肝复康胶囊对氨基半乳糖所致小鼠肝损伤的疗效研究

刘彦双，杨贵真

（河北医科大学，河北 石家庄 050200）

肝复康胶囊对氨基半乳糖所致小鼠肝损伤的疗效研究

刘彦双，杨贵真

（河北医科大学，河北 石家庄 050200）

目的 探讨肝复康胶囊对氨基半乳糖所致小鼠肝损伤的疗效。方法 将肝复康胶囊灌胃给予，腹腔注射氨基半乳糖致小鼠肝损伤。用半自动生化分析仪测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性，取小鼠肝脏做病理形态学观察。结果 给予肝复康胶囊（0.9、1.8、3.6 g/kg·d）可显著降低氨基半乳糖肝损伤小鼠血清ALT和AST活性，并使肝病理损伤有不同程度减轻。结论 肝复康胶囊对小鼠急性肝损伤有明显治疗作用。

肝复康胶囊；氨基半乳糖；肝损伤

肝复康胶囊是复方中草药制剂，主要由当归、鳖甲、白芍、三七、厚朴、茵陈、猪苓等中草药组成，具有活血化淤、清热利湿、扶正祛邪和滋养肝肾之功效。为进一步了解肝复康胶囊的药理作用和临床应用价值，我们应用氨基半乳糖所致急性肝损伤的动物模型，研究本品的护肝作用。

1 材料

1.1 药品

肝复康胶囊，70毫克/粒，由河北医科大学科技总公司提供。联苯双酯滴丸，由北京协和药厂生产，1.5毫克/粒。

1.2 动物

昆明小鼠60只，雌雄各半，体重18～22 g，由河北医科大学实验动物中心提供。

1.3 试剂

氨基半乳糖用生理盐水配成10%溶液。丙氨酸氨基转移酶（ALT）试剂盒和天冬氨酸氨基转移酶（AST）试剂盒，由石家庄试剂厂生产。

1.4 仪器

可见／紫外分光光度仪，半自动生化分析仪，恒温水浴箱。

2 方法

2.1 氨基半乳糖肝损伤动物模型的制备[1，2]

取昆明小鼠60只，随机分成空白对照组、氨基半乳糖肝损伤模型组（简称模型组）、肝复康胶囊3个剂量组（0.9、1.8、3.6 g/kg·d）、阳性对照药联苯双酯组（200 mg/kg·d），每组 10 只。联苯双酯组及肝复康胶囊3个剂量组每天灌胃给药一次，模型组和空白对照组以等容积自来水灌胃，连续7天，于末次给药后1小时，除空白对照组外，其余各组均腹腔注射10%氨基半乳糖800 mg/kg（生理盐水配制），空白对照组则腹腔注射等量生理盐水，24小时后测定指标，摘取眼球取血，分离血清，按试剂盒说明测定血清ALT和AST活性。采血完毕，断头处死小鼠，取肝左叶部位约0.5 cm3固定于Bone氏液中，包埋，修块，切片，HE染色，做病理形态学观察。小鼠处死前自由饮水，禁食12小时。

2.2 统计学处理

采用EXCEL软件处理的两组间t检验和方差分析方法。

3 结果

3.1 病理形态学观察

空白对照组肝小叶结构清晰，肝细胞结构正常，肝细胞索结构清晰，围绕中央静脉呈放射状排列（见图1）。模型组可见肝脏正常结构被破坏，肝小叶排列紊乱，肝细胞边界不清楚，胞浆疏松，肝窦受压变窄，肝细胞大量变性坏死，有气球样变或嗜酸性变，汇管区大量淋巴细胞浸润且有大量的胶原纤维增生（见图2）。肝复康胶囊大剂量组可见肝小叶结构大致正常，肝细胞变性坏死情况较轻，与模型组比较肝脏病理改变有显著改善（见图3）。

图1 空白对照组肝脏病理形态（HE 染色×160）

图3 肝复康胶囊大剂量组肝脏病理形态（HE染色×160）

3.2 对血清ALT、AST的影响

实验结果表明:与空白对照组比较，模型组小鼠的血清ALT和AST活性显著升高。与模型组比较，肝复康胶囊3个剂量组及联苯双酯组小鼠的血清ALT和AST活性均明显降低（见表1）。

表1 肝复康胶囊对氨基半乳糖所致急性肝损伤小鼠血清 ALT、AST 活性的影响（n=10，±s，d）

表1 肝复康胶囊对氨基半乳糖所致急性肝损伤小鼠血清 ALT、AST 活性的影响（n=10，±s，d）

注：与模型组比较*P<0.01

剂量（g/kg） ALT（U/L） AST（U/L）空白对照组模型组联苯双酯组肝复康胶囊组__0.2 0.9 1.8 3.6 32.1±4.6*195.0±13.2 56.2±6.4*154.8±12.9*140.8±24.1*180.3±15.1*296.4±15.2*367.0±18.2 308.6±17.4*323.2±31.1*320.5±18.4*323.6±16.9*

4 讨论

肝损伤是多因素参与的复杂过程，自由基和脂质过氧化反应在肝损伤及肝疾病中起十分重要的作用。氨基半乳糖是肝细胞的磷酸尿嘧啶核苷的干扰剂，进入机体后与磷酸尿苷（UDP）结合形成UDP-半乳糖胺，致使磷酸尿苷耗竭，从而使依赖其生物合成的核酸、糖蛋白、脂糖等物质合成受抑制，限制了细胞器及酶的生成和补充，细胞器受损，膜损害，造成肝细胞变性坏死[3]。本实验证实氨基半乳糖可使小鼠血浆转氨酶活力明显提高。中医认为：肝脏疾病毒邪是致病的基本因素，正虚是发病和邪气滞留的关键，血淤是病证的主要特点。临床常见证型是：热毒炽盛和湿热熏蒸，气滞血淤和肝淤气滞，脾胃不足和肝肾亏虚。治疗往往多药联合应用。肝复康胶囊是一种复方中药制剂，具有活血化淤，清热利湿，扶正祛邪之功效。鳖甲既可软坚散结，又可滋阴潜阳。当归、三七养血活血，行气祛淤。本实验同时证实联苯双酯有明显的保肝降酶作用，而肝复康胶囊具有相似的治疗效果，这为肝复康胶囊的临床应用提供了一定的药理学依据。

[1]Hu H.Proxidaftion mechanism and Protective effect of zine on D-galactosmine induced liver injury in rats[J].Chin J Pharmacol and Toxicol，2003（7）:81.

[2]Hernardez-Munoz R，Dlaz-Munoz M，Suarez J，et al.Adenosine Partially prevents cirrhosis induced by carbon tetrachloride in rats[J].Hepatology，2003，12（2）:242～248.

[3]黄晓菡，曾文铤，朱科伦，等.丹芪活肝胶囊对D-氨基半乳糖致大鼠肝损伤的保护作用[J].广州医药，2009，40（5）：44～47.

R285.5

B

1671-1246（2012）07-0111-02