蒲黄消炎颗粒急性毒性试验

张涓

(陕西中医学院药理学教研室，陕西 咸阳 712046)

蒲黄消炎颗粒急性毒性试验

张涓

(陕西中医学院药理学教研室，陕西 咸阳 712046)

目的:评价蒲黄消炎颗粒的急性毒性，为畜用临床剂量的设计提供依据。方法:蒲黄消炎颗粒按原生药4 g/mL的浓度及40 mL/kg的给药容量，24 h内给昆明种小鼠灌胃1次，连续观察14 d内小鼠的体重，毒性反应及死亡情况。结果:给药组和对照组小鼠在第1、7、14天的体重并无差异;小鼠无死亡，也无明显中毒反应，测得蒲黄消炎颗粒最大耐受量(MTD)为原生药160 g/kg(成人临床拟用量的333倍)。结论:蒲黄消炎颗粒在临床常用剂量下是安全的。

蒲黄消炎颗粒;急性毒性;最大耐受量

蒲黄消炎颗粒是由蒲公英、黄芩、苦地丁等组成，具有清热解毒，抗炎消肿的功效［1－2］，主要用于呼吸道病毒性感染，消化道感染等。为了确保其临床用药的安全性，为其临床剂量的设计提供依据，我们对蒲黄消炎颗粒进行了小鼠急性毒性实验研究。

1 材料与方法

1.1 动物

昆明种小白鼠，雌雄各半，SPF级，体重(20±2)g，由西安交通大学医学院实验动物中心提供，动物生产许可证号SCXK(陕)2007－001。饲养条件:陕西中医学院中药药理实验室(国家中医药管理局中医药科研三级实验室)，动物使用许可证号SYXK((陕)2007－006，室温20～25℃，相对湿度45%～70%，饲料为小鼠全价营养饲料。

1.2 药物

蒲黄颗粒流浸膏，每1 mL含原药材5 g，由陕西中医学院药物研究所提供，批号:20120308。临床成人拟用量:0.48 g生药/kg·d(人的体重以60 kg计)。

1.3 预实验

昆明种小鼠10只，雌雄各半，按称重随机分为5组，给药前禁食不禁水12 h后，第1组以最大给药浓度(原生药5 g/mL)和最大给药体积(40 mL/kg)灌胃蒲黄消炎颗粒流浸膏原液，单次给药剂量约为原生药201 g/kg(相当于人临床拟用量的419倍)，观察，结果发现，小鼠在第1次灌胃给药后30 min内出现自主活动减少现象，但无竖毛、抽搐、惊厥、翻倒等异常现象，且在灌胃后1～4 h后活动恢复正常，有1只小鼠出现黑便，较稀。间隔8 h，第2次流浸膏原液40 mL/kg灌胃2 h后，1只出现死亡，经过解剖检查发现:动物胃内充满大量浓稠流浸膏，故推测其死亡原因为药物粘稠度较大，使胃部消化运动受阻而引起的死亡。第2组第1次流浸膏原液40 mL/kg灌胃给药后，结果同上。间隔8 h，第2次流浸膏原液20 mL/kg灌胃24 h后，1只出现死亡，解剖检查可见肝脏颜色变深、表面粗糙等，主要为肝脏的毒性。第3组流浸膏原液组(原生药5.03 g/mL)、第4组流浸膏原液稀释组(原生药4 g/mL)、第5组流浸膏原液稀释组(原生药3 g/mL)，24 h内均按40 mL/kg灌胃给药1次;连续观察14 d，均未见明显毒性反应和死亡现象。

根据预实验，小鼠灌胃后有毒性表现和死亡，受浓度和小鼠给药体积的限制，蒲黄消炎颗粒流浸膏难以测出LD50。故采用测定小鼠的最大耐受量(MTD)来测定药物的急性毒性作用。根据下列公式计算小鼠的最大耐受量倍数，小鼠最大耐受量倍数=(每只小鼠耐受药量/小鼠平均体重)×(成人平均体重/成人每日使用剂量)，以人口服耐受量100倍以上为安全［3］。

另取昆明种小鼠10只，按称重随机分为2组，24 h内，第1组以流浸膏原液40 mL/kg灌胃给药1次;第2组流浸膏原液稀释组(原生药4 g/mL)，40 mL/kg灌胃给药1次，连续观察7 d。第3天第1组有1只小鼠出现死亡，解剖检查未发现心、肝、脾、肺、肾有明显特殊改变。

