宋海波
(望奎县动物卫生监督所,黑龙江 望奎 152100)
近年来,我国畜牧业蓬勃发展起来,而肉鸡的养殖又以其风险低,见利快而受到广大养殖户的青睐。但从养鸡水平上看,无论成活率、产蛋率,还是饲料转化率等方面和发达国家相比,都存在着很大差距。加入WTO以后,我国要保持竞争力,首要的一条就是降低生产成本。而饲料转化率不高、药物浪费则抵消了降低生产成本的努力。我国养鸡水平不高,很大一个方面就是受到疾病的困扰。可以说,如果能控制好疾病,我国的养鸡利润将会大幅度增加。造成生产损失的疾病很多,特别是由支原体感染造成的损失非常巨大,不得不引起养鸡行业的高度重视。
支原体是一种介于细菌和病毒之间的原核生物,在具有自体繁殖和合成自身大分子的微生物中,体积最小,结构也最简单。支原体主要靠寄生生存,寄生于各种动物的体内。鸡的支原体主要有败血支原体(Mycoplasmaga1lisepticum,MG) 和滑 液 囊 支 原 体(Mycoplasma synoviae,MS),另外还j有其它致病力较低的支原体如火鸡支原体、衣阿华支原体、雏鸡支原体和禽支原体等。鸡支原体病的病原体是禽败血霉形体,属于霉形体目霉形体科霉形体属的一个致病种。一般呈细小球杆状或卵圆形,大小约为0.25-0.5um,姬姆萨染色着色良好,革兰氏染色呈弱阴性。
鸡对本病易感,病鸡和隐性感染鸡是本病的传染源,本病既可以垂直传播又可以水平传播。病原体可以通过鸡咳嗽,喷嚏的飞沫和尘埃经呼吸道传染,被支原体污染的水,饲料,用具也能使本病有一个鸡群传至另一个鸡群。垂直传播可构成代代相传,使本病在鸡群中连续不断的发生。本病在鸡群中传播较为缓慢,但在新发病的鸡群中传播较快。
病鸡初期呈现精神不振,食欲减退或不食,腹泻,.鼻液增多,流浆液性或U液性鼻液,部分病鸡鼻孔周围和颈部羽毛沾污明显,鼻孔堵塞,妨碍呼吸,频频摇头或发出奇声。如鼻甲骨或气管a膜发炎时,u液增多,呼吸困难,打喷嚏。严重时,病鸡呼吸困难伸颈张口喘,呼吸是发出罗音,咳嗽。有时病初流泪,继而眼睑肿胀,眼睑上下粘合,甚至失明。全身症状表现为体温升高,生长发育迟缓,逐渐消瘦。
病理变化 单纯感染败血支原体的病例,可见轻度的鼻和眶下窦炎。自然感染的病例多为混合感染,可见到呼吸翻膜水肿,充血,肥厚,窦腔内充满a液和干酪样渗出物。早期气囊轻度浑浊,外观呈灰白色,水肿,表层有增生的结节状病灶。病情严重时,气囊增厚,囊腔内含有大量干酪样渗出物。眶下窦th膜发炎,窦腔内积有混浊勤液或干酪样渗出物,眶下窦勤膜充血肿胀。病理组织学可见被侵害的组织的勃膜显著增厚,有单核细胞浸润,a液腺增生和it膜下局灶性淋巴组织增生。该病菌容易产生抗药性,而且各地的血清型和流行情况不一样,结合实践,做了药敏实验。
1.1 病料巩文星的患病鸡1.1.2鸡胚蓬莱兽医站提供
1.2 设备电热恒温箱显微镜超净工作平台1.1.4药品蓬莱村.里集兽医站提供
1.3 方法
1.3.1 培养基
鸡肉浸出汤85thril鸡血清15thnl
葡萄糖log酵母浸出液1(h-il青霉素G钾100.万单位酚红25m1
鸡鸡肉浸出汤85thnl,加琼脂15g,煮沸溶解,调pH至7.8,高压灭菌,冷却至45摄氏度。
上述成分过滤降菌,预热到45摄氏度,两者混合均匀,立即分装成平板。
1.3.2 细菌的分离与培养
在无菌情况下,取有典型症状的鸡只的支气管中下部的渗出液,加液体培养基磨碎制成悬液,接种于液体培养基,放于27摄氏度的恒温箱中培养5天。
1.3.3 镜检
