猪圆环病毒Ⅱ型及疫苗研究现状

蔡良水

（武汉科前动物生物制品有限责任公司,湖北武汉430070）

猪圆环病毒分为Ⅰ型和Ⅱ型。PCV1无致病性，而猪圆环病毒Ⅱ型（PCV2）却具有致病性，能引起猪表现多种临床症状。PCV2是引起仔猪断奶多系统衰竭综合征的主要病原。自1991年在加拿大猪群中暴发以来，PMWS已经波及全球，给全世界养猪业造成了巨大的经济损失。PCV2还与增生性坏死性肺炎、母猪繁殖障碍、猪皮炎与肾病综合征和猪呼吸道疾病综合征相关。PCV2感染性疾病引起的死亡率增高、饲料报酬降低，加上我国规模化主场饲养管理水平相对较为落后，所以PCV2及其疫苗成为最近几年国内外学者研究的热点。

1 猪圆环病毒病的流行病学

在我国虽然近几年来才对猪圆环病毒引起重视，但是，对于猪血清中PCV2抗体所作血清学研究表明PCV2抗体至少从1969年起就已经存在于猪群中了。现已证明，圆环病毒病在规模化猪场中流行广泛，血清学调查表明，在德国、加拿大、英国和爱尔兰，猪血清抗体阳性率分别高达95%、55%、86%和92%，猪Ⅱ型圆环病毒病的死亡率约为10%～30%不等。较严重的地区，猪场在暴发本病时死亡率高达40%左右。在我国黑龙江省、浙江省、上海市、福建省、湖南省、云南省的血清学调查表明，猪血滑抗体阳性率分别高达63.59%、58.31%、79.7%、63.6%、62.29%、29%。 并在检测中发现PCV2阳性率与猪繁殖与呼吸综合征阳性率有一定的相关性,PCV2感染猪群的免疫功能受到损害，导致机体抵抗力下降，易受其他病原的并发或继发感染，使病情加重导致死亡。PCV2与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒等病原有协同感染。

2 临床症状

PCV2感染猪后主要可以引起以下5种疾病：

2.1 断奶猪多系统衰竭综合征（PMWS）

主要发生在哺乳期和保育期仔猪，影响6～8周龄的猪，很少影响吮乳的猪。一般断奶后2～3天开始发病，急性发病猪群中，发病率4%～25%，病死率高达90%以上，猪感染后主要表现为渐进性消瘦，生长迟缓，采食量下降，被毛粗乱，有的猪出现贫血、体重减轻，皮肤与可视黏膜苍白或黄疸，有相当一部分猪只出现呼吸困难、喘气，呈腹式呼吸，少数猪只出现拉稀症状，由于细菌、病毒的二重感染，常常使PMWS的症状复杂化、严重化。临床上约有20%的病猪呈现贫血与黄疸症状，具有诊断意义。剖检病变：全身淋巴结异常肿胀，切片均匀的白净，肺脏肿胀，坚硬似橡皮样，肝脏发暗，肝小叶间结缔组织增生。

2.2 猪皮炎和肾病综合征（PDNS）

发病率为0.5%～2%，有时可达7%。病猪表现为厌食、呆滞、苍白、发热、结膜炎，呼吸困难、腹泻，消瘦。剖解病变为肾脏肿大、苍白、有病灶，成斑澜状，有时出血和水肿，淋巴结显著肿大，腹水、胸腔、腹泻、心包积液、黏膜，浆膜而出血，肺水肿或呈橡皮样，有时皮下水肿、结肠、肠系膜水肿。特征性症状是会阴部、四肢、胸腹部及耳朵等处的皮肤上出现圆形或不规则形的红紫色病变斑点或斑块，有时这些斑块相互融合成条带状，不易消失。

2.3 繁殖障碍

发病母猪主要表现为体温升高达41℃～42℃，食欲减退，感染母猪发生流产、死产、产木乃伊胎，母猪的返情率增加，仔猪断奶前死亡率上升，断奶后母猪发情延迟，在死产和新生仔猪出现非化脓性、坏死性或纤维性心肌炎。此外，在公猪精液中也分离到猪II型圆环病毒。

2.4 猪间质性肺炎

发生PMWS的仔猪有呼吸困难、肺炎症状，多见于保育期和育肥期的猪，PCV2与猪肺炎霉形体、猪流感病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、多杀性巴氏杆菌等发生协同感染，咳嗽、流鼻汁、呼吸加快、精神沉郁、食欲不振、生长缓慢。

2.5 先天性震颤

其震颤为从轻度到重度。在出生后第一周，严重的震颤可因不能吃奶而死亡，活一周的仔猪可以存活下来，但多数在3周时间恢复。震颤为双侧，影响骨骼肌肉，当卧下或睡觉时震颤消失，外界刺激可引发或加重震颤，如声音或温度刺激；有的在整个生长和发育期间都不断发生震颤。主要是母猪在怀孕阶段感染了病毒。PCV2病毒通过胎盘感染胎儿的可能性很小，或者感染发生在胎儿免疫功能形成以前。

