科技进展

猪的营养措施改善环境因素的潜力

农业生产的环境问题越来越受到人们的重视。这些环境问题可以概括以下几个方面：粪尿的贮存和处理、空气质量、粪尿的营养含量、土壤养分的数量。近期兴起的EcoCare饲养方法是一种兼顾粪尿处理、氨气排放、营养物质排泄量和动物最佳生产性能的精准且低成本的养猪方式。

EcoCare饲料中的成分降低了猪粪尿固体物质的含量及其粘度，改善了猪粪尿的物理性状，从而使贮存的粪尿易于搅拌和被粪尿处理机械操作。试验结果表明，饲喂EcoCare饲料45天后，猪粪尿的固体物质降低了14%，粘度下降了22%，这对粪尿的处理具有重要的意义。此外，EcoCare饲料因含有晶体氨基酸、芽孢杆菌和皂苷类物质有降低氨排放的能力。

LongView动物营养研究中心在模拟猪粪尿贮存试验的结果表明，与对照组相比在45天试验期中饲喂EcoCare饲料的猪其粪尿中氨气挥发量降低了18%。据此可以推测，生产中EcoCare饲料可以降低氨排放量的40%。营养调控措施可以大大降低饲料中营养物质的浪费。饲料中添加晶体氨基酸或者使用特别的饲料添加剂就是降低粪便中含氨氮挥发的一种有效措施。而饲料中添加植酸酶也能通过提高饲料中磷的消化率降低日粮中无机磷的量从而有效降低磷排放。这些营养调控措施都是不影响猪生长性能的有效措施。事实上，Eco-Care饲料与其它配合饲料相比其饲料转化率提高了4%。

译自：Petersen S.T.the potential ability of swine nutrition to influence environmental factors positively.J Anim.Sci，2010（88） :95-101.

猪场生物燃料的生产对甲烷和氨气排放的影响

甲烷和氨气都是有机物厌氧发酵后产生的对环境有害的气体。把猪场中排放的甲烷作为生物燃料利用已被作为降低猪粪尿贮存过程中甲烷挥发的一种方法。本研究的内容是粪便生产生物燃料后猪场甲烷和氨气在动物饲养过程中排放量的变化。

本文比较了传统粪便处理方式的猪场和生物燃料开发利用猪场甲烷和氨气排放量的差异。通过对化粪池中粪便去有机化处理使猪场氨气年平均排放量降低47%。这说明与传统处理粪便的猪场相比，这种处理方式使得温室效应降低44%。但是，甲烷产量的降低使得NH4+向氮气转化降低，而生物燃料开发利用猪场比传统粪便处理猪场氨气排放增加了46%。

本研究表明，猪场生物燃料开发利用这种看似环境友好型的技术会带来比较复杂的环境效应，在推广应用之前还需要对其进行深入研究。

译自：Lowry A.Harper et al.the effect of biofuel production on swine farm methane and ammonia emissions.J.Environ，2010 （39） :1984-1992.

猪唾液样品检测A型流感病毒

猪唾液样本一般用来检测猪繁殖与呼吸衰竭综合征病毒和2型猪圆环病毒。本研究的目的是确定流感病毒是否存在于猪的唾液中，能否达到检测水平，验证一个从猪唾液检测流感病毒的标准分子诊断。

在接种病毒后的3、4、5、6天 （气管接种A/猪/爱荷华州/00239/2004H1N1病毒），收集来自4组的共24只猪的唾液样本 （共16个感染猪唾液样本），2组未接种12只猪作为阴性对照。在感染后三天和七天收集所有36只猪的鼻腔试子作为检测样品。所有的唾液样品被实时定量PT-PCR检测，同时分离病毒。鼻腔试子样本在进行RT-PCR检测后，用于病毒分离培养。病毒接种猪的唾液样品不能分离到病毒，但是可用实时定量RT-PCR检测出94% （16个阳性唾液样本用RT-PCR检测出15个）的阳性唾液样本。从48个鼻腔试子中 （病毒接种猪）有32个分离出病毒。

此外，在该地区从2009年8月1日～2010年1月31日期间采集的910头猪的唾液中，有328只经过实时定量RTPCR检测为阳性。

这个实验研究说明实时定量RT-PCR是一种快速检测的方法，唾液样本检测流感病毒为基层提供了一种简单、高效和安全的检测流感病毒的方法。

译自：Susan E.Detmer,Devi P.Patnayak,Yin Jiang,Marie R.Gramer.Detection of Influenza A virus in porcine oral fluid samples.J Vet Diagn Invest， 2011， 23 （2）:241-247.

猪繁殖与呼吸衰竭综合征病毒编码新结构蛋白的选择开放阅读框5（ORF5）在所有的动脉炎病毒属存在

猪繁殖与呼吸衰竭综合征病毒 （PRRSV）属动脉炎病毒属，为1980年代末期欧洲和北美报道的猪繁殖与呼吸衰竭综合征的病原,目前该病已经成为世界范围内最重要的猪病。尽管大量分析和比较PRRSV和动脉炎病毒属病毒的表征蛋白质。然而人们对决定毒力、致病机理以及保护性抗原的了解还甚少。因此，我们猜想PRRSV基因组外的阅读框 （ORFs）可能对它的生物特性的形成起作用。

我们筛出高纯度的VR2332病毒粒子，它是2型PRRSV毒株。一个51氨基酸的多肽-GP5被发现，它由一个编码包膜糖蛋白的亚基因组mRNA的可选择ORF编码，这个蛋白已经整合进入病毒颗粒。这个蛋白，被称作ORF5a蛋白，ORF5a蛋白在被感染的细胞中表达，猪感染PRRSV后产生抗-ORF5a的蛋白的抗体。在所有的PRRSV亚基因组 RNA5基因以及所有的其他动脉炎病毒属病毒中存在一个相同的可选择阅读框,揭示了ORF5a蛋白在动脉炎病毒中的重要作用。它的发现对免疫学和药理学干预PRRS提供了新的方向。

译自：Johnson CR,Griggs TF,Gnanandarajah J,Murtaugh MP.Novel structural protein in porcine reproductive and respiratory syndrome virus encoded by an alternative ORF5 present in all arteriviruses.J Gen Virol， 2011 ， 92 （Pt 5）:1107-1116.Epub 2011 Feb 9.

