人参蛋白对小鼠抗疲劳作用的研究

徐云凤，赵 雨，邢楠楠，杨 菲，林艳玲

(长春中医药大学，吉林长春 130117)

人参蛋白对小鼠抗疲劳作用的研究

徐云凤，赵 雨*，邢楠楠，杨 菲，林艳玲

(长春中医药大学，吉林长春 130117)

目的:研究人参蛋白对小鼠的抗疲劳作用。方法:选用昆明小鼠，经灌胃给予人参蛋白0.1，0.2，0.4g/kg，同时设空白对照组，连续灌胃30d。分别观察小鼠的体重变化情况、负重游泳时间、血乳酸、肝糖原和血清尿素氮的含量。结果:人参蛋白能明显延长小鼠游泳时间、降低血乳酸值、增加肝糖原及血清尿素氮含量。结论:人参蛋白具有增强小鼠抗疲劳功能的作用。

人参蛋白，抗疲劳，小鼠

人参(Panax ginsengC.A.Mey.)是五加科人参属植物的根和根茎，为我国名贵药材。人参中含有许多化学活性物质，它对人体中枢神经、心血管、免疫、消化和内分泌等诸多系统都具有生理作用［1－2］。近年来，人们对人参皂甙及挥发性成分研究较多，但对蛋白质及多肽的研究较少［3－4］。本实验通过研究人参蛋白对小鼠负重游泳和运动后小鼠血乳酸、肝糖原及血清尿素氮含量等抗疲劳指标的影响，综合分析了其抗疲劳作用，为进一步开发抗疲劳功能食品奠定理论基础。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

5年生人参 吉林靖宇县，均为五加科植物人参(Panax ginsengC.A.Mey.)，符合2005年版《中国药典》规定;样品 将人参粉碎成粉，加入10倍量蒸馏水浸提24h，浸提液分别进行微滤(泵速为270r/min，进口压力 3psi，出口压力 2psi)和超滤(泵速为60r/min，进口压力5psi，出口压力3psi)，滤液冷冻干燥得人参蛋白冻干品［5－6］，经Brad－ford蛋白含量试剂盒法测定蛋白含量为80%;动物 昆明种清洁级小鼠240只，吉林大学实验动物中心，合格证号∶SCXK－(吉)2008－0005，体重∶18～22g;二乙酰肟、三氯化铁、苯甲酸、4%硫酸铜、1%氟化钠、浓硫酸、5%的三氯醋酸(TCA)、蒽酮试剂等 国产分析纯。

DS－1型高速组织捣碎机 上海标本模型厂; QuixStan型中空纤维膜过滤系统，0.45μm中空纤维过滤柱，100ku纤维过滤膜堆 GE Healthcare公司; LL3000型冷冻干燥机 Heto公司;751－G型紫外分光光度计 上海分析仪器厂;722N型分光光度计上海尤尼柯有限公司;组织匀浆器 上海正慧工贸有限公司;HH.S21－8－S型恒温水浴锅 上海跃进医疗器械厂;游泳箱 50cm×40cm×40cm。

1.2 实验方法

1.2.1 动物分组 将实验动物适应性喂养2d后随机分为4组，即空白对照组(同体积蒸馏水)和3个受试药物组(低剂量组∶0.1g/kg，中剂量组∶0.2g/kg，高剂量组∶0.4g/kg)。每天灌胃一次，连续30d，灌胃期间饲喂合成鼠料，自由进食、饮水。

1.2.2 小鼠游泳实验 末次给予受试样品30min后，将尾根部负荷5%体重铅皮的小鼠置于游泳箱中游泳。箱中水深不少于30cm，水温(25±1)℃，记录小鼠自游泳开始至死亡的时间，即小鼠负重游泳时间。

表1 人参蛋白对小鼠体重与负重游泳时间的影响

表2 人参蛋白对小鼠血乳酸含量的影响

1.2.3 血乳酸测定 末次给予受试样品30min后，各采血20μL加入40μL破膜液中，立即充分振荡破碎细胞，同时将采血后动物置于温度为30℃的水中不负重游泳，10min后停止。游泳后立即采血20μL加入40μL破膜液中振荡，休息20min后再各采血20μL加入40μL破膜液中振荡，用乳酸仪测定各样品血乳酸值。

1.2.4 肝糖原测定 末次给予受试样品30min后，处死动物，取肝脏经生理盐水漂洗，用滤纸吸干后置于冰面上的平皿内，迅速称取肝脏100mg，测定肝糖原含量(蒽酮法)。

1.2.5 血清尿素氮测定 末次给予受试样品30min后，将小鼠置于温度为 30℃的水中不负重游泳90min，休息60min后采眼球血0.5mL，血凝固后取血清用二乙酰－肟法测定血清尿素氮含量。

2 结果与分析

2.1 人参蛋白对小鼠体重与负重游泳时间的影响

由表1可见，人参蛋白各剂量组与空白对照组比较，小鼠体重均有增加的趋势，但无统计学意义;人参蛋白0.1g/kg剂量组与空白对照组比较，负重游泳时间增长且有显著性差异(P＜0.05)，而其他两组小鼠负重游泳时间也有增长的趋势，但结果没有显著性差异(P＞0.05)。

