药品微生物限度检查与药品质量研究

王定贵

1 检验环境产生的影响

微生物限度检查必须在一个单独的洁净度非常高的实验室内才能进行，并且实验室还必须配置单独的空气净化系统。其洁净度应大于等于10 000级，要求局部洁净度达到100级，下水道不能安装在操作间内。每次操作之前以及操作结束都必须用苯扎溴铵溶液(浓度为0.1%)或别的消毒液操作台以及会受到污染的死角进行擦拭，再开启层流净化装置。此外，在缓冲间必须配备洗手盆、无菌衣、口罩、帽以及鞋套等保护用品。同时在操作台上配备药物天平、火柴、乙醇灯以及橡皮乳头等。确保洁净实验室温度维持在18℃～26℃之间，室内的相对湿度应保持在40% ～60%之间。必须注意的是，检验所使用的阳性菌操作必须在单独的阳性菌实验室内，严禁与供试品检验共同使用一个洁净实验室［1］。

2 检验人员自身的影响

2.1 缺乏无菌方面的知识。大部分的药品检验员觉得，药典所要求的微生物限度标准通常较为宽松，所规定的菌落计数也不是很严格，从而影响了对检品的染菌控制。

2.2 操作水平较差，操作不够规范。很多药品检验员对检验程序、实验条件等并未进行严格控制，同时也未严格遵守药典的操作规范实施检验，造成检品检验结果出现错误。

3 检品自身的影响

3.1 检品自身的特性。检品自身所具有的特性也会对微生物限度检查的结果产生较大影响，主要包括两点:①生态、自然环境具有的不确定性:药品很容易受到外部微生物的污染，这种类型的污染具有多样性、其污染程度也难以确定。②活体具有易变性的特点:药典中的检验对象是活的微生物，这正是检品的独特之处。

3.2 检品中的抑菌成分所产生的影响。很多中西都含有抑菌成分，尽管部分检品所含的并非已知的抑菌成分，然而在菌落计数的时候发现这种成分对菌落有抑菌的功效，从而影响到对检品的结果判断。

3.3 检品对培养温度所产生的影响。之前的检验数据发现，针对部分含菌量非常高的检品，将其置于30℃的温度进行培养，菌落在七十二小时之内生长比较慢，因此需要在药典规定的时间之内增加培养的时间。

4 培养基产生的影响

4.1 培养基的储存条件以及培养基自身的质量，对于检验结果的准确性有直接影响。目前大部分的培养基采取的都是脱水培养基，因此，必须严格按照说明书中规定的条件进行储存，避免培养基吸潮结块从而产生污染。

4.2 培养基的灭菌处理。根据规定要求培养基应只允许实施一次蒸汽灭菌处理，已经经过高压灭菌处理的培养基必须尽可能缩减重复加热的时间，防止出现过度加热，从而破坏了培养基的营养成份。

4.3 培养基的合理使用。将融化之后的培养基置于45℃ ～47℃的恒温水浴锅或者培养箱中进行保温，直到开始使用。严格控制已配好的培养基经过灭菌处理之后的放置时间，其时间不宜过长，防止器水分散失以及出现染菌［2］。

5 菌种以及菌落计数

微生物限度检验过程中一种非常重要的生物资源就是菌种，并在使用中定期实施传代，使用的标准菌种的传代不能超出五代［3］。必须有专人负责，使用专用冰箱进行保存。如果菌落生长密集的话，计数容易出现误差。因此，检验人员必须在菌落计数的时候认真观察，仔细鉴别检品的不溶辅料以及培养基所产生的气泡等等，并利用适当的工具消除干扰，增加培养时间以便细心观察。如果菌落成片生长或者重叠的话会对计数产生影响。按照药典的规定，菌落如果出现蔓延生长成片，此时就不能计数。

为确保药品微生物限度的检验结果能够准确，尽量减少实验误差，必须做到如下几点:操作环境必须满足药典要求;检验人员必须具备很强的责任心，严格遵守药品检验技术规范中的要求进行操作;严格遵守灭菌程序，避免出现二次污染;对检验结果准确做出判断。

［1］马绪荣，苏德模.药品微生物学检验手册.北京:科学出版社，2000:38.

［2］王睿，柴栋.细菌耐药机制与临床治疗对策.国外医药:抗生素分册，2003，24(3):97.

［3］杨静.药品微生物限度检查法的影响因素分析.中国药事，2008，22(12):1095-1096.