福建省2010年猪群伪狂犬gE抗体监测报告

吴波平，黄文华，金颜辉，黄 雁，洪 英，林 芬，杨得胜，王琳轰，吴顺意，严乾临

（1.福建省动物疫病预防控制中心，福建福州 350003；2.福建农林大学，福建福州 350003）

伪狂犬病（Pseudorabies，PR）是由疱疹病毒科的伪狂犬病病毒（（Pseudorabies virus，PRV）引起的多种动物以发热、奇痒和脑脊髓炎为主要临床特征的一种急性传染病。本病在世界各地都有发生，如欧洲各国、美国、中南美各国、马来西亚、日本等国。我国自1947年在上海首先报道猫发生本病以来，至目前已遍布我国绝大部分地区，罹患动物有猪、牛、羊、狗、猫和水貂等动物，其中以对猪的危害最为严重，给畜牧业，特别是养猪业发展造成巨大经济损失。

猪是该病的原发感染宿主，又是病毒的长期带毒和排毒者。PRV感染后，将导致仔猪死亡，成年猪则易形成潜伏感染。潜伏感染状态下的猪在一定条件下可使病毒重新激活并排毒。当前，广泛开展的疫苗接种，对强毒感染后形成的潜伏感染及再被激活有重要影响，对于消除潜在的传染源和加快伪狂犬病的净化有重要作用。据调查，当前我国内外生产和使用的PRV疫苗均为gE基因缺失苗。gE基因是PRV的主要的毒力因子之一，但不是病毒复制所需的。因此，对gE抗体的检测将有助于进行PRV疫苗毒与野毒感染的鉴别。

gE缺失疫苗的强制免疫和gE抗体的大规模监测，成为荷兰等国成功根除猪群伪狂犬疫病的主要措施，值得我国借鉴。为初步了解福建省规模猪群中伪狂犬gE抗体分布情况，为进一步开展猪群伪狂犬免疫、防控和净化根除积累数据，笔者开展了此项研究工作。

1 材料与方法

1.1 随机采样

福建省9个设区市，每个设区市选择存栏母猪100头以下规模场（A类规模场）和100头以上规模场（B类规模场）各2个，每个猪场分别采集免疫后1个月的种猪、育肥猪和仔猪血清样品各15份。

1.2 试剂盒

伪狂犬gE抗体ELISA检测试剂盒购自IDEXX公司。

1.3 实验过程

实验操作及结果判定，严格按试剂盒说明书操作。具体操作如下：用样品稀释液将被检样品稀释2倍（1:2），按要求加入阴阳性对照品后，在其余的孔内分别加入100μL已稀释好的被检样品→室温下孵育1小时或2~7℃孵育过夜→用大约300μL洗涤液洗涤板孔，重复3~5次→每孔加入100μL辣根过氧化物酶标记抗PRV gpI抗体→室温下孵育20 min。用大约300μL洗涤液洗涤板孔，重复3~5次→每孔加入100μL TMB底物液→室温下孵育15 min→每孔加入50μL终止液→酶标仪读数OD650nm→S/N值≤0.60，样品应判定为PRV gE抗体阳性。

2 结果

2.1 伪狂犬gE抗体地域分布

伪狂犬gE抗体地域分布见表1。

2.2 伪狂犬gE抗体养殖规模分布

伪狂犬gE抗体养殖规模分布见表2。

2.3 伪狂犬gE抗体阳性场分布

伪狂犬gE抗体阳性场分布见表3和表4。

3 讨论分析

3.1 PRV gE抗体的检测方法主要为ELISA，而国内市场上主要有IDEXX、LSI和HIPRA等几种试剂可供选择。从笔者长期从事的实践中，我们发现这三种试剂盒的相关性较好，与报道的一致[1]。因此，本实验选择性的使用了IDEXX gE抗体检测试剂盒。

