245例宫腔内人工授精夫妇染色体核型分析

陈志恒 孙 玲 全吴敏广州市妇女儿童医疗中心生殖医学中心，广东广州 510623

245例宫腔内人工授精夫妇染色体核型分析

陈志恒 孙 玲 全吴敏广州市妇女儿童医疗中心生殖医学中心，广东广州 510623

目的 探讨染色体核型多态性对夫精人工授精 （AIH）妊娠结局的影响。 方法 对245对接受夫精人工授精（AIH）治疗的夫妇行外周血染色体核型分析，分析核型多态性与夫精人工授精治疗结局的关系。 结果 检出染色体异常核型和染色体多态性49例 （发生率为10.0%），包括平衡易位2例 （0.41%），4号、9号染色体臂间倒位15例（3.06%），Y染色体多态性2例（0.41%），其他染色体多态性30例（6.12%）。染色体核型正常组与染色体臂间倒位组比较，AIH周期临床妊娠率无差异（P＞0.05），染色体核型正常组与常染色体多态性组比较，周期临床妊娠率有差异（P＜0.05）。 结论染色体臂间倒位对人工授精临床妊娠率无明显影响，常染色体多态性对AIH妊娠率并无负面影响。

染色体；染色体多态性;人工授精

不孕不育是妇科常见病，可由多种因素引起，其中染色体异常是重要原因之一，因此为了子代的安全，在实施辅助生育技术治疗前会对患者夫妇进行细胞遗传学检查。其中发现部分为染色体核型异常和染色体多态性患者，这些染色体异常和多态性对采用辅助生育技术后的妊娠率和妊娠结局有何影响越来越受到医学界的重视。染色体多态性是指生物物种之内个体之间的正常变异，表现在结构及带型强度的变异，传统理论认为此区无遗传信息传递，发生变异后一般不会引起临床表型异常，多年来各国学者均认为染色体多态性与生殖异常无明确关系。然而，许多临床医生发现不少染色体呈多态性的个体存在生殖异常[1]。由此，为了探讨染色体核型异常和多态性对夫精人工授精（AIH）妊娠率和妊娠结局的影响，本文对本生殖中心245对行夫精人工授精治疗的夫妇的细胞遗传学检查结果以及实施人工受精后的妊娠率和妊娠结局进行统计，现汇报如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2004年1月～2009年11月在我院生殖中心就诊的245对不孕患者夫妇，其中，原发不孕147例，占60.0%，继发不孕98例，占40.0%，女方平均年龄（32.2±4.0）岁，男方平均年龄（34.7±4.5）岁，平均不孕年限（4.5±3.1）年。治疗前男女双方均按卫生部相关要求进行排查，符合人工授精适应症，均无人工授精禁忌证，245对夫妇共行人工授精422个周期。

1.2 方法

1.2.1 中期染色体G显带分析 患者夫妇双方术前检查时常规行染色体检查，取外周血抗凝，接种于1640培养基，37℃培养72 h，常规制片、G显带观察，必要时行C显带、R显带。每例计数30个中期核型，分析3个核型。如疑嵌合体，计数100个中期分裂相。

1.2.2 夫精人工授精 卵泡监测和人工授精时机：①自然周期：于月经第10～12天开始经阴道B超监测卵泡发育，当优势卵泡径线达到14 mm以上时，结合尿LH监测，出现尿LH峰后12～36 h行人工授精。②克罗米芬促排卵周期：于月经第五天给予克罗米芬50～100 mg/d，连续5 d，停药2 d后开始监测卵泡，视卵泡发育情况可加用人绝经期促性腺激素（HMG，珠海丽珠医药有限公司）75～150 IU/d，卵泡直径达20 mm时给予HCG 5 000～10 000 IU肌注，24～36 h后行人工授精IUI。③hMG组：在月经周期的第3～5天开始注射hMG，150 IU/d，连续5 d，然后根据卵泡发育调整剂量直到成熟后停药。当LH峰出现或卵泡直径平均达18 mm时，注射hCG 5 000～10 000 IU，24～36 h 后行人工授精。

