治糜灵凝胶剂对实验性宫颈糜烂大鼠宫颈阴道组织病理形态学的影响

梁雪，段凤丽，肖洪彬，段富津

(黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040)

宫颈糜烂是慢性宫颈炎常见的一种病理改变。约有25%～51%或更多育龄妇女罹患此病，且易发生癌变。是妇科常见病、多发病，严重威胁着广大妇女的身心健康。除了分娩、流产、手术操作等长期慢性机械性刺激与损伤会引起宫颈糜烂，也可因化学物质、病原体、放射线等其他致病因子而发生。治疗宫颈糜烂是作为宫颈癌的一级预防，是阻断宫颈癌发生的重要手段。

治糜灵凝胶剂主治宫颈糜烂、感染性阴道炎、滴虫性阴道炎。由黄柏、苦参、枯矾、儿茶、冰片五味中药组成，具有清热燥湿，解毒杀菌，祛腐生肌的功效。临床用治宫颈糜烂，总有效率在80%以上。为了提高疗效，拟改为凝胶剂，为此通过对治糜灵栓剂及其凝胶剂对实验性宫颈糜烂大鼠宫颈阴道组织病理形态学影响的观察，来验证其功效。

1 材料与方法

1.1 实验动物

雌性未孕Wistar大白鼠，体质量170～240g，由黑龙江中医药大学实验动物中心繁殖提供。

1.2 药物及试剂

治糜灵凝胶剂、治糜灵栓剂均由哈尔滨世一堂制药厂提供。

1.3 仪器

德国莱卡TP1020脱水机;德国莱卡EG1150C组织包埋机;德国莱卡RM2135轮转切片机;德国莱卡HI1210·HI1220裱·烤片机;日本尼康E600生物显微镜。

1.4 造模方法［1］

将已制备好的25%苯酚胶浆药液用1ml一次性注射器抽取，按每只大鼠0.1ml的剂量注入大鼠阴道内深约1cm处(注意动作需轻柔缓慢)，1次/2天，共5次，造模过程中肉眼观察大鼠阴道变化，造模4次后大部分大鼠阴道出现充血红肿，并有白色分泌物渗出，提示造模成功，再继续造模1次。

1.5 分组及给药

于造模成功次日，取造模成功大鼠50只，随机分为5组，每组10只，另取10只正常鼠作为正常对照组。即空白对照组:等量盐水0.46ml/kg;模型对照组:等量盐水0.46ml/kg;治糜灵凝胶剂高剂量组:1.84g/kg;治糜灵凝胶剂低剂量组:0.46g/kg;治糜灵栓组:0.28g/kg;基质组:0.46g/kg。各组动物用1ml注射器吸取药液或基质注入阴道深部，每日2次，间隔4h，连续给药10天。

1.6 取材

明末意大利传教士利玛窦在《利玛窦中国札记》一书中写道，中国“各个城市都有千百名更夫在街上巡夜，按规定的间隔敲锣，而且街道都有铁栅并且上锁。尽管如此，宅院被夜贼抢劫一空的事还常常发生，这或许因为更夫本人就是盗贼，或者是和盗贼合伙。”此时中国之城市面貌，与两宋时相比，不由令人叹息。

末次给药次日，立即处死大鼠取阴道至子宫分角处组织，将病变组织放入10%的甲醛溶液浸泡固定24h，随即采用取材，脱水，石蜡包埋，切片(5um)，HE染色常规病理组织学检查。光学显微镜下，观察阴道及子宫组织病理形态学改变。

1.7 病理组织评分标准

黏膜病变评分标准为:0分:未见明显变性坏死、脱落及溃疡;1分:可见轻度变性坏死、脱落及糜烂;2分:可见明显变性坏死、脱落及溃疡;3分:可见大量变性坏死、脱落及糜烂。

黏膜下层血管扩张充血病变评分标准为:0分:黏膜下层未见明显扩张血管;1分:黏膜下层可见轻度扩张血管;2分:黏膜下层可见明显扩张血管;3分:黏膜下层较多增生血管扩张。

黏膜下层炎细胞浸润病变评分标准为:0分:未见明显炎细胞浸润;1分:可见轻度炎细胞浸润;2分:可见明显炎细胞浸润;3分:可见大量炎细胞浸润;黏膜下病变评分标准为:0分:有脓肿存在;1分:无脓肿形成。

2 结果

2.1 病理改变评价 见表1。

表1 治糜灵凝胶剂对苯酚胶浆引起的大鼠宫颈糜烂病理的影响

2.2 光镜观察

正常组大鼠阴道及宫颈:阴道粘膜有许多横行皱襞，表面为非角化的复层扁平上皮。固有层为较致密的结缔组织，含有弹性纤维。肌层为平滑肌，排列较疏松。正常大鼠宫颈－阴道交界处子宫内膜皱襞多，之间的上皮形成许多腺样隐窝。内膜表面为单层柱状上皮，多为粘液性分泌细胞，也有少量纤毛细胞。宫颈与阴道交界处单层柱状上皮移行为复层扁平上皮(图1，图2)。

