景晓敏
培养基(Medium)即生物实验中一种为微生物、植物及动物组织提供生存及生长的人工配制养料。此养料通常富含多种生物所需的水、维生素、碳水化合物、含氮物质以及微量元素等。而也有专用的培养基含有抗菌素及色素,特针对于对单种微生物培养及鉴定工作。然而随着近年来其医疗及科研技术的不断成熟与发展,生物实验及微生物检验中所需的培养基呈现着越来越广泛的运用趋势,而随之市面上出现的培养基生产厂商也不断增多。此种由规模化量产的培养基虽然为广大微生物检验提供了极大的方便,但据多项调查及研究结果指出,此行业量产的培养基,其制作工艺、生产质量等还未达到规范化指标,产品的有关质量更是存在一定的问题,且有待完善。而实验室中微生物检测的质量与其使用的培养基息息相关,培养基的质量保障正是微生物检验结果准确性的前提[1]。故严格进行实验室微生物检验中培养基的质量控制,对提高检验质量具有重要的意义。本文就对现今如何进行培养基质量控制的方法作一简要的阐述。
现今市面上的培养基生产厂家非常多,但是其产品质量均有一定的差异。故我们在进行实验室微生物培养基的采购方面,需要严格控制其采购质量。首先,采购培养基的生产厂家必须是通过国家相关企业质量认证的,如ISO9001体系认证及其他资质认证。其次采购的培养基产品均需通过各项国家相关规定的质量检测,且达到标准,产品出厂后有各项严格指标,如名称、成分、添加成分、技术数据、质量控制证、性能评价数据及有效期等相关数据[2]。最后则是采购的产品产商需选择市面上信誉度高,服务好的企业。而培养基的验收则包含了对采购完成的培养基进行的各项检验工作,包括核对生产厂家名称、产品名称、生产批号及规格数量,对比真实产品与各项数据清单有无差异,确定产品的外观、质量以及保质有效期。发现采购后的培养基出现上述各项中的任何差异及问题,一律归为验收不合格,且不得使用。
商品化规格的培养基及干粉培养基均应严格按照其产品说明上的存放环境进行保存,产品存放于干燥且阴凉的位置。通常培养基的有效保存期为2年,但若一但开封且未使用完的培养基很易吸收室内空气中所含的水分,造成损坏。故一经开封应尽快使用完,保存则严格注意防潮。检验人员对保存中的培养基应作详细的定期检查,确保其密封性及是否处于有效使用期。若发现培养基在保管中出现问题,如过期、变色、结块等情况,需及时废弃。
首先制备培养基所选用的水必须是专用纯净水或者经消毒过后的无菌水。水中电阻率需在25℃时大于300000Ω/cm,重金属含量需小于0.05 mg/L。而在进行培养基的称量时需专业人员在干燥通风的环境中采用专门的角匙,且操作过程需严格规范。培养基进行复水的容器则需要采用专用的盛装容器,其容器的体积须大于复水后培养基总体积的2倍,预防出现溢出情况。在对培养基进行加热时,若培养基内含有琼脂粉成分,则需要将其充分浸泡一段时间。加热的过程中不断进行搅拌防止出现培养基结底炭化从而造成成分损害。部分培养基则需要使用沸水进行加热,预防发生局部烧焦及沸腾溢出。而当对培养基实施灭菌时,需严格按照说明规范操作。通常均会采用121℃行15 min高压灭菌,但是也不能盲目按照说明的时间进行,需结合实际情况,合理调节灭菌时间,防止出现培养基灭菌过度而造成的成分变性。为有效体现培养基其生物学特性,其制备生长及繁殖需要特定的PH范围[3]。当在实施培养基灭菌过程中,往往PH值会因灭菌而产生改变。可采用适量的NaOH1 mol/L及盐酸1 mol/L对培养基的PH值进行适当调节,但也应注意调节次数不宜过多。
当经过上述步骤而制备好的培养基均会出现不同的颜色及质感。故对培养基的性能测定可根据其颜色、形态、质感的观察来进行。完成培养基需颜色清晰、质感明显,无脱水、浑浊及沉淀现象。
通过以上环节可以有效提高培养基的质量,但人为因素也是影响其实验室微生物检验的重要因素之一[4]。故无论是检验人员还是培养基的制备人员,都必须对其自身素质及技术水平进行认真的认识及学习,端正其工作态度,加强各方面业务知识、技术能力,进一步提高实验室检验人员的从业水平。
综上所述,培养基是微生物检验过程中必不可少的关键因素,而我们则需通过严格产品的采购、规范其操作以及提高从业人员水平素质等手段进一步加强其培养基的质量控制,从而有效提高其微生物检验的准确性及质量。
[1]顾文辉.微生物实验室质量控制.职业与健康,2010,26(16):1906-1908.
[2]周小明.微生物实验室的质量控制和质量保证.职业与健康,2009,25(15):1667-1668.
[3]童小平,杨更发.培养基有效保存期内的质量控制.浙江预防医学,2009,(8):89-91.
[4]王绥家,黄宏星.微生物实验室培养基的质量控制.检验医学与临床,2011,(20):112-114.