银杏叶提取物对老年糖尿病患者认知功能及血清脑源性神经营养因子的影响

王想

近年研究表明高血糖可以累及中枢神经系统，称为“糖尿病脑病”，其通常表现为认知功能的障碍和神经电生理的异常，同时伴有神经生化、神经结构和脑的退行性改变［1］。研究表明银杏叶提取物可以对抗自由基，具有抗氧化作用，可以扩张脑血管对脑神经细胞具有保护作用［2］，对糖尿病大鼠导致的认知功能障碍也有显著治疗作用［3］。脑源性神经营养因子(BDNF)和 Hcy和认知功能有显著关系［3，4］，本研究拟在临床观察银杏叶提取物对改善老年糖尿病患者认知功能的影响，同时测定外周血BDNF、Hcy的变化。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择门诊及住院糖尿病患者100例。随机分为2组，常规治疗对照组(Control组)及添加银杏叶提取物治疗组(Ginkgo biloba treatment，GT组)，每组各50例。Control组采用胰岛素注射复合口服降糖药治疗，GT组在Control组常规治疗基础上加服银杏叶提取物胶囊0.3 g，2次/d口服。患者入选标准:年龄＞65岁，病程＞10年，符合2010年美国糖尿病学会诊断标准。即:1.糖化血红蛋白A1c水平≥6.5%。2.空腹血糖FPG≥7.0 mmol/L。空腹定义为至少8 h内无热量摄入。3.口服糖耐量试验时2 h血糖≥11.1 mmol/L。4.在伴有典型的高血糖或高血糖危象症状的患者，随机血糖≥11.1 mmol/L。排除标准:有精神病史，滥用精神药物者，酒精依赖者，严重视力、听力及肢体活动障碍者及伴有其他内分泌疾病者。

1.2 方法 所有患者知情同意，并填写同意书后，开始入组。疗程6个月。疗程结束时预约患者，由助手在安静房间进行MMSE评分、临床痴呆评定量表(clinic dementia rating scale，CDR)、日常生活行为量表(activities of daily living scale，ADL)及画钟测验(clock drawing test，CDT)等对神经认知功能评估。评分结束后外周采血，离心后-70冰箱保存，血样收集完整后ELISA试剂盒(R＆D公司，美国)测血清脑源性神经营养因子(BDNF)含量，精度0.01ng/ml。血清同型半胱氨酸(Hcy)采用日本日立7170全自动生化分析仪测定。1.3 记录指标 年龄、性别、血糖、糖化血红蛋白比值(HbA1C)。6个月后的神经心理检查结果，及外周血血清BDNF及血清同型半胱氨酸(Hcy)值。

1.4 统计分析 所有资料均采用SPSS 15.0软件包统计分析。计量资料采用均数±标准差表示(±s)，正态分布检验用one-sample K-S检验。组间血清水平采用独立样本t检验，MMSE评分采用方差分析(χ2检验)。P＜0.05认为差异有统计学意义。统计时剔除失访，中断治疗，疗程中同时采用其他药物治疗等不规律治疗患者资料。

2 结果

2.1 Control组有3例失访，1例中断治疗，GT组5例失访，1例疗程中有麻醉手术史，均剔除。有效资料中组间年龄、性别、体重、病程及受教育程度等一般资料差异无统计学意义(P＞0.05)。

2.2 GT组MMSE、评分显著低于Control组(P＜0.05);同时GT组血清BDNF水平显著低于Control组(P＜0.01)。见表1。

表1 组间认知功能评分(±s，分)

表1 组间认知功能评分(±s，分)

注:*与Control组相比较P＜0.05

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2.3 银杏叶提取物治疗组患者血清脑源性神经营养因子(BDNF)及血清同型半胱氨酸(Hcy)都显著低于对照组(P＜0.01)。见表2。

表2 患者组间血清BDNF与Hcy水平(±s)

表2 患者组间血清BDNF与Hcy水平(±s)

注:*与 Control组相比较 P＜0.05;＊＊与 Control组相比较 P＜0.01

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3 讨论

早在上世纪20年代，Miles和Root首先报道糖尿病患者存在认知功能障碍。1965年Nielsen通过观察16例糖尿病患者脑组织尸检标本，提出了“糖尿病脑病(diabetic encephalopathy，DE)”这一概念。但由于其临床表现多样且无特异性，发病机制复杂，DE仍缺乏诊断的金标准，“糖尿病脑病”作为一种独立的病种还不能被广泛的接受，但其带来的认知功能障碍确实客观存在的。一项糖尿病患者并发多种微血管和大血管并发症的早期研究显示所有的患者最终都出现显著的神经病变，以及尸检证实显著的神经病变损害影响了白质和灰质。长期的高血糖和反复发作的严重低血糖都可能影响脑组织，但是是通过不同的机制导致脑功能受损。

银杏叶为银杏科植物银杏树的干燥叶，又称白果叶。银杏叶制剂(ginkgo BilebsExtract，EGb)是国内外研究的热点，它的主要成分为银杏黄酮苷和银杏总内脂。EGb的黄酮类化合物能够降低血脂、改善血液流变学、降低LPO、提高SOD活力;能够舒张冠状动脉、改善血液循环、降低心肌耗氧量、降低钙离子内流、抑制血小板凝聚等。EGb中的银杏内脂是迄今临床应用最有价值的PAF受体拮抗剂［2］。

MMSE作为评估患者认知功能的方法是因为其具有较高的有效性和可靠性，这种方侧重于大脑功能的认知，排除了情绪和精神异常等因素的干扰，且简便易行，适用于老年患者全身麻醉手术后认知功能的评价。最高分为30分，有研究显示如MMSE评分低于23分患者自理能力及生活执行能力都下降。临床痴呆评定量表(CDR)、日常生活行为量表(ADL)及画钟测验(CDT)等都是常用的认知功能测量量表，本结果显示老年糖尿病患者加服EGb6个月后，认知功能显著得到了改善MMSE、CDR及ADL评分都显著低于对照组，而有趣的是画钟测验(CDT)评分，两组间却无差异。CDT简单、敏感和易行，其痴呆确诊率可达75%，因痴呆患者常不可能完整无缺地画一钟表盘面，本研究两组间无显著差异，可能的原因是全部入选病例本身无认知功能障碍，正常情况下6个月内变化较小。

BDNF和Hcy是可以从外周血检测出的与认知功能相关的两个常用指标。近年来的研究逐渐发现，BDNF与学习和记忆密切相关［5］。BDNF减少大鼠，其在记忆能力显著下降，其海马长时程增强(LTP)显著受损，而在外源性补充BDNF后这种损害可以显著修复［6］。突触可塑性是长期记忆形成的基础，有研究表明BDNF可以上调突触数目和活动依赖的轴突生长，在年龄相关性记忆衰退中发挥关键作用［7］。本研究显示糖尿病患者BDNF显著低于未患糖尿病的老年患者，提示BDNF的减少参与了老年糖尿病患者认知功能的下降。同样，血清同型半胱氨酸(Hcy)升高也和认知功能障碍的发生具有显著的相关性。结果显示，使用了银杏叶提取物以后的患者血清BDNF显著高于对照组，而同时Hcy显著低于对照组。结果提示银杏叶提取物可能通过保护神经细胞作用，改善了认知功能障碍的发生。

综上所述，在本研究条件下结论提示银杏叶提取物长期应用可以显著改善老年糖尿病患者认知功能障碍的发生，并且BDNF和Hcy参与了这种调节过程。

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