不同产区三种吴茱萸有效成分的研究

王承南，王红娟，李 平，林凌秋

不同产区三种吴茱萸有效成分的研究

王承南，王红娟，李 平，林凌秋

（中南林业科技大学 林学院，湖南 长沙410004 )

对我国吴茱萸、吴茱萸变种石虎和变种疏毛吴茱萸的主要药用成分吴茱萸碱和吴茱萸次碱进行了分析。研究结果表明：吴茱萸3品种中，吴茱萸的药用有效成分最高；3个品种中，广西灌阳县种植的吴茱萸和石虎含碱量分别是2.846%和1.34%，明显高于其他产区；疏毛吴茱萸含碱量最高的是贵州余庆县，含碱量为0.33%，明显低于吴茱萸和石虎。建议在发展吴茱萸的种类时，应重点考虑发展吴茱萸，从产地的规划上应重点考虑广西的北部和湖南的西南部及贵州的东南地区。

吴茱萸；疏毛吴茱萸；石虎；生物碱；HPLC指纹图谱

吴茱萸为芸香科落叶灌木或小乔木植物吴茱 萸 Evodia rutoecarpa （Juss.） Benth.、 石 虎 E.rutaecarpa （Juss.） Benth. var. officinalis （Dode）Huang 或疏毛吴茱萸 E. rutaecarpa （Juss.） Benth.var. bodinieri （Dode） Huang的干燥接近成熟的果实，前者药材名为大花吴萸，后二者为小花吴萸，三者均含有药用成分吴茱萸碱、吴茱萸次碱。吴茱萸主产于贵州、广西、湖南、浙江、四川等地，8～11月果实尚未开裂时采收。晒干或低温烘干。其用途始载于《神农本草经》，味苦性温，有小毒，归肝、脾、胃、肾经，为温中散寒、疏肝止痛的常用药，

主要用于厥阴头痛、寒腹疝痛、寒湿脚气、经行腹痛、脘腹涨痛、呕吐吞酸、五更泄泻、高血压等症[1]。吴茱萸碱和吴茱萸次碱是吴茱萸的主要活性成分,其含量直接影响药材的质量。近年来,有关吴茱萸中生物碱含量的研究工作较多[2-8]，为研究其含碱量对本身产生的经济效益，笔者选取我国吴茱萸主要产区，主要是对湖南、广西、浙江、江西、湖北等几个传统产区进行实地调查、取样分析，研究了其主要药用成分，分布区域，栽培发展规划。

1 试验地环境条件及材料

1.1 产区环境条件

通过实地采样进行检测，主要有吴茱萸、石虎、疏毛吴茱萸等三种材料。由于环境条件的关系，检测来自不同产地和不同种类的吴茱萸药材的生物碱含量。吴茱萸喜阳光充足、温暖、湿润的气候条件，适宜在低海拔、质地疏地肥沃、排水良好的酸性壤土中生长。要求年均气温16℃以上，全年≥10℃积温5 300℃，年降雨量1 200 mm ～1 400 mm，全年相对湿度78%，全年日照时数1 158 h，无霜期305 d。植株每年11～12月开始落叶，次年3月上旬返青发芽。一般定植后第3年开始结果。花期6～8月，果期9～10月。植株寿命一般5～20年，最长者达30～40年。采样地点即吴茱萸产地，采样地点的环境条件均符合国家环境质量的要求。

1.2 试验材料

采样地点主要有湖南、贵州、广西、江西、浙江等省区。吴茱萸的种类包括吴茱萸、石虎及疏毛吴茱萸。湖南产区的吴茱萸主要分布在怀化中方县和新晃县、岳阳汩罗县、常德津市市。主栽种类是石虎和疏毛吴茱萸。贵州产区，贵州产区的吴茱萸资源主要分布铜仁、遵义及黔东南等地，铜仁地区的印红、玉屏等县，以石虎和疏毛吴茱萸为主。广西产区 广西桂林灌阳县、灵川县以及百色、贺州等地。广西产区主要种植石虎和疏毛吴茱萸，种江西产区 樟树市、新干县、进贤县等县市，主栽种类是石虎，有少量的吴茱萸种植。浙江产区 浙江产区分布在建德、平阳、磐安等地，主栽种类为吴茱萸。

2 试验方法

对照品溶液制备：精密称取吴茱萸碱、吴茱萸次碱对照品各 0.1 mg, 置 10 mL 容量瓶中，用乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀作为储备液（C=10 μg/mL），放于 4℃冰箱备用。

色谱条件：Agilent Eclipse c18色谱柱（4.6 mm×250 mm,10 µm），对吴茱萸、疏毛吴茱萸、石虎中的吴茱萸碱和吴茱萸次碱进行高效液相色谱法含量测定，流速为1.0 mL·min-1，柱温 30℃；检查波长为260 nm。色谱分析方法参见文献[7-8]。