1.3 妊娠的判断标准

人工授精术后14 d通过血β-HCG检测确定是否妊娠。妊娠者术后5周B超检查了解胚胎情况，可见妊娠囊、卵黄囊、胚芽及胎心搏动者为临床妊娠。

1.4 统计学方法

采用SPSS 13.0统计软件进行数据统计分析，临床妊娠率的比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 染色体异常和多态性的发生率

245 对不孕症夫妇双方共检查出染色体异常核型和染色体多态性49例 （10.0%），包括平衡易位2例 （0.41%），4号、9号染色体臂间倒位15例 （3.06%），Y染色体多态2例（0.41%），其他染色体多态性30例（6.12%），其详细分类妊娠情况见表1。

2.2 染色体核型对夫精人工授精结局的影响

199 对染色体核型正常夫妇共经过352个AIH治疗周期，临床妊娠52例，临床妊娠率为14.77%。46对夫妇检出核型异常、染色体臂间倒位和多态性共49例。其中2对夫妇检出2例染色体平衡易位（配偶单方为平衡易位，另一方核型正常），共行2个周期AIH均未孕。另有13对夫妇检出4号和9号染色体臂间倒位15例，其中有2对夫妇同时为9号染色体臂间倒位，1对夫妇男方为Y染色体多态携带者，女方为9号染色体臂间倒位携带者（这对夫妇AIH周期统计归入染色体臂间倒位组），这13对夫妇共行AIH 21周期，临床妊娠2例，临床妊娠率为9.52%，与核型正常组比较临床妊娠率无差异（P＞0.05）。还有1对夫妇男方为Y染色体多态携带者行2个周期AIH均未孕。30例其他常染色体多态夫妇共行45个AIH周期，临床妊娠13例，临床妊娠率为28.89%，与正常染色体组相比临床妊娠率有差异（P＜0.05）。

3 讨论

3.1 平衡易位对AIH妊娠率的影响

平衡易位携带者由于没有造成染色体片段的增加和减少，一般个体表型正常，但由于其配子多为不平衡，在形成配子的减数分裂前期Ⅰ的粗线期可形成四价体，从而产生18种类型的配子，其中只有1种正常，1种为表型正常的平衡易位携带者，其他均为单体或部分单体，三体或部分三体，这种不平衡配子是导致畸形、死胎及反复流产的主要原因[2]。但张月萍等[3]曾报道，在其研究的194例平衡易位携带者中有20.1%的夫妇得到了正常（或）平衡易位后代，提示平衡易位携带者也有成功受孕并生育正常后代的可能性。本研究2例平衡易位行2个周期AIH均未受孕，由于例数过少，仍需在以后工作中进一步总结研究。

表1 染色体核型异常和多态性分类

3.2 臂间倒位对AIH妊娠率的影响

臂间倒位几乎涉及每条染色体，其中以9号染色体的发生率最高，在一般人群中可达0.82%[5]，有关9号染色体臂间倒位的生物学效应，有学者认为由于倒位并不导致遗传物质的丢失，不具有病理学意义[6]，但也有报道认为臂间倒位染色体携带者当形成生殖细胞减数分裂时，按同源染色体节段相互配对，形成特有的倒位环，在环内进行交换可产生四种不同类型配子，一种完全正常，一种为倒位携带者，另两种为部分重复和部分缺失，前两种与正常细胞受精后一种发育成正常个体，另一种为倒位携带者，后两种为不平衡配子，胚胎很难存活，将导致流产和死胎[7]。本研究中245对夫妇490例染色体检查中9号染色体臂间体倒位14例，发生率约为2.86%，远高于正常人群0.82%。此外本研究中15例臂间倒位患者共进行21个周期AIH，共获得2例妊娠，妊娠率为9.52%，与染色体正常组相比无差异（P＞0.05），其结果表明臂间倒位并不影响AIH成功率，这与周友泉等[8]提出的inv（9）的主要临床效应是不良孕产史而非不孕不育的观点相符。

