芦笋提取物的抗氧化作用的研究

马朝阳，马淑凤，*，王 芳，代 卉，王周平，黄云祥

（1.江南大学食品科学与技术国家重点实验室，江苏无锡 214122；

2.江南大学食品学院，江苏无锡 214122；

3.河北省芦笋工程技术研究中心，河北秦皇岛 066000）

芦笋提取物的抗氧化作用的研究

马朝阳1，2，马淑凤1，2，*，王 芳2，代 卉2，王周平1，2，黄云祥3

（1.江南大学食品科学与技术国家重点实验室，江苏无锡 214122；

2.江南大学食品学院，江苏无锡 214122；

3.河北省芦笋工程技术研究中心，河北秦皇岛 066000）

目的：研究芦笋提取物对氧化应激小鼠抗氧化功能的影响。方法：以D-半乳糖衰老模型小鼠为研究对象，每天经口灌胃芦笋提取物和阳性对照药（VC），连续给予受试物30d后，测定其脂质过氧化水平和抗氧化酶活力。结果：芦笋提取物可以提高氧化应激小鼠血浆和肝脏中GSH、SOD、GSH-PX、T-AOC活性（p＜0.05），显著降低其血浆和肝脏中MDA的含量（p＜0.05）。结论：芦笋提取物有助于增强氧化应激小鼠的抗氧化能力。

芦笋提取物，抗氧化，氧化应激模型，小鼠

芦笋（Asparagus officinalis L.）又名石刁柏、龙须菜，被世界卫生组织列为世界十大最具有营养价值的蔬菜之首，是国际上公认的防癌保健蔬菜[1]。芦笋具有低糖、低脂肪和高纤维的营养特点，是世界流行的大众蔬菜，其嫩茎食用，种子用作咖啡的替代品[2]。现代科学研究证明：芦笋中含有大量的甾体皂苷、多糖、黄酮和酚类化合物、类胡萝卜素、膳食纤维、多种维生素和游离氨基酸、叶酸和核酸，具有抗肿瘤、免疫调节、抗衰老抗疲劳、降血脂、保肝解毒等特殊的功效[3-4]。机体的抗氧化系统与健康密切相关，少量的氧自由基不但对人体构不成威胁，而且还可以帮助传递维持生命力的能量、增强免疫力、消除炎症、抑制肿瘤等[5]。但过多的自由基会对生物大分子产生超氧化反应，从而导致细胞结构和功能的改变，是引起许多疾病发生的重要原因[6]。氧化应激可由多种原因造成，D-半乳糖供给过量，超常产生活性氧，打破了受控于遗传模式的活性氧产生与消除的平衡状态[7]，是引起过氧化效应的一种原因。为了提高机体的抗氧化水平，可以选择添加抗氧化剂的方法，因此无毒副作用的天然抗氧化剂引起了生产者的广泛关注[8-12]。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

实验动物 70只健康昆明种小鼠，体重（20±2）g，单一雄性，上海斯莱克实验动物有限责任公司，实验动物生产许可证号SCXK（沪）2007-0005，动物合格证号为：2007000517939号，实验条件保持温度为20～25℃，相对湿度为40%～70%，实验动物使用许可证普通环境许可证号：SYXK（苏）2012-0001；芦笋醇提取物 秦皇岛长胜农业科技发展有限公司；VC、D-半乳糖 国药集团化学试剂有限公司；MDA试剂盒、SOD试剂盒、T-AOC试剂盒、GSH试剂盒、GSH-PX试剂盒、血红蛋白试剂盒、考马斯亮蓝试剂盒 均购自南京建成生物工程研究所。

MK 3酶标仪 上海雷勃分析仪器厂；超低温冰箱 SANYO公司；DS-260全自动生化分析仪 南京神州应诺华有限公司；UV2800紫外可见分光光度计尤尼柯上海仪器有限公司。

1.2 动物分组与处理

实验小鼠设7组：一个空白对照组、一个D-半乳糖模型对照组、四个芦笋提取物剂量组、一个VC阳性对照组（35mg/kg·bw）。芦笋提取物四个剂量组分别设置为：芦笋提取物处理组Ⅰ：7mg/kg·bw，芦笋提取物处理组Ⅱ：35mg/kg·bw，芦笋提取物处理组Ⅲ：105mg/kg·bw，芦笋提取物处理组Ⅳ：175mg/kg·bw。受试物经口给予小鼠，连续灌胃30d。

