1039例隐源性肝炎患者AMA-M2抗体的筛查

张 玮 王 磊 王 奕 王俐琼 杜慧慧 李青梅

原发性胆汁性肝硬化（Primary biliary cirrhosis，PBC）是一种慢性进展性自身免疫性肝病，多见于女性[1]。国外文献报道该病患病率呈逐年增加趋势[2]。PBC 起病隐匿，症状不典型，发现时患者往往处于疾病的晚期[3]，给治疗带来难度。因此，我们在1039 例隐源性肝炎患者进行了M2抗体检测，以早期诊治。

资料与方法

一、临床资料 2009年～2010年在我院就诊的肝功能异常的1039 例隐源性肝炎患者，男485例，女 554 例，平均年龄 55.0±12.1岁。PBC 的诊断根据2000年美国肝病学会（AASLD）指导建议进行[4]，即：（1）碱性磷酸酶（ALP）等反映胆汁淤积的生化指标升高；（2）B 超或胆管造影检查示胆管正常；（3）血清抗线粒体抗体（AMA）或AMA-M2亚型阳性；（4）如果血清 AMA/AMA-M2阴性，则肝脏病理学检查符合PBC 的改变。经血清学和超声检查等排除非PBC 病变。

二、血清M2抗体测定 采用ELISA 法（上海富莼科芯生物技术股份有限公司），M2抗体＜25 为阴性。

结果

一、M2抗体检测结果 在1039 例患者中，81例（7.9%）M2 抗体阳性（表1）。在 1039 例隐源性肝炎患者中，女性M2抗体阳性患者57 例（10.29%，57/554），男性 24 例（4.95%，24/485，P＜0.01）。根据AASLD 关于PBC 指导建议，本组男性患者诊断22例，女性56 例，被排除的3 例患者均为滴定度在25～50，提示M2抗体滴度的高低和BPC 的诊断有一定的相关性，但还有待进一步证实。在PBC 患者中，男性22 例,年龄22～86岁，平均年龄52.0±17.3岁；女性56 例，年龄22～79岁, 平均年龄53.4±13.8岁。

二、两组患者免疫功能指标的比较 见表2。

表2 两组患者免疫功能指标（±s）的比较

表2 两组患者免疫功能指标（±s）的比较

免疫指标 M2 抗体阴性（n=958）M2 抗体阳性（n=81）t 值 P 值CD3+（%）47.413±13.32576.073±10.10210.1100.000 CD4+（%）50.757±7.654 47.4221±12.563-1.172 0.245 CD8+（%）27.957±9.744 30.635±12.443 0.909 0.367 CD4+/CD8+ 2.528±2.937 1.792±0.812-1.180 0.250 IgG（g/L）17.126±8.339 16.126±6.161 0.539 0.592 IgM（g/L）1.723±1.227 2.505±1.249 2.185 0.034 IgA（g/L）3026±1.367 3.609±1.571 1.366 0.179

三、PBC 患者相关抗体检测情况 所有患者均检测了抗核抗体、抗Nucleosomes（核小体）抗体、抗组蛋白（Histones）抗体、抗 Sm 抗体、抗 U1-snRNP抗体、抗 SS-A/Ro 60kD 抗体、抗 SS-A/Ro 52kD 抗体、抗SS-B/La 抗体、抗着丝点（ACA）抗体、抗Scl-70 抗体、抗 Jo-1 抗体，见表3。

表3 PBC患者相关抗体合并情况

四、临床表现 本组以乏力（74.4%，58/78）、黄疸（38.5%，30/78）、皮肤瘙痒（37.2%，29/78）为主；14例（17.3%）患者自觉无明显症状；47.4%（37/78）病人肝脏肿大，但无触痛；24.4%（19/78）病人脾脏肿大；约14.1%（11/78）病人同时出现皮肤黄色瘤和黄斑瘤；23.1%（18/78）病人发生色素过度沉着。

五、PBC 患者肝穿刺病理学检查情况 12 例PBC 患者行肝穿刺活检，结果Ⅰ期2 例，Ⅱ期7例，Ⅲ期2 例，Ⅳ期1 例。

讨论

PBC 是以肝内细小胆管非化脓性进行性破坏，伴门脉炎症性改变为主要特征，并有长期持续性肝内胆汁淤积，最终导致纤维化和肝硬化的慢性进展性自身免疫性疾病[5]。本病多见于中年妇女[4]。其发病机制尚未明确，目前大多集中于遗传易感性、环境因素及自身免疫功能紊乱等方面[6，7]。患者起初肝功能正常，无症状，但检测抗AMA 或AMA-M2呈阳性, 80%患者在5年内出现肝功能异常[8]。随病情发展陆续出现瘙痒、疲劳、黄疸、乏力、腹痛，因维生素吸收障碍出现皮肤粗糙和夜盲症，最后出现蜘蛛痣、肝掌，肝脾肿大等肝硬化表现，晚期出现门静脉高压。同时患者常伴有干燥综合征、类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎、甲状腺疾病、肾小管酸中毒及硬皮病等其他自身免疫性疾病。在PBC 早期，由于肝内胆管阻塞即可有血清ALP、γ-GT 水平明显升高,而ALT 和AST 水平仅轻至中度升高, 并常伴有血脂异常（以TC 升高为主）。早期血清胆红素水平可正常，而晚期随疾病进展而上升，高胆固醇血症较常见,凝血酶原时间延长[9]。

PBC 患者外周血和肝脏内均能检测到针对PDC-E2 的自身反应性CD4+和CD8+T 细胞，肝脏中这些细胞的浸润是本病的主要特征[10]，肝内可见大量辅助性（CD4+）TCRαβ 细胞[11]。Ambrosini YM研究认为[12]，CD45RO（high）CD57（+）CD8（high）T细胞是一个末端分化的细胞毒T 细胞（效应记忆T 细胞）的子代，在胆道上皮细胞进行性破坏中发挥重要的作用。我们研究显示，M2抗体阳性患者伴有CD3+细胞的改变。在体液免疫中，M2抗体阳性患者IgM 升高，提示体液免疫参与了本病的发病过程[13]。

M2抗体的靶抗原为线粒体内膜上的2-氧酸脱氢酶复合体（2-OADC）家族成员，尤其是丙酮酸脱氢酶复合物E2 亚单位（pyruvate dehydrogenase complex，PDC-E2）[14]。尽管所有有核细胞都含有线粒体自身抗原，但AMA 仅对肝胆管线粒体自身抗原进行免疫攻击，影响肝脏胆汁代谢[15]。此外，对没有肝脏疾病表现的AMA 阳性患者的随访观察显示可在PBC 开始出现之前的几年检测到自身抗体的存在[16]，其具体免疫机制目前尚不清楚。

PBC 患者除了M2 抗体阳性外，还检测出抗核抗体（其中颗粒型出现频率最高，其次为线粒体型和着丝点型）、抗 SS-A/Ro 抗体和少量的抗U1-snRNP 抗体阳性。大约有1/3 的PBC 患者可以检测到ANA，甚至在AMA 阴性患者中更常见,阳性率仅次于AMA[14]。这与我们本次的研究基本相符。但关于抗核抗体阳性的意义还有待进一步探讨[18，19]。

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