自体骨髓干细胞肝内移植对失代偿期肝硬化患者肝脏生化及纤维化指标的影响

吕明磊 刘琴 贾秋龙 甄増国

自体骨髓干细胞肝内移植对失代偿期肝硬化患者肝脏生化及纤维化指标的影响

吕明磊 刘琴 贾秋龙 甄増国

目的观察自体骨髓干细胞肝内移植对失代偿期肝硬化肝脏生化及纤维化指标的影响，为临床治疗提供新方法。方法选择我院失代偿期肝硬化住院患者80例，随机分为2组:对照组40例，给予常规对症支持治疗、护肝治疗及必要的抗病毒治疗。治疗组40例，在对照组常规治疗方法基础上，采取经肝动脉途径自体骨髓干细胞肝内移植。观察术后临床症状改善及不良反应情况，并于术后2、4、8、12周进行肝功能、凝血功能检测，术后12周进行肝纤维化指标检测。将术后12周时检测结果进行比较。结果治疗组术后第1周全部患者(100%)乏力、纳差症状改善，35例(87.5%)腹胀减轻，而对照组只有2例(5.0%)乏力、纳差症状改善，6例(15%)腹胀减轻，两组间差异有统计学意义(P＜0.05);治疗后12周，治疗组和对照组血清ALB水平分别为(38.5±8.2)g/L和(25.4±7.5)g/L，ALT和AST水平分别为(36.3±13.5)U/L，(33.6±14.5)U/L和(70.2±13.3)U/L，(68.6±13.8)U/L，TBIL水平分别为(28.3±12.4)μmol/L和(42.3±16.3)μmol/L，PTA分别为(63.0±11.4)%和(37.2± 12.5)%，治疗组肝纤维化指标明显改善。两组治疗后肝脏生化及纤维化指标比较，差异有统计学意义(P＜0.01)。治疗组2例在治疗后第2天出现低热，未发现其他不良反应及并发症。结论自体骨髓干细胞肝内移植治疗失代偿期肝硬化安全有效，在肝功能、凝血功能及肝纤维化指标改善方面均有显著作用。

骨髓干细胞;移植;肝硬化

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2009年6月至2011年6月间在我院住院的失代偿期肝硬化患者80例，男52例，女28例，年龄22～72岁，平均48岁，其中包括乙型肝炎肝硬化58例，丙型肝炎肝硬化l7例，酒精性肝硬化5例。治疗前均存在肝硬化常见症状和体征，包括纳差、乏力、腹胀，同时经腹部B超或CT检查，明确诊断肝硬化，部分并合并腹水。实验室检查包括血常规，凝血酶原活动度(PTA)，甲胎蛋白(AFP)，肝功能包括血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)，肝纤维化指标包括透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和四型胶原(ⅣC)等。肝功能分级属Child-Pugh B/C级。无感染和原发性肝癌等并发症。将患者随机分为两组，治疗组40例，对照组40例，两组间差异无统计学意义(P＞0.05)。

1.2 治疗方法 对照组给予内科支持治疗，包括保肝、利胆、利尿及对症治疗等。酌情给予肝水解肽100 mg、还原性谷胱甘肽1.2 g，或促肝细胞生长素120 mg、复方甘草酸苷120 mg等分别加入5%葡萄糖或0.9%氯化钠注射液100 ml中静脉滴注，1次/d，同时适当限钠限水。疗程4～6周。对乙肝病毒复制活跃的乙肝肝硬化患者，给予必要的抗病毒治疗。治疗组在对照组上述治疗的基础上采取经肝动脉途径行自体骨髓干细胞肝内移植治疗。

1.3 术前准备 干细胞移植术前1 d房间消毒、行碘过敏试验、双侧腹股沟备皮、消除其紧张情绪;移植术当日签署知情同意书，隔离患者。

1.4 骨髓干细胞采集及分离 取两侧髂后上棘为穿刺点，局部消毒麻醉，在无菌条件下，以l8号骨髓穿刺针穿刺，抽取骨髓200 ml，以7500 U肝素抗凝，然后采用密度离心法进行骨髓干细胞的体外分离及纯化，将得到的干细胞用0.9%氯化钠溶液稀释成骨髓干细胞悬液10 ml。

