吉祥草根茎化学成分研究

王 倩 郭志勇 邹 坤

（三峡大学 化学与生命科学学院 天然产物研究与利用湖北省重点实验室，湖北 宜昌 443002）

吉祥草为百合科吉祥草属植物吉祥草Reineckia carnea（Andr）Kunth的全草，别名观音草、松寿兰、小叶万年青，是百合科植物中的单种属植物［1].吉祥草主要分布在华东、中南、西南各省区，是我国西南苗族地区常用的传统草药之一.全草入药，能润肺止咳、平喘、祛风、接骨、治肺结核咳嗽，也可用于补肾壮腰、咯血、慢性支气管炎、风湿性关节炎，外用可治跌打损伤［2].现代药理研究表明吉祥草具有良好的抗真菌［3]、溶血、止血、化痰、抗炎［4]、及抗肿瘤［5]等药理活性.为充分利用湖北长阳地区丰富的吉祥草资源，本文对其乙醇提取物进行系统分离，得到并鉴定了6个化合物，分别为nicotianoside B（1），胡萝卜苷（2），βecdysone（2β，3β，14α，20R，22R，25－hexahydroxy－5βcholest－7－en－6－one）（3），槲皮素（4），芦丁（5）.其中化合物3为首次从该属植物中分离获得.

1 仪器和试剂

多功能强制渗漉罐，温州鸿驰化工医药设备有限公司；高效液相色谱仪，Varian公司；中压制备色谱柱YMC（20mm×250mm，5μm），半制备色谱柱YMC（10mm×250mm，5μm），分析型色谱柱 YMC（4.6mm×250mm，5μm）；质谱用Finnigin电喷雾质谱仪测定；核磁共振用Bruker A－400核磁共振仪测定，TMS为内标，氘代试剂作溶剂；反相硅胶为进口YMC RP－C18；高效液相用甲醇、乙腈均为色谱纯，水为三蒸水.

实验用吉祥草采自湖北长阳，经三峡大学化学与生命学院陈发菊博士和王玉兵老师鉴定为吉祥草属植物吉祥草Reineckiacarnea（Andr）Kunth的根茎，标本保存于三峡大学化学与生命科学学院天然产物研究与开发湖北省重点实验室内，标本编号为KNPD220060628.

2 提取与分离

将吉祥草根茎烘干粉碎（4.0kg），以90%的乙醇用多功能强制渗漉罐加热回流提取3次，合并提取液，浓缩成浸膏，用水悬浮，分别以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶剂，得各部位浸膏分别为130g、112g、550g.取乙酸乙酯部位浸膏经硅胶柱色谱，以氯仿－甲醇（15∶1）洗脱，然后用丙酮重结晶，得到化合物1和2.取正丁醇部位浸膏经氯仿－甲醇硅胶柱层析得到50个流份（Fr 1－50），其中Fr 35－40合并经中压制备高效液相（乙腈／水（V／V）＝20∶80，检测波长203nm）得到化合物3，Fr12－15合并经半制备高效液相（甲醇／水（V／V）＝30∶70，检测波长350nm）得到化合物4－5.

3 结构鉴定

化合物1：无色针晶（甲醇），mp240～242℃，分子式 C39H64O12.ESI－MS m／z 747［M＋Na]＋.1HNMR（CD3OD，400MHz）：δ0.79（3H，s，H－18），δ 1.10（3H，s，H－19），0.98（3H，d，J＝6.9Hz，H－27），1.08（3H，d，J＝7.1Hz，H－21），3.78（1H，m，H－3）.13C－NMR（CD3OD，100MHz）：δ34.4（C－1），27.6（C－2），77.2（C－3），27.1（C－4），43.4（C－5），27.0（C－6），36.7（C－7），41.2（C－8），57.4（C－9），32.8（C－10），22.2（C－11），41.6（C－12），40.2（C－13），66.1（C－14），32.7（C－15），82.3（C－16），63.7（C－17），18.2（C－18），14.7（C－19），43.2（C－20），16.4（C－21），111.1（C－22），27.1（C－23），26.7（C－24），28.5（C－25），67.1（C－26），17.0（C－27），101.9（glc，C－1），78.6（glc，C－2），77.7（glc，C－3），71.8（glc，C－4），74.3（glc，C－5），68.9（glc，C－6），98.5（Rha，C－1），71.8（Rha，C－2），70.2（Rha，C－3），71.9（Rha，C－4），70.2（Rha，C－5），19.5（Rha，C－6）.通过与文献［6]数据比较，与化合物nicotianoside B的波谱数据一致，因而确定化合物1为nicotianoside B.

化合物2：无色针晶（甲醇），mp291～292℃.1H，13C－NMR（Py－d5，400MHz）数据与文献［7]报道的胡萝卜苷一致.将化合物与胡萝卜标准品作TLC对照，经不同溶剂系统展开，其Rf值一致，故鉴定该化合物为胡萝卜苷.