3 结果与分析

经随机人工采集，利用峰面积归一化法定量。数据处理采用EXCEL2003进行分析。

3.1 吴茱萸种类样本分析

测定3个种类吴茱萸中的吴茱萸碱、吴茱萸次碱，结果如表1所示。

表1 吴茱萸样品分析Table 1 Contents of evodiamine and rutaecarpine in different Evodia rutaecarpa species

通过对湖南、贵州、广西、江西、浙江等24个产区的吴茱萸挥发碱提取量的分析。吴茱萸主要成分为生物碱和柠檬苦素[1]，生物碱中主要成分为吴茱萸碱和吴茱萸次碱。24个地区的吴茱萸测出含碱量的结果如上表1。

3.2 不同种类及产地含碱率方差分析

3个种类吴茱萸产区的种类含碱量的方差分析结果见下表2，由表2可知，通过计算，F=（12.07 10.284 17.795）＞ F0.05，故拒绝H0，也就是说3种吴茱萸的总碱及吴茱萸碱与吴茱萸次碱的含碱量的差异达到了显著差异，那么我们在选择栽种吴茱萸时有必要考虑种类间的差异，选择含量较高的吴茱萸种类栽种。

由表2可知，不同产地吴茱萸的含碱量方差分析表明，其总自由度fa1=fa2=fa3=82，通过计算，F=（12.07 10.284 17.795） ＞ F0.05， 故 拒 绝 H0，也就是说不同产地吴茱萸的含碱量的差异达到了0.05显著差异。经方差分析显示，多重比较（q检验）可知，江西吉安市、江西樟树市和浙江建安市的吴茱萸含碱率之间的差异未达到极显著水平，湖南新晃县及江西樟树市两地的石虎也未达到极显著水平。

表2 不同种类含碱率的方差分析Table 2 Variance analysis of alkalinity in different Evodia rutaecarpa species

以上结果说明，（1）不同种类在吴茱萸主产区的分析有显著差异，吴茱萸种类的有效成分最高；（2）不同产区由于生态环境条件的差异较大的区域，吴茱萸含碱率有一定的差异，在环境条件接近或相似的区域，吴茱萸含碱率差异不显著。

3.3 三种吴茱萸不同产区含碱率差异

本研究分别对3种吴茱萸的吴茱萸碱、吴茱萸次碱及总碱含量进行分析。

3.3.1 不同产地吴茱萸含碱量分析

对9个产区：1湖南中方县、2湖南津市保河堤、3湖南津市市、4广西灌阳县、5江西吉安市、6江西樟树市7、贵州余庆县、8浙江建安市、9四川内江县等9个产区（图1中9个阿拉伯数字代表该9个产区）的吴茱萸进行吴茱萸碱与吴茱萸次碱进行分析，结果见图1。

图1 吴茱萸的吴茱萸碱及吴茱萸次碱产地对照分析Fig. 1 Comparative analysis of evodiamine and rutaecarpine of E. rutoecarpa in different production areas

图1 说明：以吴茱萸碱、吴茱萸次碱及总碱含量为质量指标来看：广西灌阳县种植吴茱萸含碱量最高,为2.846%，明显高于其他产区；其次湖南津市为1.260%；第三为贵州余庆县总碱量为1.210%；第四为湖南中方县总碱为1.210%，该4个区的总碱含量明显高于其他产区。吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量无线性交叉，也基本上按总碱分布规律。

3.3.2 疏毛吴茱萸不同产地含碱量分析

研究对7个产区的疏毛吴茱萸进行吴茱萸碱、吴茱萸次碱进行分析，图中7个阿拉伯数字代表以下7个产区：1湖南中方县2湖南津市保河堤3湖南浏阳市大围山4湖南湘阴县5湖南津市市6贵州余庆县7浙江建安市，分析结果如图2所示。

图2 疏毛吴茱萸的吴茱萸碱及次碱产地对照分析Fig.2 Comparative analysis of evodiamine and rutaecarpine of E. rutaecarpa var. bodinieri in production areas

图2 说明：疏毛吴茱萸以吴茱萸碱和吴茱萸次碱总含量为质量指标来看：种植吴茱萸含碱量为0.33%，明显高于其他产区；其次湖南津市市为0.27%；第三为湖南津市保河堤总碱量为0.266%。该3个产区的总碱含量明显高于其他产区。但是，吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量没有按其分布规律，湖南津市市和湖南津市保河堤的吴茱萸碱明显高于其它产区，而湖南湘阴县的吴茱萸次碱含量明显高于其它产区。

3.3.3 石虎不同产地含碱量分析

研究对8个石虎产区的进行吴茱萸碱与吴茱萸次碱进行分析，图中8个阿拉伯数字代表以下8个产区：1湖南新晃县2湖南中方县3湖南津市保河堤4湖南津市市5广西灌阳县6江西樟树市7贵州江口市8浙江建安市。

图3 石虎吴茱萸碱及次碱产地对照分析Fig. 3 Comparative analysis of evodiamine and rutaecarpine of E. rutaecarpa var. officinalis in production areas