罗马尼亚野猪群中猪的圆环病毒2型遗传学的多样化

在这个研究中，我们分析了罗马尼亚野猪群中分离的23个PCV-2的ORF2序列。这些PCV-2来自罗马尼亚的不同地域,是在2008～2009年监测典型猪瘟病毒时分离的。 测出完整的开放阅读框2（ORF2），并且和来自欧洲和亚洲的分离株进行 核苷酸序列序列对比。

罗马尼亚PCV-2的序列被确定为以前发现的2a和2b群，具有高度的变异性 （PCV-2 ORF2核苷酸同源性为90.1%和100%）。有趣的是，对于2a群来说主要的序列 （9个中的8个）与亚洲分离株接近 （尤其跟中国及印度和南韩的分离株接近），其中有三个来自欧洲，曾经被德国、比利时和荷兰报道过的病毒株。

译自：Turcitu MA,Wellenberg GJ,Barboi G,Codreanu MD， etal.Genetic diversity ofporcine circovirustype 2（PCV2） in the Romanian wild boar population.Res Vet Sci，2011 Mar 30.[Epub ahead of print]

从重叠肽库鉴定宿主细胞连接肽抑制典型猪瘟病毒感染

CSFV的病毒囊膜蛋白调节CSFV和细胞表面分子结合，允许CSFV随后进入宿主细胞。然而，与宿主细胞结合的蛋白和他们的结合序列是未知的。结果显示蛋白E1、E2 and Erns在T7噬菌体表面展示。E2和Erns噬菌体克隆和宿主细胞具有高度亲和性,E2噬菌体克隆和其他细胞相比与宿主细胞具有更特定的相互作用，而Erns噬菌体克隆可与所有的受试细胞相互作用。

构建一个30碱基噬菌体展示肽库并且通过固定的宿主细胞进行筛选，每个肽重叠到另一个肽10aa， 跨越所有Erns和E2氨基酸序列。58个和宿主细胞有特异连接的噬菌体克隆被分离出来。分析了2个噬菌体克隆 （P2和P6）最强的结合蛋白分别在 Erns 101～130 （S2） 和 E2 的 141～170（S6）。合成肽 （S2和S6）可以抑制宿主细胞和 （P2和P6）噬菌体克隆的结合，也可以抑制猪瘟病毒和宿主细胞的结合。使用55 μM的合成蛋白S2和S6，可以分别达到抑制约86.74%和74.24%CSFV感染。这个结果表明猪瘟病毒的S2（LAEGPPVKECAVTCRYDKDADINVVTQARN）和S6（AVSPTTLRTEVVKTFRRDKPFPHRMDCVTT）蛋白是宿主细胞结合肽，而且他们具有研究CSFV进入宿主细胞机制的价值。

译自：Li X,Wang L,Zhao D,Zhang G,et al.Identification of host cell binding peptide from an overlapping peptide library forinhibition ofclassicalswine fevervirusinfection.Virus Genes， 2011 Mar 13.[Epub ahead of print]

北美猪繁殖与呼吸衰竭综合征病毒通过对浆细胞样树突细胞作用抑制一型干扰素产生

虽然囊膜病毒一般通过刺激浆细胞样树突细胞 （pDC）引起一型干扰素 （IFN-α）大量分泌，猪的pDC感染了猪繁殖与呼吸衰竭综合征病毒 （PRRSV）后仍然处于静止状态。这种静止状态很可能是由于病毒-介导干扰的结果，纯化的或者是未分选的猪pDC在猪传染性胃肠炎病毒TGEV或者TLR9受体激动剂、寡核苷酸 （ODN）D19的刺激下产生典型IFN-α反应，诱导免疫应答，当PRRSV存在时反应降低。

病毒的生存和pDC早期内涵体酸化导致反应性降低，抑制细胞反应性与IFN-αmRNA的减少呈正相关。反应性降低是由于转录废除而导致的必要干扰素调节因子7的数量下降。细胞基因表达转而被抑制是由于核本地信号转导与转录激活子-1 （STAT1）减少的结果。

PRRSV也能通过某些作用抑制肿瘤坏死因子alpha（TNF-α）在pDC合成，发现只有ODN D19促进IL-2和IL-6产生受到抑制。此外，PRRSV并不影响TGEV促进IL-8生成的特异性表达。而且扩大的NF-κB磷酸化作用在有活性的pDC中可以观察到，并不局限于不受PRRSV感染的细胞，而是发生在PRRSV与pDC作用过程中。

证明一个观点pDC感染PRRSV，这种病毒可能与细胞表面蛋白作用有选择地阻碍了受激pDC参与细胞因子产生的级联完成。

译自：Gabriela Calzada-Nova,William M.Schnitzlein,Robert J.Husmann,Federico A.Zuckermann.North American Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Viruses Inhibit Type I Interferon Production by Plasmacytoid Dendritic Cells.Journal of Virology,2011,85 （6）， 2703-2713.