶标记链酶卵白素工作液，37℃孵育15分钟，PBS液冲洗。DAB显色，自来水冲洗，以苏木素复染细胞，中性树胶封固切片。

1.3 免疫组化染色结果判断 CK34βE12、P504S、PSA、PSAP以细胞浆出现棕黄色颗粒为阳性，P63以细胞核出现棕黄色颗粒为阳性，无棕黄色颗粒出现即为阴性，出现微灶性或散在棕黄色颗粒为可疑阳性。

2 结果

2.1 BPH术后标本中的PCa病例 在738例临床送检前列腺增生电切术标本，共发现有恶性病例89例（12.0%），其中88例为PCa病例，另有1例为非寉奇金氏淋巴瘤。经常规HE染色后直接诊断为PCa的有69例，可疑病例41例。41例可疑病例经免疫组化染色后，其中19例诊断为PCa，1例诊断为非寉奇金氏淋巴瘤。

2.2 相关免疫标记在PCa中的表达 CK34βE12在腺泡基底细胞胞浆中特异性着色，P63在腺泡基底细胞胞核上特异性着色，P504S、PSA、PSAP在PCa中癌细胞中呈阳性表达，具体表达情况见图1。

3 讨论

BPH是老年男性常见疾病，其治疗方式多为经尿道前列腺电切术，所送病理活检组织为前列腺碎块组织。有资料报告，PCa患者前列腺内都有BPH结节状病变，有的结节内同时会有腺癌和部分癌变或不典型增生腺体上皮细胞，说明PCa与BPH有一定形态学联系[1]。Sakr等[2]报道年龄在40岁～49岁的男性病人中，发现组织学可以诊断为PCa的发生率高达34%；而在30岁～39岁组中则为27%，但均无临床症状，故早期发现PCa有着重要的作用。赵宏等[3]报道BPH术后有7例发现了PCa。但要在无数碎块小组织中判断是否隐匿有癌灶，对病理技术及诊断均有一定的要求。

就临床送检前列腺碎块组织标本，在常规取材及诊断方面应注意一下几点：1）碎块组织标本应全部送检，以免漏诊。2）每一包埋盒不要放太多组织，避免脱水不好、包埋不平而影响切片质量，建议每一盒最好不要超过8块。3）应做连续切片，王刚等[4]报道前列腺标本间隔5 mm切片，偶发癌的比例为27%，如果切片间隔2～3 mm，偶发癌的比例达到41%。4）镜下观察前列腺碎块组织标本时一定要细心，不能漏看任何一小块组织，对明确的病例可以直接报告为PCa，对疑为癌的病例应做进一步检查。本研究中，经常规HE染色后能直接诊断为癌的病例有69例，另有疑为癌病例41例。

对于可疑病例，目前最常用的检查方法是免疫组化染色。针对前列腺癌的诊断及鉴别诊断，常用的抗体有CK34βE12、P63、P504S、PSA、PSAP、PSMA。其中CK34βE12、P63可以观察到基底细胞是否存在，有助于前列腺癌的诊断，P504S、PSA、PSAP、PSMA在Pca中表达阳性，而BPH中表达阴性。研究认为CK34βE12在前列腺癌中的染色具有不确定性，对于少数病例，仅用CK34βE12来说明基底细胞的存在或缺失具有局限性，应联合应用P63检测基底细胞[5-6]。PSA对PCa有很强的特异性，但其敏感性却不佳，有少数PCa病例不表达该标记物。PSAP比PSA敏感性强，特别是在低分化的PCa上。然而，有一些专家称有5%的低分化PCa是不表达这两种抗原的，PSMA在识别这部分并不表达PSA和PAP的低分化PCa上特别有用。有报道称PSMA对PCa的阳性检出率要明显高于PSA（分别为94.28%、78.57%）[7]。最近有研究认为SPON2能发现PSA阴性的PCa病例，是一个敏感性及特异性均好的免疫标记[8]。应用免疫组化技术，用34βE12、P63染基底细胞，用P504S、PSA、PSAP、PSMA染癌细胞，并用PSA、PSAP、PSMA与其它恶性肿瘤进行鉴别，能够提高PCa、BPH诊断的准确性。

综上所述，对临床送检的前列腺碎块组织标本，病理医生一定要从取材、切片及诊断多方面做好工作，以免漏诊PCa病例。对于可疑病例，一定不能放过，应联合应用多种免疫标记进行免疫组化染色，排除有无癌变。

参考文献：

[1] 李兆鉴，吴显钊.前列腺癌47例临床分析[J].临床泌尿外科杂志，1987，12：375.

[2] Sakr WA，Haas GP，Cassin BF，et al.The frequency of carcinoma and intraepithelial neoplasia of the prostate in young male patients[J].J Urol，1993，150（21）：379-395.

[3] 赵宏，赵振东，谢锡滨. 良性前列腺增生术后前列腺癌的早期诊断[J]. 西部医学. 2007， 19（6）：1124-1125.

[4] 王刚，周利群，那彦群.良性前列腺增生术后前列腺偶发癌10年回顾性分析[J].中华泌尿外科杂志，2005，26（2）：117-119

[5] Shah RB，Zhou M，LeBlanc M，et al.Comparison of the basal cell-specific markers，34betaE12 and p63，in the diagnosis of prostate cancer[J].Am J Surg Pathol，2002，26（9）：1161-1168..

[6] 李彬，程慧敏. 前列腺癌与良性前列腺增生的免疫组化结果比较及意义[J]. 临床医药实践， 2009， 18（12）， 2256-2258.

[7] Li H，Zeng H，Liu WP，et al.Expression of prostatic specific membrane antigen and prostatic specific antigen in prostatic adenocarcinoma tissue[J].China J Exp Surg，2002，19（3）：232-234.

[8] Qian X， Li C， Pang B， et al. Spondin-2 （SPON2）， a more prostate-cancer-specific diagnostic biomarker[J]. PLoS One. 2012， 7（5） ：e37225.