姚 庆,杨琼容,蒋 博(四川省遂宁市第三人民医院 629000)
临床上对细菌鉴定和药敏分析的要求也越来越高,目前对细菌鉴定的方法和技术很多,但手工操作过于繁琐[1]。随着临床微生物的发展,国内外相继出现了一些商品化的鉴定系统,虽然国外的仪器各方面相对比较成熟,但由于价格昂贵,不适用于标本量较少的基层医院[2]。本文选用了国内比较有代表性的HX-21的国产细菌鉴定药敏分析仪,与法国梅里埃公司Vitek-32全自动微生物分析仪对常见的50例菌株的鉴定结果进行分析比较,并对其影响因素作简要探讨,现将结果报道如下。
1.1 菌株来源 由四川省人民医院提供的50株微生物标本,包括肠杆菌科16株,非发酵菌9株,葡萄球菌9株,肠/链球菌6株,酵母样真菌5株,弧菌科细菌3株,流感嗜血杆菌2株。
1.2 质控菌株 大肠埃希菌(ATCC25922)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、铜绿假单胞菌(ATCC27853)、均购自四川省临床检验中心。
1.3 仪器与试剂 HX-21细菌鉴定药敏分析仪及其配套使用的各种鉴定试剂盒,标准0.5麦氏比浊管、补充试剂等由合肥恒星科技开发公司提供。Vitek-32全自动微生物分析仪及其配套使用的各种鉴定卡由法国梅里埃公司提供。Vitek-32测定结果由四川省人民医院检验科微生物室提供(已通过ISO15189实验室认可)。
1.4 方法
1.4.1 细菌鉴别 按《全国检验技术操作规程》要求接种标本,取纯培养的待鉴定菌株,根据菌落、菌体形态、革兰染色结果、氧化酶、触酶等试验选用相应的板条[3]。
1.4.2 菌液制备和接种菌液 无菌挑取分离纯培养教的待鉴定菌株,严格按鉴定仪的说明书调菌液并与标准比浊管比较。最后向鉴定板每孔加入菌液进行培养。同时对板条进行质控。质控菌株:大肠埃希菌(ATCC25922)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、铜绿假单胞菌(ATCC27853)。
1.4.3 结果判读 HX-21细菌鉴定药敏仪按操作说明书人工判读。Vitek-32全自动微生物分析仪的鉴定结果自动判读。
1.4.4 操作方法 以Vitek-32测定结果作为比较方法,因其已通过ISO15189实验室认可。以本院的HX-21细菌鉴定药敏仪作为试验方法。
2.1 质控菌株 大肠埃希菌(ATCC25922)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、铜绿假单胞菌经 HX-21 与 Vitek-32均鉴 定正确。
2.2 HX-21与Vitek-32对50株细菌的鉴定结果 鉴定结果完全符合(菌种一致)的48株,占96.00%,菌属符合率为99.99%,部分符合(菌属一致)的2株,占4.00%,见表1。
表1 HX-21与Vitek-32对细菌鉴定结果不符合的菌株
随着检验技术的飞速发展,微生物检验也得到了迅速的发展,以前长期手工操作不仅是鉴定时间长,而且比较繁琐,满足不了临床对细菌检验的要求。本文选用HX-21细菌鉴定药敏仪是以细菌的各种特性同等重要为基础,经每种生化反应特性在不同细菌中出现的概率进行全面分析,通过比较运用数值分类法,识别待检菌的种、型及亚型。根据结果可以看出,两种仪器比较鉴定结果完全符合(菌种一致)的48株占96.0%,菌属符合率为99.99%,部分符合(菌属一致)的2株占4%。
从以上结果分析,HX-21细菌鉴定药敏仪对非发酵菌、葡萄球菌、酵母样真菌的鉴定完全符合,对肠杆菌的鉴定和弧菌科细菌还分别有1例虽然鉴定到属,但还没鉴定到种,分析其原因可能是在鉴定过程中有两项生化反应出现弱阳性的不典型显色,还有部分鉴定性试验板条上没有,或者是有些细菌有可能经过几次转种后,失去了原来典型的生化特性[4]。肉眼判读与机器也可能存在一定差异。在工作中还发现在有些细菌鉴定时,还需要补做某些鉴定试验,耗费时间与试剂,不能一步到位,光靠氧化酶试验结果就选肠杆菌科或非发酵菌板条有一定的局限性,比如氧化酶阳性弧菌科细菌,氧化酶阴性的鲍曼不动杆菌,这点还需要我国专业技术人员进一步改进工作。相信在不久的将来,微生物检验技术将愈加完善,对临床用药的指导将日益显现出来[5]。
总结这次比较试验和平时参加四川省室间质评的回报,要做好HX-21细菌鉴定药敏仪的临床检验,还需要从事这项工作的技术人员要有丰富的微生物基础知识和全面的技术,要有一定的从业经验,以免出现鉴定的方向性错误。在临床工作中,为提高鉴定率和达到快捷、简便,价格相对低廉的HX-21国产细菌鉴定药敏仪成为中小型医院不错的选择,测定结果的误差临床均可以接受。完全能够满足中小型医院对常见细菌的鉴定,并配合药敏试验为临床合理使用抗生素提供依据。对减少耐药细菌传播、提高医疗质量、引导新型抗生素的研究与开发等有重要意义[6-7]。
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