猪圆环病毒病研究进展

2013-03-23 15:30刘今竺盘锦市兴隆台区检验中心124010
当代畜禽养殖业 2013年1期
关键词:养猪业圆环病原

刘今竺 盘锦市兴隆台区检验中心 124010

刘 飞 盘锦市兴隆台区检验中心 124010

王云飞 盘锦市兴隆台区检验中心 124010

猪圆环病毒病(PCVD)是继猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)之后发现的重要传染病。近年来,我国郎洪武、曹胜波等研究人员先后分别通过血清学调查及PCR对北京、天津、辽宁、上海、山东等7个省市的559份血清进行检测,结果显示PCV-2抗体阳性率为42.9%,从而证实我国一定区域内存在猪圆环病毒。PCV-2广泛存在于世界很多的养猪国家和地区,而与之有关的疾病包括PMWS、猪皮炎及肾病综合征(PDNS)、猪增生性坏死性肺炎(PNP)等可能会给全球养猪业带来巨大的灾难,应该引起兽医工作者的高度重视。

1 流行病学

PCV的主要易感动物是猪,但也有报道称,在人、牛和鼠血清中也存在能与PCV发生群特异性结合的低水平抗体。PCV经口、呼吸道感染不同日龄的猪,少数怀孕母猪感染PCV后,经胎盘垂直传染给仔猪。感染的猪可通过鼻液、粪便等排出病毒。PMWS可见于5-16周龄的猪,但最常见于6-8周龄。猪群发病率为3%-50%,病死率为8%-35%。该病发展缓慢,可持续12-18个月。此外,该病与集约化生产方式有关,饲养管理不善、环境恶劣、饲养密度过大、应激及不同年龄和不同来源的猪编群等均可诱发该病。Larcochelle等报道,PCV-2病毒可间歇性地自公猪精液中排出,感染公猪的精液可作为一种潜在的PCV-2病毒来源。Kiupel M等报道,被PCV-2感染的小鼠能否排毒尚不清楚。

2 病原特征

2.1 基本特征

猪圆环病毒(PCV)属于圆环病毒科、圆环病毒属,为已知最小的动物病毒之一。PCV以滚环方式复制,呈20面体对称,无囊膜,直径约17-22nm。

2.2 PCV病毒的影响因素

PCV对酸性环境(pH值为3)、氯仿或者高温有抵抗作用,对苯酚、季胺类化合物、氢氧化钠和氧化剂等较敏感。PCV在原代胎猪肾细胞、恒河猴肾细胞及BHK-21细胞上不生长,可在PK-15细胞中生长,但不引起细胞病变,且需将PCV盲传多代才能使病毒有效增殖。在接种PCV的PK-15细胞培养物中加入d-氨基葡萄糖,可促进其复制,使得感染PCV的细胞数量提高30%。感染PCV的细胞内含有许多胞浆内包涵体,少数感染细胞内含有核内包涵体。

3 与PCV-2有关的疾病及诊断

3.1 并发症及病理变化

世界各地的学者对猪圆环病毒进行了大量的研究,发现PCV-2不仅是PMWS的主要病原,同时还与PDNS、PNP等疾病有所联系。另外,PRRS、PPV、传染性先天性震颤(CT)、PRV等均与PCV-2感染有重要关联。在临床上,以PMWS较为多见,患猪表现为生长发育不良,渐进性消瘦,体重减轻,皮肤与可视黏膜呈现苍白或黄疸,贫血,肌肉萎缩,衰弱无力,呼吸困难,咳嗽,水样下痢或黑便。由于细菌和病毒的二重感染,常常使得PMWS的症状较为复杂。最显著的病理变化是全身淋巴结,特别是腹股沟浅淋巴结、肠系膜淋巴结、支气管淋巴结及颌下淋巴结肿大5-10倍。肺主要呈弥散性、间质性病变,质地硬如橡皮,肺表面呈花斑状,灰棕色肺叶与正常的黄到粉红肺叶相间。肝脏有不同程度的萎缩和纤维化。脾脏肿大,切面呈肉状,无充血。肾脏肿大,呈现白色,有的因水肿可达正常大小的5倍。显微病变可见淋巴细胞浸润,在巨噬细胞、淋巴细胞、内皮细胞及上皮细胞内形成包涵体,在小肠固有层、腹股沟淋巴结内形成合胞体。