2.2 人参蛋白对小鼠血乳酸含量的影响

由表2可见，游泳前给药组小鼠比对照组小鼠血乳酸含量明显降低，且有极显著性差异(P＜0.01);游泳后0min，给药组小鼠血乳酸含量有所升高，但低于对照组，且低剂量组有显著性差异(P＜0.05);游泳后20min，各组小鼠血乳酸含量都降低，其中低剂量组与对照组有显著性差异(P＜0.05);人参蛋白高、中、低剂量组较对照组乳酸曲线下面积均明显降低，其中高、中剂量组有显著性差异(P＜0.05)，低剂量组有极显著性差异(P＜0.01)。

2.3 人参蛋白对小鼠肝糖原含量的影响

由表3可见，与对照组比较，人参蛋白0.1g/kg剂量组能明显增加小鼠肝糖原的含量(P＜0.01)，而人参蛋白中、低剂量组有增加肝糖原含量的趋势，但无显著性差异(P＞0.05)。

表3 人参蛋白对小鼠肝糖原含量的影响

2.4 人参蛋白对小鼠血清尿素氮含量的影响

由表4可见，与对照组比较，人参蛋白各剂量组小鼠血清尿素氮含量均有增加趋势，但没有显著性差异(P＞0.05)，说明人参蛋白对血清尿素氮含量的影响不大。

表4 人参蛋白对小鼠血清尿素氮含量的影响

3 讨论

运动耐力是反映机体疲劳程度最直接、最客观的指标［7］。研究结果表明人参蛋白可延长小鼠负重游泳时间，有利于增强动物的运动耐力。机体大量运动后处在高度缺氧状态时主要依靠糖无氧酵解供给能量，乳酸是糖无氧酵解的产物，长时间剧烈运动使机体中乳酸积累过多，从而影响体内环境的相对稳定和体内的正常代谢过程。血乳酸水平可以反映有氧代谢能力、疲劳的产生和消除速度［8］。研究表明负重游泳后给药组小鼠的血乳酸曲线下面积明显少于对照组(见表2)，说明人参蛋白能够有效减缓小鼠的疲劳增加，同时加快其消除速度。糖原是运动能量的重要来源，糖原的储存量可以直接影响机体的运动能力，提高糖原储备量有助于提高耐力和运动能力，抵抗疲劳。肝糖原含量直接反映机体糖原代谢情况，本实验以肝糖原的含量来反映运动对糖原消耗情况［9］，结果显示给药组小鼠肝糖原消耗量明显低于对照组。机体血清尿素氮含量随运动负荷的增加而增加，是机体运动过程中的一种代谢产物，需要及时运输，在体内积累后，将表现为机体对负荷的适应能力差，机体显示疲劳的现象，本实验中人参蛋白对小鼠血清尿素氮含量影响不明显。综上所述，人参蛋白具有增强机体抗疲劳功能的作用，本研究为人参活性资源的开发利用提供理论依据。

［1］贺兴东.浅谈人参的合理使用［J］.中国中药杂志，1989，14 (7):52－53.

［2］李晶晶，徐国钧，金蓉鸾，等.人参与西洋参的皂甙成分分析［J］.中国中药杂志，l995，20(4):l97－199.

［3］马波，邱芳萍，严铭铭，等.人参蛋白的分离纯化［J］.现代食品科技，2006，22(4):156－163.

［4］王洪涛，尹花仙，金海珠，等.海参肽对小鼠抗疲劳作用的研究［J］.提取与活性，2007，23(3):89－91.

［5］王贞贞，张维玉.现代过渡技术——超滤技术［J］.中国医院药学杂志，1992，12(6):284.

［6］幺宝金，赵雨，杨士慧，等.人参总蛋白的提取工艺研究［J］.中药材，2009，32(2):293－295.

［7］何来英，严卫星，楼密密，等.保健食品抗疲劳作用实验方法研究［J］.中国食品卫生杂志，1997，9(4):1－6.

［8］龚晨睿，李宇红，马良，等.红景天复合制剂对小鼠运动代谢指标的影响［J］.湖北预防医学杂志，2002，13(6):5－8.

［9］李永进，杨睿悦，扈学俸，等.火麻仁蛋白对小鼠抗疲劳和免疫调节功能的初步研究［J］.卫生研究，2008，37(2):175－178.

Study on anti－fatigue effects of ginseng protein on mice

XU Yun－feng，ZHAO Yu*，XING Nan－nan，YANG Fei，LIN Yan－ling
(Chinese Medicine and Bio－engineering Research Center，Changchun University of Chinese Medicine，Changchun 130117，China)

Objective:To study the anti－fatigue effect of ginseng protein on mice.Methods:Three doses(0.1，0.2，0.4g/kg)of ginseng protein and a blank dose were applied to mice for 30 days continuously.The weight，swimming time，the contents of blood lactic acid，and liver glycogen and blood urea nitrogen of mice were observed.Results: Ginseng protein had no effect on mice’s weight，all doses of ginseng protein could significantly prolong swimming time in mice，lower the content of blood lactic acid，increase the content of liver glycogen after strenuous exercise. Conclusion:The study showed that the ginseng protein had anti－fatigue effects.

ginseng protein;anti－fatigue;mice

TS201.4

A

1002－0306(2011)11－0406－03

2010－11－15 *通讯联系人

徐云凤(1986－)，女，硕士研究生，研究方向:中药学。

国家自然科学基金资助项目(30873371);国家科技支撑计划资助项目(2007BAI38B02)。