剖析2010年版中国药典中明胶空心胶囊中铬的测定

麦 妙， 符天晓

(海南省药品检验所三亚分所， 海南 三亚 572000)

剖析2010年版中国药典中明胶空心胶囊中铬的测定

麦 妙， 符天晓

(海南省药品检验所三亚分所， 海南 三亚 572000)

目的:选择适合2010年版药典中药用明胶空心胶囊中微量铬测定的常规分析方法。在没有任何基体改进剂的条件下，采用微波消解和石墨炉原子吸收法，测量时扣除背景方式测定空心胶囊中的微量铬，经过常规方法剖析，确定适合、快速、简便、准确的方法。方法:采用岛津AA-7000原子吸收分光光度计，配石墨炉原子化器GFA-7000和自动进样器ASC-7000，结合微波消解仪，采用空心阴极灯:铬，氮所压力为0.35Mpa，以铬标准液制梯度浓度制作标准曲线。结果:吸收值与浓度线性关系良好，铬的平均回收率为100.8%，RSD为2.9%。结论:该法简便快速，灵敏度高，重复性好。

石墨炉; 原子吸收分光光度法; 微波消解程序; 铬; 含量检测

“蓝矾皮”是经过重金属鞣制的皮革下脚料，六价铬离子含量较高。Cr6+是铬离子中毒性最大的一种，容易进入细胞，并还原为三价铬，产生中间体五价铬和活性自由基，造成对DNA的损伤，对呼吸道、消化道有刺激;对肝肾有明显的损伤，损伤程度与铬离子含量有关;有显著的致癌、致畸、生殖毒性。由于常规方法无法去除蓝矾皮中的六价铬离子，因此，我国医药包装协会标准对空心胶囊铬含量的限定，是限制空心胶囊使用此类劣质明胶的有效途径。三价铬是人体新陈代谢必需的，六价铬的毒性比三价铬大。但有研究表明，在急、慢性呼吸接触三价铬后，人体出现的咳嗽、哮喘等看起来与接触六价铬的症状很相似性，环境中低浓度的铬就会引起亚急性慢生中毒，为了防止铬的污染及其用鞣革制过的皮制取明胶且用于空心胶囊的生产，应严格检测控制铬盐的含量，新版中国药典2010年制定了明胶空心胶囊的铬含量，以降低我国空心胶囊的安全风险。

1 资料与方法

1.1 药典方法:取本品0.5g置聚四氟乙烯消解罐内，加硝酸5-10mL，混匀，浸泡过夜，盖上内盖，旋紧外套，置适宜的微波消解炉内，进行消解。消解完全后，取消解罐内罐置电热板上缓缓加热至红棕色蒸气挥尽并近干，用2%硝酸转移到50mL量瓶中，并用2%硝酸稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。同法制备试剂空白溶液;另取铬标准贮备液，用2%硝酸稀释制成每1mL含铬1.0ug的铬标准贮备液，临用时，分别精密量取铬标准贮备液适量，用2%硝酸稀释制成每1mL含铬0-80ng的对照品溶液。取供试品溶液与对照品溶液，以石墨炉为原子化器，在357.9nm的波长处测定［1］。

1.2 所用仪器为:岛津AA-7000原子吸收分光光度计，配石黑炉原子化器GFA-7000和自动进样器ASC-7000;微波消解仪为 WX-4000配6个高温聚四氟乙烯消解罐，上海屹尧仪器科技发展有限公司;所用水为超纯水，控温电热板EH20B型，美国LabTech公司;空心阴极灯:铬，北京曙光明电子光源仪器有限公司;载气:99.999%高纯氩气;标准物质:铬(唯一标识:11201)标准液，浓度为1mg/mL，来源于国家有色金属及电子材料分析测试中心。

1.3 仪器条件:铬空心阴极灯;测定波长357.9nm;狭缝为0.7nm;灯电流10mA;氘灯背景校正方式，氘灯灯电流10mA;峰高积分方式;增益电压280V;石黑炉工作条件;横向加热方式，氩气压力0.5Mpa;第一升温阶段150℃，升温设置时间时间为20s;第二升温阶段250℃，升温设置时间时间为 10s;第三升温阶段800℃，升温设置时间时间为 10s;第四升温阶段800℃，升温设置时间时间为 10s;第五升温阶段800℃，升温设置时间时间为 3s;第六升温阶段2300℃，升温设置时间时间为2s。第七升温阶段2500℃，升温设置时间时间为2s;

1.4 方法摸索:样品溶液和标准溶液配制:按照药典标准的限度规定为不得过百万分之二，样品按最大限度进行50倍的稀释，含铬约为20ng/mL，为让测定值在标准曲线范围上，铬标准液分别稀释浓度为5、10、20、30、40ng/mL，结果标准铬测定吸收值均为超过1.0，且吸收值不稳定，经过100倍、200倍级稀释验证，吸收值在200倍稀释时的吸收值较稳定，为让测定值能在标准曲线范围上，铬标准液也需适当调整，明胶空心胶囊消解过程也有很大的影响，消解过程按仪器说明书上的蛋白质类样品的消解条件进行消解，条件中温度和时间对消解是否完全起决定的作用，消解不完全，测定铬含量超标，经过多次消解处理，摸索了较适合的消解方法，选择以下消解方法［3］，见表1。

