核周型抗中性粒细胞胞浆抗体在溃疡性结肠炎诊断中的意义

范如英，武子涛，盛剑秋

北京军区总医院消化内科，北京 100700

核周型抗中性粒细胞胞浆抗体在溃疡性结肠炎诊断中的意义

范如英，武子涛，盛剑秋

北京军区总医院消化内科，北京 100700

目的 了解血清中核周型抗中性粒细胞胞浆抗体(pANCA)对溃疡性结肠炎诊断的敏感性及特异性。方法 本文采用间接免疫荧光法对我院51例溃疡性结肠炎、15例克罗恩病、30例对照患者血清中核周型抗中性粒细胞胞浆抗体进行检测。结果 51例溃疡性结肠炎患者中32例核周型抗中性粒细胞胞浆抗体阳性，其敏感性及特异性分别为62.75%及95.56%。15例克罗恩病患者中有2例阳性核周型抗中性粒细胞胞浆抗体阳性，阳性率为13.33%，30例对照组未发现核周型抗中性粒细胞胞浆抗体阳性患者，组间差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论 血清中抗中性粒细胞胞浆抗体对溃疡性结肠炎具有一定的敏感性及高度的特异性，对其检测有利于溃疡性结肠炎的诊断及鉴别诊断。

核周型抗中性粒细胞胞浆抗体;溃疡性结肠炎;诊断

1 资料与方法

1.1 患者来源 2007年1月—2012年2月我院住院患者中溃疡性结肠炎患者51例，男23例，女28例，平均年龄(41.8±14.5)岁;克罗恩病患者15例，男10例，女5例，平均年龄(40.5±20.0)岁;对照组为排除肠道及自身免疫病的其他患者30例，男19例，女11例，平均年龄(59.8±15.2)岁。所有溃疡性结肠炎及克罗恩患者均符合2001年成都全国炎症性肠病学术研讨会制定的标准［1］。

1.2 试剂和方法

1.2.1 标本采集:空腹采集不抗凝血2～3 mL，以2 500 r/min离心15 min，分离血清。

1.2.2 核周型抗中性粒细胞胞浆抗体的检测:采用间接免疫荧光薄片法。试剂盒购自德国欧盟公司，严格按照说明书进行操作，取25 μL采用PBS缓冲液1∶10稀释的血清至加样板反应区，将生物薄片载片盖在加样板的凹槽中，室温孵育30 min。采用PBS缓冲液冲洗3次并在PBS液中浸泡5 min，加20 μL荧光标记的羊抗人IgG，室温孵育30 min后PBS冲洗3次。荧光显微镜下观察结果。结果判断:荧光细胞核周围呈线条状分布者为阳性。

1.3 统计学方法 采用SPSS 13.0软件包进行统计学处理。样本率的比较采用卡方检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

溃疡性结肠炎患者pANCA特异性为95.56%，阳性检出率即敏感性为62.75%，显著高于克罗恩病组及对照组，其差异有统计学意义(P＜0.005，见表1)

表1pANCA在UC、CD及对照组间的比较Tab 1 Comparison of pANCA in UC，CD and control groups

3 讨论

炎症性肠病是一种慢性非特异性炎症性疾病，它包括溃疡性结肠炎及克罗恩病，多发生在年轻人群中，其发病率有增高趋势，严重影响了人们的健康及生活质量。由于克罗恩病及溃疡性结肠炎有相似的临床表现，为临床诊治带来很大困难，临床鉴别主要靠临床、肠镜、病理实验室检查进行综合分析诊断，且需排除感染性肠炎、缺血性肠炎及功能性肠病肠预激综合征。目前认为其发病机制由多种因素相互作用所致，主要包括环境、免疫、遗传、感染因素。其中免疫因素备受关注，寻找有利于炎症性肠病诊断及鉴别诊断的血清标志物，是临床工作者不懈努力的方向。初步研究表明患者血清pANCA的检测有利于炎症性肠病的诊断及鉴别诊断。

ANCA是针对中性粒细胞及单核细胞颗粒蛋白的特异性抗体，是血管炎患者的自身抗体，是诊断血管炎的一种特异性指标。采用间接免疫荧光法可将ANCA分为胞浆型(cANCA)、核周型(pANCA)和不典型(xANCA)，其中cANCA自身抗原为蛋白酶3(PR3)，cANCA阳性主要见于韦格纳肉芽肿。pANCA阳性与溃疡性结肠炎有关，但其相关抗原目前尚不确定，可能存在多种抗原，包括过氧化物酶、乳铁蛋白、溶菌酶、β葡萄糖苷激酶、组织蛋白酶G、弹力蛋白酶。近年研究表明中性粒细胞嗜天青颗粒内的一种具有杀菌活性的蛋白质即杀菌/通透性增高蛋白质，有可能是UC患者pANCA相关抗原［2］。国内外报道pANCA在UC患者中的阳性率为40% ～85%，而在CD患者中阳性率低于5% ～10%［3-4］，在正常人群中其阳性率仅为0～5%。本研究结果表明pANCA在UC患者中的阳性率为62.75%，而在CD患者中阳性率为13.33%，在对照组人群中其阳性率为0，与上述结果相一致。进一步说明血清pANCA检测对于UC患者诊断特异性强，且具有一定敏感性，对其检测有利于UC患者的诊断及与CD的鉴别诊断。对于UC患者pANCA阳性率是否与疾病的严重程度有关，目前尚存在争议，有研究［3］认为pANCA的检测水平与UC严重程度有关，该文作者认为pANCA阳性的UC患者肠黏膜血管炎的发生率高于pANCA阴性的UC患者，并且伴有血管炎的UC患者肠黏膜病理组织学炎症程度也较严重，提示UC相关的ANCA可能参与了血管介导的血管炎的发生［5］。另一项研究［6］表明，pANCA 的表达与 UC 的严重程度无关，该争议需要大样本多中心的研究进一步阐明。总之，pANCA为UC特异性强的血清学标志物，对其检测有利于UC的诊断及鉴别诊断。

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The significance of perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibodies in diagnosis of ulcerative colitis

FAN Ruying，WU Zitiao，SHENG Jianqiu
Department of Gastroenterology，the Military General Hospital of Beijing PLA，Beijing 100700，China

ObjectiveTo study the sensibility and specificity of detection of perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibodies(pANCA)in diagnosis of ulcerative colitis(UC).MethodsSerum samples were obtained from 51 patients with ulcerative colitis(UC)，15 patiens with Crohn’s disease(CD)and 30 patients without intestinal disease as control.pANCA was detected by indirect immunofluorescence assay.ResultsThe sensibility and specificity of p-ANCA in UC patients were 67.75%and 95.56%respectively，but the positive of pANCA in CD patients was 13.33%(2/15).No patients was positive in control group(P ＜0.05).ConclusionSerum pANCA in patients with UC shows a moderately sensibility and a high specificity，it is useful for the diagnosis of UC and differentiation between UC and CD.

Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibodies;Ulcerative colitis;Diagnosis

R574.62

A

1006－5709(2012)08－0758－02

2012-03-08

10.3969/j.issn.1006-5709.2012.08.021

范如英，E-mail:fanry2@sohu.com