3 PCV2的防控措施

实验兽医生物安全措施：防止PCV2和使其感染恶化的二重因子，特别是细茵、支原体及其他病毒侵入猪群。认真地对待引种工作，引种不慎往往是暴发疫情的主要原因。引进的后备母猪应进行严格的检疫，所购买的种公猪、精液必须无PCV2感染。

改进饲养管理，减少应激，合理配制日粮。注意通风与保暖，保持猪舍干燥，改善猪舍的空气质量，降低氨气浓度。去势和注射须遵循良好的卫生和消毒习惯，PCV2是没有囊膜的DNA病毒，和环病毒科的其他病毒一样，对理化因素也有较强的抵抗能力，猪场应定期使用有效的消毒剂进行消毒。生产中应用3%的火碱溶液、0.3%的过氧乙酸溶液及0.5%的强力消毒灵和抗毒威消毒效果良好。

在猪场内禁养猫、犬，定期驱蚊蝇、投饵灭鼠。搞好种猪群的净化，坚持自繁自养。定期监测，合理制订免疫程序，避免过早或过多地对仔猪免疫，减少各种应激因素对仔猪的影响。

4 PCV2疫苗研究现状

采用PCV2对猪群进行疫苗接种，是目前控制本病最有效的方法。

4.1 灭活苗

可用于经产母猪和初产母猪的灭活PCV2疫苗，现在已经在商业上应用，其中含有免疫佐剂，并且在一些欧洲国家获得应用许可。该疫苗对PMWS的防控效果十分显著。在国内已经有相应的进口和国产商品化PCV2灭活疫苗，且在实际应用中效果不错。

4.2 弱毒苗

FenauxM等学者将分离到的一株PCV2在PK15上连续传代数次，发现传代至第120代的病毒对于猪的致病性明显低于原分离株，表明体外传代可增强PCV2在细胞中的增殖能力，弱化其致病性，这为研制PCV2疫苗提供了一个新的思路。

4.3 核酸疫苗

KamstrupS等克隆了PCV2的ORF2基因，并证实了此质粒能够在体外(通过直接表达蛋白)以及体内(通过对小鼠用基因枪注射质粒，诱导小鼠免疫产生抗体)进行表达。免疫试验结果表明，所构建的核酸疫苗均能诱导小鼠产生一定的体液免疫和细胞免疫反应。

4.4 亚单位疫苗

ZhouJY等首次在大肠埃希菌中对缺失了核定位信号序列(NLS)的PCV2Cap蛋白(dCap)与谷胱甘肽S转移酶(GST)进行了融合表达，获得了rGSTdCap蛋白，用rdCap蛋白制备的单抗，可与感染PK15细胞的病毒粒子以及在PK15细胞中表达的Cap蛋白发生反应，同时表现对PCV2病毒粒子的中和活性。表明rGSTdCap蛋白可以作为潜在的疫苗抗原和血清学诊断试剂。

4.5 嵌合疫苗

FenauxM等应用基因工程方法，构建了PCV1和PCV2相互嵌合的感染性克隆，对其免疫原性和致病性进行了研究，发现将PCV2的ORF2基因克隆进PCV1基因组中，对猪的致病性小于PCV2基因组，并可诱导机体产生PCV2核衣壳蛋白抗体，但是对猪的免疫反应性很弱。随后的试验表明，该减毒的PCV12嵌合感染性克隆可诱导机体产生免疫保护，抵抗PCV2野毒株的攻击。用PCV12免疫后，攻毒猪的病毒血症发生率、淋巴结肿大、淋巴结中PCV2基因组拷贝量、PCV2抗原量、淋巴组织的病变等方面均显著低于非免疫猪，表明减毒的PCV12嵌合子可诱导机体产生针对PCV2的保护性免疫反应，有望作为疫苗使用。

4.6 活载体疫苗

JuC等用减毒的伪狂犬病病毒(PRV)作为活病毒载体，构建了表达PCV2ORF1ORF2的重组病毒PRV-PCV2。试验表明，PRV-PCV2可诱导小鼠和猪产生强烈的抗PCV2和PRV抗体反应，在小鼠中产生针对PRV的免疫保护，可抵抗致死量的PRVEa株的攻击，表明PRVPCV2可用于抵抗PCV2和PRV感染。WangXW等用表达PCV2 ORF2的重组腺病毒免疫小鼠，结果表明，所构建的重组腺病毒能够表达ORF2蛋白，能够在小鼠体内诱导抗PCV2免疫反应，对有效预防PCV2相关疾病的感染，重组腺病毒可能是一个比较理想的载体。