1.3 实验方法

70只18～22g健康成年小鼠，选60只用D-半乳糖250mg/kg·bw腹腔注射造模，注射量为0.1m L/10g·bw，每日1次，连续造模6周，取血测MDA，按MDA水平随机分为1个模型对照组和4个受试样品剂量组、一个VC阳性对照组。4个剂量组经口给予不同浓度受试芦笋提取物，模型对照组和空白对照组给予同体积生理盐水。在给受试样品的同时，除空白对照组外，各组继续给予相同剂量D-半乳糖腹腔注射，空白对照组腹腔注射生理盐水，实验结束处死动物测其脂质过氧化物含量和抗氧化酶活力。

1.4 数据处理与统计方法

采用SPSS 13.0统计软件进行方差分析和多重比较，显著水平为p＜0.05。

2 结果与分析

2.1 芦笋提取物对小鼠全血、血浆、肝脏中MDA的影响

从表1可以看出，造模后的各剂量组、VC阳性对照组及模型对照组的血液中MDA水平大都显著高于空白对照组的MDA水平，表明在实验期间内，连续注射D-半乳糖，造成小鼠氧化损伤，造模成功。经口给予小鼠不同剂量的芦笋提取物和阳性对照药物后，各剂量组血浆中MDA水平均低于模型对照组，35、105mg/kg剂量组与模型对照组比较差异显著（p＜0.05）；各剂量组的肝脏组织中MDA水平均显著低于模型对照组的MDA水平（p＜0.05）。表明受试物芦笋醇提取具有降低血浆和肝脏中MDA水平的作用。

2.2 芦笋提取物对小鼠血浆、肝脏中GSH的影响

从表2可以看出，给予小鼠不同剂量的芦笋提取物和阳性对照药物后，各剂量组血浆中GSH水平均高于模型对照组，其中7、35mg/kg剂量组与模型对照组差异显著（p＜0.05），表明受试物芦笋醇提取具有升高血浆中GSH水平的作用。各剂量组的肝脏组织中GSH水平均显著（p＜0.05）高于模型对照组及空白组的GSH水平，表明芦笋提取物具有显著（p＜0.05）升高肝脏中GSH水平的作用。

2.3 芦笋提取物对小鼠血浆、肝脏中SOD的影响

从表3可以看出，给予小鼠不同剂量的芦笋提取物和阳性对照药物后，7、35、175mg/kg剂量组与模型对照组比较SOD水平显著升高（p＜0.05）。同时，各剂量组的肝脏中SOD水平均高于模型对照组的SOD水平，其中7、105mg/kg剂量组差异显著（p＜0.05），表明受试物芦笋提取物具有提高氧化损伤小鼠血浆和肝脏中SOD水平的作用。

2.4 芦笋提取物对小鼠血浆、肝脏中GSH-PX的影响

从表4可以看出，给予小鼠不同剂量的芦笋醇提取物和阳性对照药物后，各剂量组的血浆中GSH-PX活力水平均显著（p＜0.05）高于模型对照组的GSHPX活力水平（p＜0.05）；各剂量组的肝脏中GSH-PX水平均高于模型对照组的GSH-PX水平，其中105、175mg/kg剂量组与模型对照组相比显著提高（p＜0.05）。表明受试物芦笋提取物具有提高血浆和肝脏中GSH-PX水平的作用。

表1 芦笋提取物对小鼠全血、血浆和肝脏的影响（X±SE，n=10）Table 1 Effectof Asparagus extracts on the MDA contentofwhole blood，plasma and liver（X±SE，n=10）

表2 芦笋提取物对小鼠血浆和肝脏GSH的影响（X±SE，n=10）Table 2 Effectof Asparagus extracts on the GSH contentof plasma and liver（X±SE，n=10）

表3 芦笋提取物对小鼠血浆和肝脏SOD的影响（X±SE，n=10）Table 3 The effectof Asparagus extracts on the SOD content of plasma and liver（X±SE，n=10）