3.2 实验室诊断

由于PCV-2感染所致的各种疾病的临床表现与病理变化并不是特有的,因此对这些疾病的临床诊断十分困难,必须借助实验室手段才可以确诊。其中,对PMWS的诊断可以参考以下3个指标:(1)临床上可以观察到类似PMWS的症状和病变;(2)可以在淋巴组织中观察到胞浆包涵体、组织细胞炎症浸润及多核巨噬细胞;(3)在病变组织中检测到PCV-2。目前,已建立和应用的实验室诊断方法有病毒分离与鉴定、间接免疫荧光抗体法(IFA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、原位核酸杂交(ISH)、免疫组化法(IHC)和多聚酶链反应(PCR)等。病毒分离与鉴定多用于急性病例的确诊和新疫区的确定,但此法费时费力,不适于快速诊断;IFA、ELISA方法主要用于检测PCV抗体,由于PCV-1和PCV-2有一定的抗原交叉性,所以IFA在PCV的诊断上受到限制;而ELISA具有简便、快速、可靠的优点,并且和PPV、PRRS没有交叉反应,应用前景广阔;IHC方法主要用于检测PCV抗原,并进行病毒的组织学定位,具有特异、确实的优点,但对实验人员的要求较高;PCR主要用于检测PCV病毒的核酸,应用型特异性引物可对PCV-1和PCV-2定型,是一种快速简便特异的方法,尤其是定量PCR和复合PCR 的建立,为 PCV的检测、分型、组织中病毒含量的测定、疾病发展阶段的推测及临床PMWS的诊断提供了有效的工具。

4 对PCV-2的防制及展望

目前还没有有效的疫苗可以用来预防PCV-2的感染。虽然国内外已研制出基因工程苗和亚单位疫苗,但因PMWS并非仅由PCV-2引起,必须与PPV、PRRS等病原协同作用于免疫系统才能使猪发病,所以对PCV-2的感染很难奏效。目前采取的主要对策是加强饲养管理,降低饲养密度,保持良好的圈舍通风,减少环境应激,合理分群与混养,实行全进全出,避免将不同日龄的猪混群饲养,从而减少和降低猪群之间PCV-2及其他病原的接触感染机会。建立完善的生物安全体系,将消毒卫生工作贯穿于养猪生产的各个环节,最大限度地降低猪场内污染的病原微生物数量,减少或杜绝猪群继发感染的机率。有效预防和控制其他感染性疾病,做好猪瘟、猪伪狂犬病、猪细小病毒病、猪气喘病等疫苗的免疫接种,提高猪群整体的免疫水平。减少呼吸道病原体的继发感染,增强肺脏对PCV-2的抵抗力。对于早期发现的疑似感染猪进行检查、隔离和淘汰。避免从疫区引进猪只,严格控制外来人员、车辆、货物进入猪场。同时避免其他动物接近猪场,对老鼠和飞鸟也要进行严格控制。

PCV-2作为一种新发现的病毒,与其有关的疾病已经成为世界养猪业的重要传染病,给养猪业带来了巨大的经济损失。尽管世界上许多实验室对PPV和PRRSV与PCV-2在致病方面的协同机制,该病毒对其所导致的各种疾病及PMWS的人工复制等方面进行了大量的研究,获得了大量的相关知识。然而,我们对其分子生物学特性、病毒对动物免疫系统的影响、致病机理、有效预防和如何控制该病毒引发其他疾病以及存在的一些问题等缺乏全面而系统的了解。因此,我们必须对这些方面进行更详细、更深层的研究。由于该病毒较广泛地存在于猪体内,与猪的健康密切相关,尤其是考虑到可能会用猪的器官进行人的异体移植,所以更应当进一步加强对该病原体的研究。另外,目前国内关于PCV的分子生物学和基因工程方面的研究鲜有报道,这也给国内的兽医科技工作者提出了一个新的课题。我们相信,通过对PCV-2更深入的研究,最终会发现并研制出一种有效的疫苗来预防此病,这将对降低全球养猪业的经济损失发挥不可估量的作用。

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