高效液相色谱法测定保健食品中洛伐它汀的含量

黑龙江 王守萃

洛伐它汀是八十年代上市的新型调整血脂药，由于其独特的疗效，被誉为治疗心血管系统疾病的里程碑，深受广大患者的欢迎。洛伐他汀最适于治疗高胆固醇血症，尤其伴有LDL增高患者（型)，是首选的调脂药。混合型高脂血症也可用，也可用于肾病或糖尿病伴有高胆固醇血症患者。对显著增高的高甘油三酯血症和乳糜微粒血症效果较差。与胆汁酸螯合剂合用，可增强降胆固醇效应。本实验采用高效液相色谱法来测定保健食品中洛伐它汀的含量。

一、实验部分

（一）仪器、试剂及色谱条件

1.高效液相色谱，带可变波长紫外检测器；

色谱柱：C18柱，4.6mm×250mm，5μm，柱温：30℃。

检测器：紫外检测器，检测波长238nm。

流动相：甲醇（色谱纯）:水=80:20。

流速：1.0mL/min。

灵敏度：0.002 AUFS。

进样量：10μL。

2.电子天平（0.0001g）；

3.超声振荡器；

4.洛伐它汀标准储备液：精密称取0.0100 g洛伐它汀标准物质用甲醇溶解定容至10mL，此溶液每毫升含洛伐它汀1.0mg，该溶液在（0℃～4℃）条件下保存期为两个月。

洛伐它汀标准使用液：吸取洛伐它汀标准储备液5mL于50mL容量瓶，加甲醇至刻度，然后分别吸取此液0.00mL、0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL于10mL容量瓶中，各加甲醇至刻度，即得洛伐它汀0.00μg/mL、5.00μg/mL、10.00μg/mL、25.00μg/mL、50.00μg/mL的标准液系列。

（二）测定方法

1.标准曲线法

（1）标准曲线的绘制

分别进样含洛伐它汀 0μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、25μg/mL、50μg/mL的标准液各10μL，进行HPLC分析，然后以峰面积为纵坐标，以洛伐它汀的含量为横坐标，绘制标准曲线。（图1）。

图1 洛伐它汀标准曲线

（2）样品测定方法

取样品10 g，研磨，混匀，备用。

取上述样品1.000 g放入10mL的具塞比色管中，加入甲醇至10mL刻度线，超声提取5min，静置10min，过滤膜，待测。

吸取处理后的试样溶液10μL进行HPLC分析，测定其峰面积，从标准曲线查得测定液中洛伐它汀的含量。

（3）结果计算

样品中洛伐它汀含量（mg/kg）按式（1）计算：

式中：

X—样品中洛伐它汀的残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；

C—从标准曲线上查得测定液中洛伐它汀的含量，单位为毫克每升（mg/L）；

V—样品定容体积，单位为毫升（mL）；

m—试样质量，单位为克（g）。

二、实验结果和讨论

（一）方法线性考察

将标准系列进样，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，计算其相关系数r=0.9999。说明本方法具有良好的线性相关性。数据见表1。

表1 标准系列数据一览表

（二）方法精密度测量

浓度为11.6mg/l的洛伐它汀溶液平行测定6次，求出其标准偏差和变异系数，结果见表2，其标准偏差为6324.27，变异系数为2.22%。说明本方法有较好的测量精度。

表2 平行测定结果一览表

（三）方法回收率

从实验可知选用空白样品进行添加洛伐它汀回收率试验。不同添加水平回收率分别为86.34%-93.59%，表中回收率数值为三次平行测定结果的平均值，洛伐它汀在空白试样中的回收率如下表3。

其中回收率计算公式：

式中：B———方法回收率(%)；

C实测———通过实验测得的浓度；

C添加———添加的洛伐它汀的浓度。

表3 洛伐它汀在保健品中的回收率

三、结论

（一）以高效液相色谱法测定保健食品中洛伐它汀含量，准确度较高。

（二）本方法线性相关性r=0.9999，变异系数为2.22%，回收率达86%以上。