1.5 骨髓干细胞移植 在DSA下经股动脉穿刺插管，置管于肝固有动脉进行造影，观察肝内血管情况。将待用的骨髓干细胞悬液10 ml于0.5 h内经左右肝动脉缓慢注入;术毕拔管，穿刺点加压包扎后返回病房，穿刺侧下肢制动24 h。

1.6 观察指标 全部病例治疗前均查血常规、PTA、AFP，肝功能、肝纤维化指标等，术后2、4、8、12周复查血常规、PTA、AFP、肝功能，术后12周复查肝纤维化指标。

1.7 统计学方法 计量资料采用均数±标准差(x±s)表示，组间比较采用成对资料的t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 临床症状的改善情况 干细胞移植术后第1周开始本组全部患者(100%)乏力、纳差症状有明显的改善，面色有光泽，35例(87.5%)腹胀减轻，而对照组患者只有2例(5.0%)乏力、纳差症状明显改善，6例(15%)腹胀减轻，两组间差异有统计学意义(P＜0.05)。

2.2 肝脏生化指标及凝血功能的改善情况 治疗组自术后第2周血清白蛋白水平开始上升，第4周PTA有明显改善。术后第12周时，TBIL下降水平显著高于对照组;两组肝功能指标及凝血酶原活动度变化比较，差异有统计学意义(P＜0.01)，详见表1。两组治疗后血清AFP及外周血红细胞、白细胞和血小板计数无明显的变化(具体数据未列出)。

2.3 肝纤维化指标改善情况 术后第12周时，两组肝纤维化指标变化情况比较，差异有统计学意义(P＜0.01)，详见表2。

表1 两组患者术后第12周时肝功能指标和PTA变化情况比较±s)

组别 例数 ALB(g/L) ALT(U/L) AST(U/L) TBIL(μmol/L) PTA(%)治疗组 40 38.5±8.2 36.3±13.5 33.6±14.5 28.3±12.4 63.0±11.4对照组 40 25.4±7.5 70.2±13.3 68.6±13.8 42.3±16.3 37.2±12.5 t值 7.456 -11.315 -11.058 -4.324 9.645 P值 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01

表2 两组患者术后第12周时肝纤维化指标变化情况比较(x±s)

2.4 不良反应 治疗组中除2例术后第2天出现低热，第3天恢复正常外，未发现其他不良反应及并发症。

3 讨论

肝硬化是各种慢性病因导致肝细胞坏死、纤维组织增生、结构破坏、形成假小叶、肝质地变硬的常见疾病，治疗重点在于有效促进肝细胞再生并代替纤维组织。研究发现，在各种原因导致的肝细胞急慢性损伤的修复过程中，肝细胞再生起重要作用。骨髓干细胞是一种具有向某些成体细胞进行分化潜能的细胞，是肝细胞的重要肝外来源［2］。由骨髓干细胞定向分化而来的肝细胞能够很好地替代已损伤的肝细胞而发挥正常的生理代谢作用，进而使得肝脏解毒、合成等诸多功能得到较大程度的恢复，而且可以逆转肝纤维化过程［3］。国内姚鹏等［4］首先采用自体骨髓干细胞治疗慢性肝衰竭，发现其在症状改善和降低病死率方面效果明显;金波等［5］证实自体骨髓干细胞肝内移植后，肝脏的合成功能可以很快提升，且能更快地改善肝脏的解毒及储备功能，在恢复残余肝功能容量方面与常规治疗比较显出更强的疗效优势。自体骨髓干细胞肝内移植治疗有以下优点［6］:①骨髓干细胞源于自体，取材方便。②疗效较明显。③费用较低。④风险性小。骨髓抽取过程简单，采用的介入微创技术目前也已经很成熟。术后患者大多恢复良好。

我们对40例失代偿期肝硬化进行自体骨髓干细胞肝内移植治疗，发现全部患者消化道症状有不同程度的改善，并于治疗后第2周血清白蛋白水平开始显著提升，第4周时凝血酶原活动度有明显改善，第12周时TBIL下降水平显著高于对照组，肝纤维化指标明显改善，更进一步证实了该项治疗在肝功能、凝血功能及肝纤维化指标改善方面均有显著作用。治疗组除2例术后第2天出现低热，第3天恢复正常外，未发现其他不良反应及并发症，表明该疗法是安全的。

自体骨髓干细胞肝内移植治疗失代偿期肝硬化患者疗效显著，可明显改善患者的临床症状和体征，抑制病情发展速度，提高患者生存质量。但骨髓干细胞移植的研究目前仍然存在很多问题，如干细胞是否需要在体外进行扩增、干细胞经不同途径进行移植的优势比较、干细胞移植数量和移植手术次数的多少对临床治疗效果的影响等，有待以后进一步探讨。

［1］姚鹏，胡大荣，王帅，等.重型肝炎的自体骨髓干细胞移植治疗评估.传染病信息，2009，22(5):288-290.