将接种环在酒精灯上火焰消毒,然后粘取鸡的呼吸道下部的渗出液体,均匀的涂抹在玻璃片上,待其自然干燥或在酒精灯上晃动使液体干燥,然后放于过滤盆的两条玻璃棒上,用滴管吸取姬姆萨染色液滴于玻璃片上,5分钟后,倾斜玻璃片倒掉姬姆萨染色液,再在玻璃片上滴上相同剂量的酒精,3分钟后,用生理盐水冲洗掉残留的染色液,冲洗千净后,自然风干或用滤纸吸千水分,放于显微镜下观察。
1.3.4 鸡胚的接种
取病鸡的呼吸道无细菌污染的渗出液经卵黄囊接种于7日龄鸡胚。接种在24小时以内死亡的鸡胚为细菌感染死亡;如果是霉形体,在5-7天可以引起鸡胚的死亡,可见到鸡胚的呼吸道有干酪样的渗出物,关节脓肿,肝和脾肿大,心包炎,或全身水肿和肝脏坏死等症状。多次继代后,死亡更加有规律且病变更明显。
1.3.5 药敏学实验
将红霉素,强力霉素,链霉素,庆大霉素,氯霉素,丁胺卡那霉素,新霉素,环丙沙星,葱诺沙星的注射液10倍稀释,取直径大约5xru"的无菌滤纸片分别浸泡于上述溶液中,制成药敏滤纸片,再将这些药敏滤纸片分别置于有鸡血清的琼脂培养基中,放于37摄氏度的恒温箱中培养24小时。多次重复试验,观察抑菌直径,选用合适药物。判定标准:抑菌圈直径6mm以下为不敏感,7M9mm为低敏感,10-15mm为中敏感,16mm以上为高敏感。
1.3.6 全血凝集反应在清洁的白瓷板或玻璃板上,滴上2滴着色的已知抗原,然后用注射器刺破被检鸡只的翅静脉,采少量血液,滴1滴于白瓷板上,用牙签将血液与抗原充分混匀,片刻后将白瓷板轻轻的左右摇晃,在1-2分钟内即可判定结果。
2.1 细菌的分离与培养
可见到菌落,典型的菌落呈圆形,微小,透明如露滴状。在40倍光学显微镜下观察时,表面光泽闪光,如玻璃珠样,菌落中心常深埋于培养基中,呈致密的圆形的突起,周围环绕以透明的Him边,直径一般为250-60(1=幼小的菌落无色透明,陈旧后中心突起部分变为淡黄色乃至棕黄色。
2.2 显徽镜观察
大部分呈球状,但还有的呈丝状,螺旋状等不规则形态。小球状是基本形态,直径大约为125N250nm,姬姆萨染色良好呈淡紫色。
血液滴入抗原中,如果蓝紫色凝块的为阳性;仅在液滴边缘部分出现蓝紫色带,或超过2分钟仅在边缘部分出现颗粒状物,一可判为可疑;经过2分钟液滴无变化的为瘾性。通过了解观察鸡.只,支原体的高发时期一般为4-7周龄,此时鸡.只生长发育很快可对营养的需求造成鸡只的抵抗力有所下降,加之饲养环境不好,'此时鸡容易得病。在饲养过程中,天气的变化,昼夜的温度差异很大,受饲的条件限N棚里面的温度不能恒定,温差在、i4-氏度,另外雨天也是细菌和病毒长发的时期,这些都是造成鸡只支原体爆发的很重要的因素。实践证明,支原体和大肠杆菌常常同时爆发,此时更容易造成鸡只的死亡。结合对支原体的诊断和药敏试验,还有临床的实践,采用了强力霉素和环丙沙星饮水治疗,同时加入了一些抗病毒的中药新型支冲灵。一个疗程以后,鸡.只的死亡率明显的下降,采食量增加,支原体和大肠杆菌得到了有效的控'制。通过对支原体的临床症状的观察,还有细菌的分离培养鉴定,自己对鸡的支原体病有了一个全面的认识,为以后的学习和工作奠定了基础,同时对于药物的选择和应用也有了进二步的认识,对疫病的流行和传播的控制有了更大的把握
[1]《家畜传染病学》第三版,中国农业出版社出版
[2]刁有样,张万福主编.《禽病学》中国农业出版社出版
[3]《兽医微生物学实验指一导》甘肃农业大学主编,农业出版社出版4《兽医微生物学》第三版,中国农业出版社出版