端粒酶抑制剂在恶性肿瘤治疗中的作用

陈取 赵力挽 杜志成

端粒酶抑制剂对于恶性癌症的临床作用，通过近几年来的研究，正逐渐为人所熟悉。其作用机制各有不同，但最终的效用都能够抑制恶性肿瘤细胞的生长与分裂［1］。此类物质包括：反义寡核苷酸，逆转录抑制剂，G-四连体稳定剂，蛋白激酶C抑制剂，化疗药物。

1 反义寡核苷酸(antisense oligodexoynuclectide，ASODN)

反义寡核苷酸能够与靶RNA或DNA特异性互补，能够使得恶性肿瘤细胞端粒酶活性降低，进而其增殖能力下降，甚至调亡。应用这一原理，人工的合成针对模板序列的反义核苷酸抑制剂在研究中已取得很大突破。

例如 Mete等［2］使用硫代反义核苷酸(PAS-ODN)对Burkitt's瘤中淋巴瘤细胞系OMA-BLI生长有明显的压制作用，导致细胞死亡。此外夏雪梅等［3］对凋亡抑制基因survivin反义寡核苷酸的研究表面，通过使用bcl-2反义寡核苷酸对肺癌细胞株的抑制作用十分显著，可出现肺癌细胞生长抑制以至凋亡，细胞survivin mRNA明显下降。肺癌细胞株survivin基因表达受到survivin反义寡核苷酸的有效抑制。并诱导细胞凋亡和生长延缓，同时也证明联合bcl-2反义寡核苷酸对提升抗癌能力有明显功用。

2 逆转录酶抑制剂(reserve transcripitase inhabitors)

3'-叠氮-3-脱氧胸腺核苷(3'-azido-2'，3'-dideoxythymidine，AZT)作为逆转录抑制剂中最为人所关注的一种，其临床价值得到广泛肯定。

吕继博［4］用改良的MTT法测定不同浓度AZT处理C6胶质瘤干细胞及胶质瘤细胞后，在不同阶段的药物敏感性。MTT结果显示，ATZ对胶质瘤干细胞及胶质瘤细胞有着异常强烈的抑制作用，且随着AZT的浓度增加及作用时间的延长，其抑制细胞的增殖作用逐渐增强，有时间-剂量相关关系。通过流式细胞仪检测可得：伴随AZT浓度的增加，胶质瘤干细胞及胶质瘤细胞的S期细胞比例增高，并伴有凋亡细胞的增多。进一步表明AZT作用于S期细胞，抑制C6胶质瘤干细胞的生长，但C6胶质瘤干细胞对AZT存在耐药性，需注意。

3 G-四联体稳定因子

G-四联体稳定因子的作用机制在于特异性的结合于端粒3端由鸟嘌呤折叠形成的四链DNA，既是G-四连体上，从而阻止端粒和端粒酶的结合，抑制其活性。

目前，三乙烯四胺(TETA)的研究有较大进展。殷菲等［5］通过实验证明三乙烯四胺(Triethylene tetramine，TETA)能够与G4-DNA产生相互作用提高其稳定性。TETA能够促进G4-DNA这一有分子间平行特性的分子的形成，继而抑制端粒酶阳性的 HeLa、MCF-7、K562、ECV·304及PC12细胞的增殖。作用72 h，TETA对各种细胞的半数 抑制浓度(IC5o值)分别为：HeLa细胞75株，MCF-7细胞124株，K562细胞175株，EeV-304细胞221株，PelZ细胞452株;而对人体内端粒酶阴性的HLF细胞的增殖则无明显效用。上述研究结果表明TETA的作用机制为：稳定G4-DNA的结构的同时抑制端粒酶活性，以达到抑制肿瘤细胞增殖的作用。

4 蛋白激酶C抑制剂

蛋白激酶C作为激活细胞活性的重要环节，在信号传导系统中的作用不言而喻。Ku-WC等［6］发现蛋白抑制剂和H-7对鼻炎癌细胞NPC-076端粒酶活性，有很强的抑制作用。

此外，张海泉等［7］发现，通过对星型孢菌素进行结构改造可以得到一系列吲哚马来酰亚胺类化合物，既是一类新型蛋白激酶C抑制剂。采用MTT法对的抗肿瘤活性进行研究，发现吲哚马来酰亚胺类化合物在10 μm浓度下，对人宫颈癌Hela细胞株均表现出不同程度的抑制作用。而对其他肿瘤细胞株，诸如白血病K562等的抑制作用以及其进一步的抗肿瘤活性和作用机理目前尚未彻底阐明。

5 化疗药物

化疗作为癌症治疗的常规手段，对于癌症的治愈有重要作用。顺铂作为一种常用的化疗药物，在临床中广泛使用。何春容等［8］发现顺铂对表达锌指蛋白217(ZNF217)的卵巢癌组织的化疗敏感性呈负相关关系。既是卵巢癌耐药株ZNF217为高表达，而卵巢癌敏感株则为低表达;ZNF217在卵巢癌耐药株中为核表达，但在卵巢癌敏感株则主要为浆表达;此外顺铂可以下调凋亡终末效应酶caspase 3和caspase 9活性，并作用于端粒酶，最终促进卵巢癌组织细胞的凋亡(锌指蛋白217可以抑制这一过程)。

综上所述，以反义核苷酸抑制剂为代表的端粒酶抑制剂，能通过各自不同的作用机制抑制端粒酶的活性，从而最终导致肿瘤细胞的凋亡。这对于癌症的治疗有着显著的临床意义，但例如AZT所存在的耐药性，以及顺铂对于ZNF217的依赖，都影响了它们的作用效果。其工作机制还需进一步阐明。

［1］丁金丽，刘芳芳，于成国.端粒酶抑制剂的研究进展.日本医学介绍，2006，27(10)：473-475.

［2］Meta JE，Jashi ss，Palen B，et al.A hexamerie phosphorothloate obligonucleotide telomerase inhibitor arreals growth of Burkitt's lymphoma cells in vitro and vivo.Toxicol Appl Plamacol，1997，144(1)：189-197.

［3］夏雪梅，陈余清，蔡应云，等.调亡抑制基因SURBIBIN反义寡核苷酸联合Bcl-2反义核苷酸诱导肺癌细胞株凋亡的实验观察.中国临床康复，2005，47：140-149.

［4］吕继博.端粒酶抑制剂AZT对C6交直流干细胞作用的体外实验研究.硕士毕业论文，2010.

［5］殷菲，碰孝军.三乙烯四胺与G四链体DNA相互作用、抑制端粒酶活性及抗肿瘤作用研究.大连：大连理工大学，2005.

［6］Ku Wu，Cheng AJ，Wang TC，et al.Inhibition of telomerase activity bu PKC inhibitor in human nusopharygeal cnacer cells in culture.Biochem Biophys Rea Commun，1997，241(3)：730-736.

［7］张海泉，卿凤翎，赵圣印.3-吲哚马来酰亚胺类蛋白激酶C抑制剂的合成及其抗肿瘤活性的研究.上海：中国科学院上海冶金研究所，材料物理与化学(专业)博士论文，2000.

［8］何春容，钟梅，孙爱民，等.锌指蛋白217表达与卵巢癌组织顺铂化疗敏感性的关系.广东医学，2010，31(21)：2793-2794.