图3说明：石虎以吴茱萸碱和吴茱萸次碱总含量为质量指标来看：广西灌阳县种植吴茱萸含碱量为1.34%，明显高于其他产区；其次湖南中方县总碱含量为1.275%；明显高于其它产区。吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量无线性交叉，含量也基本上按总碱含量的分布规律。

4 讨论与建议

（1）不同种类在吴茱萸主产区的分析有显著差异，吴茱萸种类的有效成分最高,其次石虎,疏毛吴茱萸的总碱含量最低；不同产区由于生态环境条件的差异较大的区域，吴茱萸含碱率有一定的差异，在环境条件接近或相似的区域，吴茱萸含碱率差异不显著。

(2) 以吴茱萸种类的主要药用成分来看，广西灌阳县种植吴茱萸含碱量为2.846%，明显高于其他产区；其次湖南津市市为1.260%；第三为贵州余庆县总碱量为1.210%；第四为湖南中方县总碱为1.210%，该4个区的总碱含量明显高于其他产区。吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量无线性交叉，也基本上按总碱分布规律。

（3）疏毛吴茱萸种类以吴茱萸碱和吴茱萸次碱总含量为质量指标来看：种植吴茱萸含碱量为0.33%，明显高于其他产区；其次湖南津市市为0.27%；第三为湖南津市保河堤总碱量为0.266%。该3个产区的总碱含量明显高于其他产区。但是，吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量没有按其分布规律，湖南津市市和湖南津市保河堤的吴茱萸碱明显高于其它产区，而湖南湘阴县的吴茱萸次碱含量明显高于其它产区。

（4）石虎以吴茱萸碱和吴茱萸次碱总含量为质量指标来看：广西灌阳县种植吴茱萸含碱量为1.34%，明显高于其他产区；其次湖南中方县总碱含量为1.275%；明显高于其它产区。吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量无线性交叉，含量也基本上按总碱含量的分布规律。

（5）由于吴茱萸种类及产地间的含碱量呈明显差异，在目前已有的野生状态的资源要保护的同时，要科学规划吴茱萸产业的发展，建议在发展吴茱萸的种类上应重点考虑发展吴茱萸，从产地的规划上应重点考虑广西桂北和湖南的湘西南及贵州的黔东南地区。

致谢：本研究在分析方面得到湖南农业大学曾建国教授的帮助，在此表示感谢。

[1] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京:人民卫生出社,2000：136.

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[3] 徐艳春,魏璐雪,周玉新,等.高效液相法测定黄连与吴茱萸配伍前后吴茱萸碱及吴茱萸次碱的含量[J]. 中国中药杂志,2001 ,26 (12) :846 - 847.

[4] 侯晓虹,于治国,徐赞美,等.34 种吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量测定[J].沈阳药科大学学报,2000,17(5):334 -337.

[5] 向志斌,李 平,黄瑞春,等.湘西自治州吴茱萸有效成分分析[J].经济林研究,2012,30 (1) :121-123

[6] 王承南. 我国木本药用植物开发利用发展思路[J]. 中南林业科技大学学报,2011,31(3) :71-75

[7] 于治国,侯晓虹,时 雅,等.HPLC 测定吴茱萸及其制剂中吴茱萸碱和吴茱萸次碱含量[J].中国药学杂志,1999,34(10) :691-693

[8] 柯铭清.中草药有效成分理化与药理特性(修订本)[M].长沙：湖南科学技术出版社，1982:225.

Studies on effective components of three kinds of Evodia rutoecarpa in different producing areas

WANG Cheng-nan, WANG Hong-juan, LI Ping, LIN Ling-qiu
(School of Forestry, Central South University of Forestry and Technology, Changsha 410004, Hunan, China)

The main medicinal components (evodiamine, rutaecarpine etc.) in Evodia rutoecarpa, E. rutaecarpa var. officinalis and E.rutaecarpa var. bodinieri in Chinese main production areas were studied. The results reveal that E. rutaecarpa had the highest effective component of E. rutaecarpa and 2 varieties, the alkali contents in E. rutaecarpa and E. rutaecarpa var. officinalis were 2.846% and 1.340% respectively in Guanyang county, Guangxi autonomous, China, which were more higher than that in other producing areas; E.rutaecarpa var. bodinieri growing in Yuqing county, Guanzhou province had the highest alkali content (0.33%), which was significantly lower than that in E. rutaecarpa and E. rutaecarpa var. officinalis. It is suggested that E. rutaecarpa should be vigorously developed, and in the aspect of producing area planning, the northern Guangxi, southwest of Hunan and southeast of Guizhou should be emphatically take into account.

Evodia rutoecarpa; E. rutaecarpa var. officinalis; E. rutaecarpa var. bodinieri; alkaloids; effective components; different producing areas

S792; S789.5

A

1673-923X(2012)08-0086-04

2012-03-25

国家林业局项目“吴茱萸栽培技术规程”（2011-LY-134）

王承南（1956—），男,湖南长沙人，教授.主要从事经济林栽培育种的教学与科研工作；E-mail:wchengnan@163.com

[本文编校：邱德勇]