图1 正常对照组大鼠宫颈组织

图2 正常对照组大鼠阴道组织

模型组:阴道粘膜上皮增生，上皮细胞缺损、脱落，可见炎细胞浸润;腔内有炎性渗出物及脱落组织;宫颈粘膜上皮细胞部分增生、变性及坏死脱落，表面形成乳头状突起，腺体减少;粘膜下层及固有层血管增多，扩张充血水肿，间质有纤维组织增生及炎细胞浸润;腔内可见炎性渗出物及坏死组织(图3，图4)。

图3 模型对照组大鼠宫颈组织

图4 模型对照组大鼠阴道组织

高剂量组:阴道上皮粘膜基本完整，略有增厚，固有层内并未见大量的炎细胞浸润。宫颈粘膜仅为较正常的单层柱状上皮覆盖，外观平坦，粘膜下组织并无明显充血、水肿、炎性细胞浸润。宫颈大部分坏死粘膜及固有层均有不同程度的肉芽增生，宫颈粘膜基本趋于正常，并未发现显著的病理形态学改变(图5，图6)。

图5 治糜灵凝胶剂高剂量组大鼠宫颈组织

图6 治糜灵凝胶剂高剂量组大鼠阴道组织

低剂量组:阴道表面上皮基本完整，略有增厚，腔内有少许脱落上皮细胞 ;固有层内有明显的炎细胞，腔内未见渗出物及坏死组织。宫颈部分坏死粘膜处有肉芽组织增生，固有层增生，粘膜上皮残有少量腺体，腔内未见大量炎性渗出物，部分宫颈粘膜接近正常，未见明显改变(图7，图8)。

图7 治糜灵凝胶剂低剂量组大鼠宫颈组织

图8 治糜灵凝胶剂低剂量组大鼠阴道组织

基质组:阴道上皮粘膜脱落，有明显炎细胞浸润，腔内见有炎性渗出物。宫颈内部分粘膜有粘膜脱落;腺体不完整，腔内见大量炎细胞及渗出物(图9，图10)。

图9 治糜灵凝胶剂基质组大鼠宫颈组织

图10 治糜灵凝胶剂基质组大鼠阴道组织

原剂型组:阴道上皮粘膜稍有增厚，固有层内及其腔内只见少量炎性渗出物及坏死组织。宫颈粘膜及粘膜下坏死组织有肉芽增生，固有层内残存部分腺体并伴有增生，腔内充血，上皮尚未完全增生修复，腔内无大量炎性渗出物;部分宫颈粘膜接近正常，未见明显病理改变(图11，图12)。

图11 治糜灵栓剂组大鼠宫颈组织

图12 治糜灵栓剂大鼠阴道组织

3 讨论

宫颈糜烂多由急性宫颈炎转变而来，常因急性宫颈炎治疗不彻底，病原体隐藏于宫颈粘膜内形成慢性炎症，多见于分娩、流产或手术损伤宫颈后，病原体侵入而引起感染。宫颈糜烂主要为炎性糜烂。根据病理组织形态学的观察，应用25%苯酚胶浆制作的宫颈糜烂阴道炎模型，类似于炎症性糜烂。光学显微镜下阴道被覆上皮损伤，细胞变性、脱落坏死，腔内及固有层内可见充血水肿以及大量中性粒细胞浸润，炎性渗出物和部分坏死组织。宫颈粘膜上皮缺损，粘膜上皮细胞变性、坏死脱落，部分腺体被破坏或消失，粘膜层充血水肿亦有大量炎细胞浸润，坏死组织与脓性渗出物广泛分布于腔内。经治糜灵凝胶剂各剂量组以及原剂型治疗后，对阴道上皮及宫颈粘膜均有不同程度的修复，粘膜以下各层充血水肿减轻，炎性渗出物减少，镜下只见少量炎细胞浸润，并以高剂量组疗效最为显著。提示治糜灵凝胶剂与治糜灵栓剂对25%苯酚胶浆所致大鼠宫颈糜烂阴道炎具有良好的治疗效果，两者均能够加速修复阴道及宫颈损伤的粘膜上皮，使各层组织炎细胞浸润和炎性渗出减少，充血水肿减轻。目前，凝胶剂是一种具有广阔发展前景的阴道给药制剂［2］，上述病理表现为临床应用治糜灵凝胶剂治疗宫颈糜烂提供了实验依据。

［1］ 田振坤，马英丽，王文姌.治糜灵泡腾胶囊栓对苯酚致大鼠宫颈糜烂模型的治疗作用［J］.中医药学报，2010，39(4):44 －46.

［2］ 刘玠，翟春梅，楮利娟.中药凝胶剂在宫颈炎中的应用进展［J］.中医药学报，2010，39(5):88 －90.