胚胎移植在德国美利奴青年羊应用的初步研究

阿依努尔·亚森，董 红，陈静波，海力切木，霍 飞，郑新宝

（新疆畜牧科学院畜牧研究所，新疆 乌鲁木齐 830000）

胚胎移植在德国美利奴青年羊应用的初步研究

阿依努尔·亚森，董 红，陈静波*，海力切木，霍 飞，郑新宝

（新疆畜牧科学院畜牧研究所，新疆 乌鲁木齐 830000）

为探索青年供体母羊提前扩繁的利用效率，本研究选择12只周岁龄德国美利奴母羊作为供体羊，分两组注射不同剂量FSH进行超排，两组分别平均获可用胚枚1.16枚和4.3枚，组间差异明显（P＜0.01），总受胎率59.4%。该结果表明周岁龄德国美利奴羊对超排敏感，可用于胚胎生产，建议实际生产中应适当提高FSH注射剂量。

德系美利奴青年羊；胚胎移植；

家畜超数排卵胚胎移植技术的广泛应用使优质纯种家畜的快速扩繁得以实现，给畜牧业带来巨大效益。绵羊相对与牛繁殖年限要短的多，因此若能在性成熟初期即对其实施超数排卵胚胎移植将极大的提高优质母羊遗传资源的利用效率。德国美利奴是肉毛兼用的优质绵羊品种，为满足市场供应，本研究选取周岁德国美利奴羊母羊，用不同剂量的FSH处理，进行胚胎移植，取得的较为理想的效果，现将结果报道如下，以期为生产实践提供参考。

1 材料和方法

1.1 试验动物

1.1.1 试验动物

从巴州种畜场45只周岁龄德国美利奴母羊中选择12只发情正常的作为供体，平均体重34.75 kg,健康无疾病。配种公羊为德国美利奴成年公羊2只。受体羊为本地巴音布鲁克土种成年母羊，经检疫均为健康。供、受体饲养方式相同，均全年半放牧半舍饲的方式。

1.1.2 试验器材与药品

孕酮阴道海绵栓；加拿大垂体促卵泡素(FSH)；促黄体素(宁波三生药业有限公司)；氯前列烯醇(宁波三生药业有限公司)；PMSG（宁波三生药业有限公司）；静松灵；利多卡因；黄体酮（宁波三生药业有限公司）；冲卵液：自制。

1.2 试验方法

1.2.1 同期发情及超排处理

在试验羊发情周期的任意一天埋植阴道栓，9 d后撤栓，同时肌注250 IU的PMSG，12 h后公羊试情。12只供体羊分成两组减量注射FSH，注射总剂量分别为14mL和16mL。第三天注射FSH时如发情注射LH（1mL）促排。

1.2.2 供体羊发情鉴定及配种

所有供体羊均于撤栓后12 h开始用性欲旺盛的试情公羊进行早晚试情，每次试情时间不少于60 min，连续试情3 d。母羊开始发情时，兴奋不安，试情羊跟随、接受公羊爬跨，供体羊发情后注射LH同时立即用种公羊本交或结合进行人工输精，每10～12 h时输一次，输3～4次。

1.2.3 冲卵及移植

以发情开始的第一天记为0 d，所有供体均于发情后第6 d用手术法经子宫角回收胚胎。为防止手术时腹压过大而造成操作困难和生殖器官的损伤,于手术前24 h将供、受体单独圈养，绝食。手术法冲胚。所回收的冲卵液要立即送入室温在21℃～26℃的无菌室，镜检、计数及装管，手术法移植。

1.2.4 妊娠检查

检查移植后20 d是否返情，40 d结合B超确定怀孕情况。

1.2.5 统计分析

应用SPSS13.0软件，T检验的方法分析。

2 结 果

本试验共回收胚胎41枚（包括透明带），可用胚胎33枚，其中14mL组获胚为9枚，可用数7枚；16 mL组获胚35枚，可用胚胎数为26枚，差异极显著（P＜0.01），总体移植受胎率59.4%，胚胎移植所产羔羊初生重4.07 kg（见表1）。

