两种微柱法直接抗人球测定结果比较

唐聪海　原敏

【摘要】 目的：比较微柱玻璃珠法和微柱凝胶法直接抗人球蛋白（DAT）测定结果及在新生儿溶血病（HDN）中的临床意义。方法：采用微柱玻璃珠法和微柱凝胶法对392例临床疑为HDN的高胆红素血症新生儿标本进行DAT检测，并比较分析检测结果。结果：392例标本用微柱玻璃珠法DAT检测阳性为168例，阳性率为42.95%（168/392），微柱凝胶法DAT检测阳性为91例，阳性率为23.2%（91/392），两种方法比较差异有统计学意义（字2 =75.1，P<0.01）。阳性样本中，DAT结果在0.5+-2+水平上，微柱玻璃珠法检测阳性的140例中，微柱凝胶法检测阳性的只有63例；DAT结果（3+-4+）水平上，微柱玻璃珠法与微柱凝胶法检测的阳性样本及阳性水平无差异。结论：微柱玻璃珠法与微柱凝胶法相比较，敏感度更高，在HDN的诊断和治疗中值得推广。

【关键词】 新生儿溶血病； 微柱玻璃珠法； 微柱凝胶法

新生儿溶血病机理是母体的IgG抗体通过胎盘屏障进入胎儿血液中，对胎儿的相应红细胞进行破坏，造成溶血，引起高胆红素血症[1]。因此，建立一种既简单，快速，有特异敏感的试验室检测方法尤为重要。本文通过微柱玻璃珠法与微柱凝胶法检测DAT敏感性的比较，探讨微柱玻璃珠法在HDN检测中的临床应用。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2010年1月-2011年4月本院新生儿溶血病临床表现为高胆红素血症疑为HDN的新生儿标本392例，年龄1～7 d。男216例，女176例。

1.2 试剂与仪器 试剂为西班牙Diana公司的DG Gel Coombs卡，美国强生公司的强生Coombs卡。 仪器为Diana公司Diana fuge离心机，强生BioVue离心机。

1.3 试验方法

1.3.1 微柱凝胶卡式法检测 将微柱凝胶DG Gel Coombs卡第一孔为测定孔，加入1%新生儿红细胞悬液，第二孔为阴性对照孔， 加入1%健康人红细胞悬液，用Diana公司Diana fuge离心机1100 r/min离心10 min后观察结果。结果判读标准按文献[2]。

1.3.2 微柱玻璃珠卡式法检测 将强生公司的强生Coombs卡第一孔为测定孔，加入1%新生儿红细胞悬液，第二孔为阴性对照孔， 加入1%健康人红细胞悬液，用强生BioVue离心机1400 r/min离心5 min后观察结果。结果判读标准按文献 [2]。

2 结果

微柱玻璃珠法和微柱凝胶法平行检测392例疑为HDN的高胆红素血症新生儿血液，见表1。结果显示，微柱玻璃珠法检出HDN阳性168例，阳性率为42.9%，微柱凝胶法检出HDN阳性91例，阳性率为23.2%，两者相比，差异有统计学意义（ 字2=75.1，P<0.01）。见表2。

3 讨论

HDN主要是母婴血型不合，母体产生IgG类抗体通过胎盘作用于胎儿红细胞，使之产生不同程度的新生儿黄疸，贫血，水肿，肝脾肿大等溶血病症状[3]。HDN的早期诊断和早期治疗对胎儿的存活和减低溶血产生的影响，具有重要的意义。微柱凝集试验作为一种免疫学检测的新技术，综合了分子筛技术，抗原抗体反应技术，离心技术，与聚凝胺法和抗人球法相比，具有独特优势[4-5]。微柱玻璃珠卡的介质是细微玻璃珠，微柱凝胶卡的介质是凝胶颗粒。两种卡都具有操作简便，细胞不用洗涤[6]，敏感度高，特异性高，重复性好，结果易于判读和保存等优点。

受检的392样本中，微柱凝胶法检测阳性的样本，微柱玻璃珠法检测同样为阳性。微柱玻璃珠法检出DAT阳性168例，微柱凝胶法检出DAT阳性91例，两者差异有统计学意义（字2=75.1，P<0.01）。显示微柱玻璃珠法比微柱凝胶法敏感度更高。在HDN的早期诊断上，微柱玻璃珠法比微柱凝胶法具有更大的优势。将阳性的样本分成DAT结果≤2+和DAT结果>2+ 两个水平，结果见表2。DAT结果≤2+的样本中，微柱玻璃珠法检测DAT阳性为140例，微柱凝胶法检测DAT阳性为63例（45%），阴性为77例（55%）。且同一份阳性的样本，微柱玻璃珠法比微柱凝胶法检测的阳性水平高0.5+～1+。DAT结果>2+的28例样本中，微柱玻璃珠法与微柱凝胶法检测的结果一致，水平相同。笔者认为，DAT≤2+的样本，细胞结合比较疏松，敏感度高的微柱玻璃珠法比微柱凝胶法检测的阳性率及阳性水平高，而在DAT>2+的样本，细胞结合比较致密，两种方法检测的阳性率及阳性水平无差异。

参考文献

[1] 黎世杰，罗广平，赵阳.微柱凝胶技术在新生儿溶血病检测中的应用[J].热带医学杂志，2006，6（5）：549-551.

[2] 叶应妩，玩毓三，申子瑜，等.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京：东南大学出版社， 2006：265.

[3] 罗春丽，刘体全.临床检验基础[M]. 第2版.北京：人民卫生出版社，2002：109.

[4] 朱碎永，朱燕英，林甲进.三种方法对新生儿溶血病的诊断作用比较[J].临床输血与检验，2002，6（4）：49-50.

[5] 李彤彤，刘晗，王维，等.微柱凝胶技术在新生儿溶血病中的应用[J].天津医药，2007，7（35）：551-552.

[6] 罗广平，骆宏，汪传喜，等.凝胶直接抗球蛋白试验在自身免疫性溶血性贫血实验诊断中的应用[J].热带医学杂志，2009，9（7）：745-746.

（收稿日期：2012-09-11） （本文编辑：车艳）