表4 芦笋提取物对小鼠血浆和肝脏GSH-PX的影响（X±SE，n=10）Table 4 The effectof Asparagus extracts on the GSH-PX contentof plasma and liver（X±SE，n=10）

表5 芦笋提取物对小鼠血浆和肝脏T-AOC的影响（X±SE，n=10）Table 5 The effectof Asparagus extracts on the T-AOC contentof plasma and liver（X±SE，n=10）

2.5 芦笋提取物对小鼠血浆、肝脏中T-AOC的影响

从表5可以看出，给予小鼠不同剂量的芦笋后，提取物与模型对照组相比：血浆中，各剂量组的TAOC水平均升高，其中35、105、175mg/kg剂量组差异显著（p＜0.05）。肝脏中，各剂量组的T-AOC水平均高于模型对照组的T-AOC水平，其中105、175mg/kg剂量组差异显著（p＜0.05）。表明受试物芦笋提取物具有提高血浆和肝脏中T-AOC水平的作用。

3 结论与讨论

MDA是细胞膜脂质过氧化物的终产物，且本身也可交联蛋白质、磷脂上的氨基，使细胞脆性增加、变形性降低，从而导致细胞膜损伤[13]。因此测定MDA含量能反映出机体内脂质过氧化的程度，间接反映出细胞损伤的程度。GSH-PX、SOD、T-AOC、GSH是体内重要的抗氧化酶，体内GSH-PX、SOD、T-AOC、GSH活力大小间接反映了机体清除自由基的能力。MDA的测定常与SOD、GSH-PX等抗氧化酶活力的测定相互配合，可以更好的反映机体抗氧化水平。

在本实验中，连续腹腔注射D-半乳糖的小鼠，其血浆和肝脏中MDA含量均显著升高，造成血浆和肝脏中的脂质过氧化。给予芦笋提取物后，血浆和肝脏中MDA含量不同程度的降低，105mg/kg剂量组肝脏中的MDA水平低于模型对照组。同时，各剂量组小鼠血浆和脏脏中GSH-PX、SOD、GSH、T-AOC水平均高于模型对照组。根据本实验结果判定芦笋提取物可以降低模型鼠的氧化损伤程度，起到抗氧化作用。不同的因素和途径对机体氧化损伤的部位和程度不同，机体抵抗氧化损伤的机制也不同，因此对体内不同部位、不同抗氧化酶活力大小的影响也不尽相同。本实验为后续芦笋功能食品——速溶芦笋粉的开发提供科学依据。

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Study on the antioxidation effect of Asparagus extracts

MA Chao-yang1，2，，M A Shu-feng1，2，*，WANG Fang2，DAIHui2，WANG Zhou-ping1，2，HUANG Yun-xiang3
（1.State Key Laboratory of Food Science and Technology，Jiangnan University，Wuxi214122，China；
2.School of Food Science and Technology，Jiangnan University，Wuxi214122，China；
3.Asparagus Engineering Research Centers of Hebei Province，HebeiNormal University，Qinhuangdao 066000，China）

Ob jec tive：To study the antioxidation functional effect of Asparagus extracts on oxidative stress model m ice.Methods：Experimentalaging m ice molded w ith D-gal，then the m ice were gavaged w ith d ifferent dosage of asparagus extracts and VCrespec tively everyday.30d later，the lip id peroxide level and the antioxidant enzymes vitality were conducted.Results：Asparagus extracts significantly increased GSH，SOD，GSH-PX and T-AOC activity levels（p＜0.05）in p lasma and liver，and significantly dec reased MDA content in p lasma and liver（p＜0.05）.Conc lusion：Asparagus extracts could im p rove the antioxidant capacity of oxidative stress modelm ice.

Asparagus extracts；antioxidant；oxidative stress model；m ice

TS255.1

A

1002-0306（2012）22-0365-04

2012－08－21 *通讯联系人

马朝阳（1970-），男，博士，讲师，主要从事食品功能因子的分离提取及其构效关系研究。

中央高校基本科研业务费专项资金资助项目（JUSRP111A35，JUSRP21115）； 科 技 部 农 业 成 果 转 化 资 金 项 目（2010GB2A200024）；秦皇岛市科学技术与发展计划项目（20121107001）；江苏高校优势学科建设工程资助项目。