表1 FSH剂量对超数排卵效果的影响

以上数据表明：周岁龄德国美奴母羊对超数排处理敏感，所产胚胎移植后妊娠率和成年羊相比无差异，可用于胚胎生产。但在选择FSH用量时应适当提高注射剂量。

3 讨 论

3.1 年龄对超排的影响

供体的年龄是影响超数排卵效果的一个重要方面。不同年龄的动物对同种同剂量的激素反应不同。动物对超排的敏感性随年龄的增长而提高，但高龄动物超排效果较差[1]。丁红等[2]研究显示，对2.5～4.5岁供体母羊冲卵时，可用胚数随年龄增长呈上升趋势，而5.5岁供体羊的获卵数、可用胚数均低于2.5、3.5、4.5岁年龄组的结果。洪琼花等[3]用3/4剂量的FSH相同的超排方案对育成羊进行超排，结果显示，经产羊平均回收胚胎数明显高于育成羊(P＜0.01)，可用胚胎数育成羊和经产羊间差异不显著(P＞0.05)，但育成羊的可用胚率高于经产羊，分别为86.01%和81.15%。林峰[4]研究表明经产母羊排出的卵子质量要好于育成母羊，但两者的同期发情率、平均获胚数及采卵平均数差异不显著。赵霞等[5]认为性成熟不久的供体羊，初次诱发排卵时适当降低FSH剂量可与成年经产母羊一样有较好的超排效果。本研究结果显示，周岁龄德国美利奴羊对超排敏感，16mL组平均生产胚胎5.8枚，其中可用胚4.3枚，妊娠率59.4%，均正常产羔，该结果较成年羊超排效果略差，表明周岁龄绵羊对FSH有一定敏感性，尽管其超排效果略差于成年绵羊，但其生胚胎质量与成年羊相比无差异。提示12月龄德国美利奴绵羊可用于超排，建议在实际生产中提高FSH注射剂量。

3.2 影响青年羊发情因素

绵羊初次发情的时间受遗传、环境、出生时间及营养状况的影响。美利奴绵羊通常情况下18～20个月龄第一次有发情表现，体重达到30～50 kg，占成年羊体重50%～70%[6]。春季出生的绵羊一般发情年龄要早于秋季出生的绵羊。营养状况影响通过改变体内LH的分泌而影响发情。本次实验中对45只平均体重在34.75 kg 12月龄德国美利奴埋植海绵栓诱导发情，结果其中12只表现出了明显发情行为，发情率远远低于同批次处理成年母羊。造成发情率低的可能原因是所选择的大部分羊生殖器官尚未发育完全，身体条件不具备接受药物诱导发情的条件，且实验进行时间在12月下旬，气温低，舍饲条件一般不利于绵羊发情。

此外，使用的配种公羊的膘情、体况及性欲等在胚胎移植中对结果也有很大影响。因此在超排前一段时间要对公羊进行加强运动和补饲。本次试验中公羊没有提前补饲和运动，在配种过程中因公羊性欲不好注射睾酮，但总体来说公羊性欲，精子活力和精子密度仍然不好，影响到了卵子的受精。

[1] 李建栋，柏学进，吴铁荣，等.浅析影响奶牛超排效果四项因素的研究[J].养殖技术顾问,1997，(03):7～9.

[2] 丁红，玛依拉，杨冬梅，等.促卵泡素和年龄对绵羊超数排卵效果的影响[J].中国畜牧杂志,1998，(03): 18～20.

[3] 洪琼花，邵庆勇，马兴跃，等.山羊超数排卵与胚胎移植技术的研究与应用[J]．生物技术通报,2004，（4）：39～43.

[4] 林峰.济宁青山羊超数排卵效果研究[J].辽宁畜牧兽医,2004,(10)：9～10.

[5] 赵霞.绵羊与波尔山羊胚胎移植技术及其影响的研究[D].内蒙古农业大学,2001硕士论文.

[6] E.S.E.Hafez,Reproduction in farm animals,blackwell seventh edition，2008.

Prelim inary Study on Superovulation in Prim iparous Germany M erino Sheep

AYINUER,CHEN jing-bo*,DONG Hong,HAILIQIEMU,HUO Fei,ZHEN Xin-bao
（Xinjiang Academy of Animal Scinece,Urumqi830000，China）

In this study,12 yearling German Merino ewes were selected as embryo donors,randomly divided into two groups and treated with two different doses of FSH (14ml and 16ml respectively)for superovulation. The transferable embryos collected from the two groups were 9 and 26,respectively,and the difference was significant(P＜0.05).The overall conception rate was 59.4%.The results show that primiparous German Merino sheep are responsive to superovulation with FSH,and can be used for embryo donors;When primiparous sheep are used as embryo donors,it is recommended tomoderately increase the dose of FSH.

primiparous germanymerino sheep;superovulation and embryo transplantation

S814.8

A

1003-6377（2012）04-0034-03

2012-08-18

项目资助：“十二五”农村领域国家科技计划项目“西北地区优质肉牛肉羊快繁技术研究与应用”（2011BAD19B02-2）

阿依努尔·亚森（1984-），女，维吾尔族，实习研究员，从事动物繁殖与胚胎移植技术研究及推广工作。

陈静波（1956-），男，研究员，博士生导师，研究方向：动物遗传育种与繁殖。