化合物3：白色粉末，mp238～240℃，分子式C27 H44O7.1H－NMR（CD3OD，400MHz）：δ0.89（3H，s，H－19），0.96（3H，s，H－18），1.19（3H，s，H－21）.13C－NMR（CD3OD，100MHz）：δ37.3（C－1），68.7（C－2），68.5（C－3），32.8（C－4），51.8（C－5），206.4（C－6），122.1（C－7），168.0（C－8），35.1（C－9），39.3（C－10），21.5（C－11），32.5（C－12），49.6（C－13），85.2（C－14），31.8（C－15），21.5（C－16），50.5（C－17），18.1（C－18），24.4（C－19），77.9（C－20），21.1（C－21），78.4（C－22），27.3（C－23），42.4（C－24），71.3（C－25），29.7（C－26），29.0（C－27）.以上数据与文献［8]报道基本一致，故鉴定为β－ecdysone（2β，3β，14α，20R，22R，25－hexahydroxy－5β－cholest－7－en－6－one），此化合物为首次从吉祥草中分离得到的蜕皮甾酮类化合物.

化合物4：黄色针状结晶（甲醇），mp314～316℃，分子式 C15H10O7.1H －NMR（MDSO－d6，400MHz）显示5个活泼酚羟基质子信号，分别为δ12.5（1H，s），10.11（1H，s），9.37（3H，s），其中δ12.5（1H，s）为黄酮类化合物5位酚羟基的特征信号.另较高场处显示出5个芳香质子信号，δ6.43（1H，d，J＝2.0 Hz）和δ6.21（1H，d，J＝2.0Hz）分别为黄酮A环8位和6位质子信号，δ7.70（1H，d，J＝2.2Hz），7.56（1H，dd，J＝8.5，2.2Hz），6.91（1H，d，J＝8.5Hz）呈明显的 ABX自旋偶合系统，为B环2′，6′和5′质子信号.其1H－NMR谱数据与文献［9]中槲皮素的数据基本一致，与槲皮素对照品共薄层，二者Rf值一致，故鉴定为化合物4为槲皮素.

化合物5：淡黄色粉末，mp187～190℃，分子式C27H30O16.1H（DMSO－d6，400MHz）：δ7.66（1H，s，H－2′），7.62（1H，d，J＝8.4Hz，H－6′），6.86（1H，d，J＝8.4Hz，H－5′），6.37（1H，s，H－8），6.19（1H，s， H－6）.13C－NMR （MDSO－d6，100 MHz）：δ156.3（C－2），133.2（C－3），177.2（C－4），161.1（C－5），100.6（C－6），156.5（C－7），100.6（C－8），156.5（C－9），103.8（C－10），121.5（C－1′），115.1（C－2′），148.3（C－3′），144.6（C－4′），116.1（C－5′），121.0（C－6′），103.8（glc，C－1），73.9（glc，C－2），76.3（glc，C－3），70.2（glc，C－4），75.8（glc，C－5），66.9（glc，C－6），98.5（Rha，C－1），69.8（Rha，C－2），70.4（Rha，C－3），71.7（Rha，C－4），68.1（Rha，C－5），17.6（Rha，C－6）.以上数据与文献［10]报道的芦丁一致.将化合物与芦丁标准品作TLC对照，经不同溶剂系统展开，其Rf值一致，故鉴定该化合物为芦丁.

［1]徐 鑫，付宏征.吉祥草的化学成分研究［J].中国中药杂志，2008，20（33）：2347－2350.

［2]邱德文，杜 江.中华本草·苗药卷［M].贵阳：贵州科技出版社，2005：145－157.

［3]陈昌祥，周 俊.蜘蛛抱蛋根茎中的甾体皂苷［J].云南植物研究，1994.16（4）：397－400.

［4]张 元，杜 江，许建阳，等.吉祥草总皂苷溶血、止咳、化痰、抗炎作用的研究［J].武警医学，2006，17（4）：282－284.

［5]王丽娟，王 岩，陈声武，等.薯预皂苷元体内外的肿瘤作用［J].中国中药杂志，2002，27（10）：777－779.

［6]Shvets S A，Kintya P K，Gutsu O N.Steroid Glycosides of Nicotiana Tabacum Seeds I.The Structures of Nicotianosides A，B，and E ［J].Chem.Nat.Comp.1994，30（6）：684－688.

［7]Peng Xian，Tan Li，Yao Bing，et al.Studies on the Chemical Constituents from the Rhizoma of A Lism a Gram Ineum ［J].J Chin Pharma Sci，1999（3）：173－175.

［8]姚春所，许云龙.拨毒散中的蜕皮激素［J].云南植物研究，2000，22（4）：503－506.

［9]王艺纯，张春玲，等.观音草的化学成分研究［J].中国药物化学杂志，2010，20（2）：119－124.

［10]张培成，徐绥绪.山楂叶化学成分研究［J].药学学报，2001，36（10）：754－757.