［2］胡敏.肝脏干细胞与肝脏再生.传染病信息，2011，24(3): 129-131.

［3］Shackel N，Rockey D.In pursuit of the“Holy Grail”-stem cells，hepatic injury，fibrogenesis and repair.Hepatology，2005，41(1): 16-18.

［4］姚鹏，胡大荣，王帅，等.自体骨髓干细胞移植治疗慢性肝衰竭研究.肝脏，2005，10(3):171-173.

［5］金波，孟繁平，冯宇，等.肝动脉超选灌注自体骨髓干细胞治疗失代偿期乙型肝炎肝硬化的临床研究.传染病信息，2011，24 (3):143-146.

［6］周健，刘黎，李多云，等.自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化失代偿期患者的临床效果.现代医学，2010，38(5):467-470.

The influence of autologous bonem arrowstem cells transp lation on the indicators of biochem ical and fibrosis liver of the patients with decom pensated cirrhosis

LVMing-lei，LIU Qin，JIAQiu-long，et al.

De-partment of Liver Disease，Xinxiang Infectious Disease Hospital，Xinxiang 453000，China

ObjectiveTo provide newmethods for clinical treatment through observing the influence of autologous bonemarrowstem cells transplation on the indicators of biochemical and fibrosis liver of the patients with decompensated cirrhosis.Methods80 patients with decompensated cirrhosis in Xinxiang Infectious Disease Hospital were randomly divided in two groups:40 patients in control group were given regular symptomatic support treatment，liver protection treatment and the necessary antiviral treatment.On the basis of regular treatment of control group，40 patients in treatment group were taken the hepatic artery way autologous stem cell within the liver transplantation.Observe the postoperative clinical symptoms improvement and adverse reaction conditions of the patients;detect liver function and coagulation function in 2nd，4th，8th，12th weeks after the operation;to detecthepatic fibrosis indicators in the12thweek after the operation.At last，the test results in the 12thweek were compared.ResultsIn the 1rdweek after the operation，all patients(100%)in treatment group had improved their weakness and NaCha Symptoms，35 cases(87.5%)had reduced their abdominal distensions.While only 2 cases(5.0%)had improved their weakness and NaCha Symptoms，6 cases(15%)had reduced their abdominal distensions.The difference between two groups had a statistical significance(P＜0.05) .12 weeks after the treatment，serum ALB leverl of treatment group and control group are(38.5±8.2)g/L and(25.4±7.5)g/L.ALT level and AST level are(36.3±13.5)U/L and(33.6±14.5)U/L and(70.2± 13.3)U/L，(68.6±13.8)U/L.TBLL level are(28.3±12.4)μmol/L and(42.3±16.3)μmol/L;PTA are(63.0±11.4)%and(37.2±12.5)%.Patients in treatment group had clearly improved their hepatic fibrosis indicators.The difference between the two group in camparasion of the indicators of liver biochemistry andfibrosis has a statistical significance(P＜0.01).2 patients in treatment group suffered lowfever in the 2ndday after the treatment，no other adverse reactions and complications were found.ConclusionIt is safe and effective to use autologous bonemarrowstem cells transplation to treat the patients with decompensated cirrhosis.There are significant role in the improvementof liver function，coagulation function and the indicators of liver fibrosis.

Bonemarrowstem cell;Transportation;Liver cirrhosis

453000 河南省新乡市传染病医院肝病科

失代偿期肝硬化尚无理想治疗方法。研究表明采用自体骨髓干细胞肝内移植，可使干细胞在肝脏中生长分化为肝细胞，使损伤的肝功能得以恢复和重构［1］。本研究采取经肝动脉插管途径行自体骨髓干细胞肝内移植治疗失代偿期肝硬化，通过观察该治疗方法对患者临床症状、肝脏生化及纤维化指标的影响，对其疗效和安全性进行了探讨和验证。