3.3 Y染色体多态性对AIH妊娠率的影响

关于Y染色体多态性是否会引起遗传效应一直以来都存在争议。有学者认为，大Y是一种正常的染色体多态性变异，不会引起临床效应[9]。也有研究发现，大Y与自然流产、胚胎停育、死胎等不良孕产史有关[10]，在近期辅助生育技术研究中，有作者认为大Y染色体对体外受精－胚胎移植的胚胎发育及近期妊娠结果均无显著影响[11]，本研究中Y染色体多态性2例，发生率为0.82%，3周期均未获妊娠。由于例数过少仍需进一步总结。

3.4 其他常染色体多态性对AIH妊娠率的影响

常染色体的多态性主要以异染色质的变异为主，含有高度重复DNA的异染色质尤为明显，结构异常染色质集中分布于着丝粒、端粒、随体、次缢痕和Y染色体长臂。异染色质在着丝粒功能方面起着至关重要的作用，是姐妹染色单体结合和染色体分离所必需的[4]，异染色质的异常有可能影响在减数分裂时染色体配对联会和配子的形成，导致生育方面的异常。本研究中染色体多态性主要表现为随体的有无和个数（D组和G组5对染色体）、副缢痕的增长等，共30例，发生率为6.12%，共行45个AIH周期，共获得13例妊娠，妊娠率为28.89%，与正常染色体组相比有差异（P＜0.05），因此染色体多态性表现中随体变异和副缢痕的增长等对AIH妊娠率并无负面影响。

综上所述，本研究检测的染色体臂间倒位与核型正常者在AIH治疗后临床妊娠率无差异，而常染色体多态性核型携带者与核型正常者在AIH治疗后临床妊娠率有差异，常染色体多态性对AIH妊娠率无负面影响，由此笔者推测，染色体臂间倒位和多态性并不是生育的绝对禁忌证，即使是染色体臂间倒位和多态性核型携带者，其成功妊娠并生育出表型正常活产儿的可能性并不低于核型正常者。但在本研究AIH人群中，均为不孕症群体，其染色体异常及多态性率高达10%，显著高于一般人群染色体异常发生率（0.5%）[12]，因此，对将要进行辅助生殖治疗的夫妇进行细胞遗传学检查是非常必要的，同时须告知患者，虽然部分的核型异常和多态性并不影响AIH的妊娠率和结局，但却仍然有将异常染色体基因传给后代的可能性，而且女性携带者较男性携带者更易出现异常妊娠的情况，让患者有充分的知情选择权。

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Chromosome karyotype analysis among 245 couples with artificial insemination in uterine cavity

CHEN ZhihengSUN LingQUAN Wumin
Reproductive Medical Center,Guangzhou Women and Children Medical Center,Guangdong Province,Guangzhou 510623,China

Objective To explore influence of karyotype polymorphism on pregnant outcome of artificial insemination to husband(AIH).Methods Chromosome karyotypes from peripheral blood of 245 couples accepting AIH were analyzed in order to find the relationship between karyotype polymorphism and pregnant outcome of AIH.Results The number of abnormal chromosome karyotype and karyotype polymorphism cases was 49,accounted for 10%.It contains four aspects:balanced translocation(2 cases),pericentric inversion of chromosome 4 and 9(15 cases),Y chromosome polymorphism(2 cases),and other chromosome polymorphism (30 cases),at the percentages of 0.41%,3.06%,0.41%,and 6.12%respectively.There was no significant difference in clinical pregnancy rate of AIH cycle between normal chromosome karyotype and pericentric inversion group (P＞0.05).However,the clinical pregnancy rate of AIH cycle showed a statistical difference between normal chromosome karyotype and autosomal polymorphism group (P＜0.05).Conclusion The impact from pericentric inversion on AIH′s clinical pregnancy rate is very subtle,and there is no negative effect on AIH′s clinical pregnancy rate by autosomal polymorphism.

Chromosome;Chromosome polymorphism;Artificial insemination

R715.2

A

1673-7210（2012）08（b）-0040-03

2012-05-02 本文编辑：郝明明）