表1 微波消解程序

消解过程，应在低温保持时间设定多一些，以防温度聚升，压力过高，经过以上消解步骤后，样品彻底消解完毕，消解完全后置电热板(或相当的加热装置)上加热赶去硝酸至近干(约1-2mL)，用2%硝酸溶液清洗并定容至200mL容量瓶中，直接稀释至刻度，即为样品溶液，由于有少量沉淀，应静置后，取上消液测定，以防滤纸的吸附作用影响测定结果，最好不用滤纸过滤，当测定结果超出标准曲线时，适当多增加标准曲线点。

2 结果

2.1 供试品制备方法:取空心胶囊样品0.5g，精密称定，置聚四氟乙烯消解罐中，加入硝酸8mL，放入微波消解仪上述消解条件的程序，消解结束后用约3mL的2%的硝酸清洗消解罐体上部和盖内壁，合并于消解罐体内，置电热板上加热赶去硝酸至近干(约1-2mL)，再用2%硝酸转移至200mL容量瓶中，并用2%硝酸稀释到刻度，摇匀，静置，取上清液作为供试品溶液，同法制备试剂空白溶液2份。

2.2 工作曲线的绘制:取铬标准溶液(1000ug/mL)，用2%硝酸溶液稀释成1 ug/mL作为铬标准贮备液，临用时，分别精密量取铬标准贮备液适量，用2%硝酸溶液稀释制成每 1mL 含铬为2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0ng/mL的系列浓度标准稀释液，吸取20ul注入石黑炉原子化器，以吸光度(A)为纵坐标、浓度(C)为横向坐标绘制工作曲线。通过三次实验结果，二次回归方程如下①Abs=0.0095698Conc+0.0032977，r=0.9996②Abs=0.017211Conc+0.0032527，r=0.9998③Abs=0.014911Conc+0.010411，r=0.9997，结果表明吸收值与浓度线性关系良好。分别对上述浓度的标准溶液各测定3次的RSD值均小于3%［2，4］。

2.3 精密度与回收率测定 按2.1制备样品溶液，于该样品加入相当于浓度 2.0、4.0、6.0ng/mL 的铬标准溶液，在上述条件下测定平均回收率，并计算RSD，结果见表2。

表2 样品加标回收率(n=3)

由表2看出，测定方法回收率在100.0%-101.8%之间，RSD在2.7%-3.2%之间，说明方法具有较好的准确度和精密度。

3 讨论

3.1 溶液的吸收一般都符合Lamber-Beer定律，原子吸收石黑炉法测定要经过样品干燥、灰化、原子化等过程，一般情况下符合线性回归的相关系数较低。为了使测定结果更准确，现在的仪器软件都具有曲线拟合的功能，以减少误差，提高准确度，故本文采用一元二次方程进行曲线拟合。

3.2 采用石墨炉原子吸收法测定胶囊或明胶中铬的含量，准确可靠，为保证公众用药的安全有效打下了基础。

参与文献:

［1］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典［M］.(二部)北京:中国医药科技出版社，2010.1204-1205.

［2］ 张秀尧.炉内消化石墨炉原子吸收法测定明胶和水解蛋白中铬［J］.中华预防医学杂志，2005，39(5):

［3］ 黄辉，李本涛，邵鸿飞.微波消解-石墨炉原子吸收光谱法测定胶囊中的痕量铬［J］.化学分析计量，2011，20(3):30-32.

［4］ 黄为权，谈桂权.石墨炉原子吸收法直接测定人尿中痕量铬的研究［J］.中华医学实践杂志，2005，4(10):45-46.

Pharmacopoeia 2010 Edition of the Hollow Gelatin Capsules in the Determination of Chromium

MAI Miao，FU Tianxiao
(Sanya Branch of Hainan Institute for Drug Control，Hainan Sanya572000，China)

Objective:To choose the methods of the 2010 edition of Chinese Pharmacopoeia gelatin capsule with the determination of trace chromium conventional.In the absence of any base modifier under the conditions of microwave digestion and graphite furnace atomic absorption spectrometry，measuring less background mode determination of trace chromium hollow capsules through conventional methods of analysis to determine the proper，fast，easy and accurate method.Method:Uses the island Tianjin AA-7000 atom absorption spectrophotometer，matches graphite oven atomization GFA-7000 and automatic sample injector ASC-7000，and union microwave resolution meter，hollow cathode lamp was used the:The chromium，the nitrogen pressure is 0.35Mpa，by chromium standard fluid system gradient density manufacture standard curve.Result:The absorption value and the density linearity relations is good，the chromium average returns-ratio is 100.8%，RSD is 2.9%.Conclusion:This law is simple and fast，the sensitivity is high，the duplication is good.

Graphite furnace;Atomic absorption spectrophotometry; Microwave digestion procedure;Chromium;Content detection

B

10.3969/j.issn.1006-6233.2012.08.075

1006-6233(2012)08-1184-03