1.4 MTD实验［4－5］

取禁食12 h的昆明种小鼠40只，雌雄各半，随机分为空白对照组和流浸膏原液稀释组(原生药4 g/mL)。药物组按照40 mL/kg最大给药量灌胃给药1次，给药剂量约为原生药160 g/kg。对照组给予等体积的纯净水。给药后自由饮食，每天详细观察记录小鼠行为活动、状态、饮食、大小便及毛色、分泌物、体重等指标(详见观察指标)，连续14 d。观察期满后，称重，脱臼处死动物，进行大体尸解观察。

1.5 统计学分析

2 结果

给药后，蒲黄消炎颗粒组动物给药后个别出现静卧少动，4 h后恢复正常。第1天饮食减少，大便略稀，第3天自行消失。在其他观察时间，蒲黄消炎颗粒组外观体征未见异常，活动自如，进食、饮水、粪便均正常，皮毛光洁，口、鼻、眼无分泌物，外阴清洁。连续观察两周，第1、7、14天体重见表1，给药组体重在观察期内与对照组无明显差异，未出现其他急性毒性反应症状和死亡。尸检胸腔、腹腔未见异常液体，肠管未见胀气，心、肝、脾、肺、肾等重要脏器未见颜色、形态异常，胃粘膜颜色红润，无出血点或溃疡，尸检无异常。

表1 蒲黄消炎颗粒小鼠体重变化(±s，n=20)

表1 蒲黄消炎颗粒小鼠体重变化(±s，n=20)

19.20±1.2725.10±2.0527.28±2.31给药组对照组18.90±1.5624.30±1.5226.80±2.05

3 讨论

蒲黄消炎颗粒流浸膏以原生药4 g/mL浓度和40 mL/kg灌胃给药1次，小鼠未观察到死亡和明显的中毒情况，此时，小鼠灌胃的最大耐受量约为原生药160 g/kg，相当于临床成人拟用剂量333倍(每日剂量为原生药0.48 g/kg，人的体重以60 kg计)，可认为在常用剂量范围内是安全的。由表1可以看出，给药组小鼠体质量的增加比对照组略少，可能是灌胃操作刺激或药物本身对小鼠食欲造成一定影响。由于急性毒性实验是在1 d内给药1次或数次，且观察时间也比较短，虽然蒲黄消炎颗粒急性毒性实验结果表明其具有较高的安全性，但其安全性评价还应结合长期毒性实验做进一步验证，以全面保证临床用药的安全性。

［1］国家药品监督管理局.中药、天然药物急性毒性研究技术指导原则［S］.2005

［2］徐淑云，卞如濂，陈修.药理实验方法学［M］.第3版，北京:人民卫生出版社，2002

［3］李晓宇，孙蓉.薄荷不同组分对小鼠急性毒性实验比较研究［J］.中国药物警戒，2012，9(2):65－68

［4］贾鹰珏，李国辉，张平.黄连及黄连解毒汤对小鼠的急性毒性实验研究［J］.中国药学杂志，2011，46(18):1399－1404

［5］孙涛，彭成.川贝母止嗽颗粒的急性毒性测试［J］.成都中医药大学学报，2011，34(3):60－61

Study of acute toxicity of puhuang antiphlogosis granule

ZHANG Juan
(Department of Pharmacology，Shanxi College of Traditional Chinese Medicine，Xianyang 712046，Shanxi，China)

Objective:To evaluate the acute toxicity of Puhuang antiphlogosis granule，for veterinary clinical doses of designed.MethodsMice were administered with fluid extract of Puhuang antiphlogosis granule for once per day，consecutively observing the body weight，toxic reaction and death of mice during 14 days.ResultsThere was no significant difference between the body weight of mice in the group of fluid extract and control(P＞0.05);the maximum tolerated dose(MTD)of Puhuang antiphlogosis granule on mice is 160.0 g/kg(333 times of clinical adult daily dose).Conclusion:Puhuang antiphlogosis granule is safe in the usual clinical dose.

Puhuang antiphlogosis granule;Acute toxicity;Maximum tolerated dose(MTD)

1005-3697(2012)06-0545-02

R965.3

A

10.3969/j.issn.1005-3697.2012.06.006

陕西省教育厅项目(08JK267)

2012-09-16

张涓(1977－)，女，陕西汉中人，博士，副教授，研究方向:主要从事心脑血管病中药研究工作。E-mail:rouerou@sina.com

时间:2012-11-1217∶28

网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1254.R.20121112.1728.026.html