3.2 PRV gE抗体的地区分布较广泛。9地市除宁德外都存在不同程度的PRV gE抗体阳性，猪群阳性率从5.6%到100%不等，平均为23.6%，与2009年调查结果一致（23.56%）[2]，与全国平均水平持平[3]。各地市种猪群PRV gE抗体阳性分布较广泛，阳性率从16.7%到100%，平均为28.9%。仔猪和育肥猪的PRV gE阳性率地域分布较不均匀，平均阳性率分别为16.6%和20.4%。比较而言，种猪群、育肥猪群和仔猪群PRV gE阳性率依次降低，其中种猪群的阳性率较广东省冼琼珍报道的低[4]。

3.3 PRV gE抗体在不同养殖规模猪场中的分布不均匀。其中种猪群PRV gE抗体阳性率从高到低依次为中型养殖规模（母猪存栏100~500头）>中大型养殖规模（母猪存栏500~1 000头）>大型养殖规模（母猪存栏1 000以上）>小型养殖规模（母猪存栏<100头）（此分类仅供参考，下同），阳性率分别为32.7%、28.8%、24.2%和15.3%。育肥猪群与种猪群有着类似的分布规律，而仔猪群呈现非常明显的随养殖规模增大，仔猪PRV gE阳性降低的特点。

表 1 伪狂犬gE抗体地域分布

表 2 伪狂犬gE抗体养殖模式分布

表 3 伪狂犬gE抗体阳性场比例之地域分布

表 4 伪狂犬gE抗体阳性场比例之养殖模式分布

3.4 PRV gE抗体阳性养殖场比例高。从对养殖场调查结果看，67.6%的猪场存在种猪群PRV gE抗体阳性，这一结果略高于2009年调查结果（62.5%）[2]，低于全国平均水平73.03%[3]，而仔猪群和育肥猪群中的PRV gE阳性养殖场比例分别为38.2%和34.1%。不同养殖规模，PRV gE阳性养殖场比例呈现一定分布规律：随着养殖规模的增大，种猪群、仔猪群、育肥猪群的猪场阳性率都逐渐减小。总体而言，猪场内存在PRV gE阳性的猪场比例依次为小规模猪场66.7%，中型规模猪场78.9%，500头母猪以上存栏的猪场比例为53.9%，平均为26/38=68.4%，较杨小燕报道[5]的比例高，可能与地区差异有关。

3.5 这说明，该省PRV gE抗体阳性率较高。目前我国市场上猪伪狂犬疫苗都为gE基因缺失苗，gE抗体阳性率高，从一个侧面反映了当前猪群中存在伪狂犬野毒感染的概率较高。因此，有必要对生猪群疫苗应用历史进行调查，了解gE基因未缺失疫苗的使用情况，结合临床实践，确认猪场中猪伪狂犬野毒感染形势。越来越多的研究和实践表明，母猪群的更新淘汰和gE基因缺失疫苗的使用能有效降低猪群中gE抗体的阳性率，从而有助于正确评估伪狂犬野毒感染。

[1]陈伟杰，赵灵燕，周彩琴，等.3种ELISA试剂盒检测猪伪狂犬病 gE 抗体的比较[J].畜牧与兽医，2009，41（11）：57-59.

[2]陈如敬，王隆柏，魏宏.福建省部分地区规模化猪场伪狂犬病感染情况调查[J].养猪，2010（1）：38-40.

[3]程晶，陈艳红，荫硕焱，等.2006-2008年我国部分地区规模化猪场PRV血清流行病学调查 [J].中国动物传染病学报，2009，17（1）：67-72.

[4]冼琼珍，蔡明福，王淑敏，等.广东、广西部分地区中小型猪场猪伪狂犬病野毒感染的血清学调查[J].畜牧兽医科技信息，2007（1）：20-21.

[5]杨小燕，戴爱玲，李晓华，等.闽西地区猪伪狂犬野毒株感染的血清学调查[J].中国兽医科技，2000（11）：36-37.