粪便转铁蛋白检测在提高消化道出血检出率中的作用

【作者】吴飞

上海长征医院，上海，200003

粪便隐血试验是临床上诊断消化道出血的常测指标。已知的化学法易出现假阳性结果，是因为易受饮食和药物的影响。胶体金法与化学法相比，灵敏度、特异性都有了很大的提高，在临床上已得到广泛应用，但由于Hb易受胃内各种消化酶的作用和肠道内的细菌分解的作用而变性，减弱免疫反应故结果易出现假阴性。同时测定Hb与Tf，使消化道出血性疾病的阳性检出率有明显的提高[1]。为了探讨Hb与Tf联合检测在临床上的应用价值，我们选择了本院2011-01-01至2011-06-30消化内科住院病人，临床怀疑消化道出血(包括胃、肠的溃疡、出血、钩虫病、恶性肿瘤、息肉等)，分别用三种方法对送检的600例粪便标本进行了隐血检测。

1 资料与方法

1.1 标本

来自2011-01-01至2011-06-30本院消化内科住院病人，临床怀疑消化道出血，送检便隐血标本600例。

1.2 器材

(1)大便潜血(OB)半定量测试卡(化学法)，生产厂家珠海贝索生物技术公司。(2)大便隐血诊断试剂(单克隆抗体胶体金法)，生产厂家艾康生物技术(杭州)有限公司。(3)转铁蛋白胶体金诊断试纸(单克隆抗体胶体金法)，生产厂家万华普曼生物工程有限公司。

1.3 方法

化学法检测Hb，利用血红蛋白中含铁血黄素催化H2O2释放新生态氧，氧化色原物质匹拉米洞，产生紫蓝-紫红的颜色，据此判断结果。胶体金法检测Hb，采用胶体金双抗体夹心法。转铁蛋白法检测Tf，采用胶体金免疫夹心法。所有标本均使用三种试剂检测，5分钟内判读结果。三种检测方法一种为阳性则判断为阳性，三种检测方法均为阴性则判断为阴性。

2 结果

2.1 三种方法检测总例数600例，阳性366例，阴性234例。

2.2 化学法阳性结果共179例，占总数600例的29.8%，占阳性366例的48.9%。

2.3 胶体金法阳性结果共198例，占总例数的33.0%，占阳性366例的54.1%。 转铁蛋白法阳性结果共246例，占总例数600例的41.0%，占阳性366例的67.2%。免疫双联法阳性结果共324例，占总例数600例的54.0%，占阳性366例的88.5%（表1）。

表1 不同检测方法便隐血检测结果分析Tab.1 Results analysis for different detection method of excrement occult blood

2.3.1 胶体金法检测Hb结果分析

灵敏度＝198/324×100%＝61.1%，假阴性率＝126/324×100%＝38.9%，特异性＝234/234×100%＝100%（表2）。

表2 胶体金法试验结果Tab.2 Detection result of colloidal gold method

2.3.2 转铁蛋白法检测Tf结果分析

灵敏度＝246/324×100%＝75.9%，假阴性率＝78/324×100%＝24.1%，特异性＝234/234×100%＝100%（表3）。

表3 转铁蛋白法试验结果Tab.3 Detection result of transferrin method

2.4 对于上、下消化道出血（经胃镜检查证实）的阳性检出率

2.4.1 上消化道出血：化学法阳性94例，占57.3% ；胶体金法阳性99例，占60.4%；转铁蛋白法阳性135例，占82.3%；免疫双联法任一种为阳性149例，占90.8%。

2.4.2 下消化道出血：化学法阳性56例，占44.8%；胶体金法阳性97例，占77.6%；转铁蛋白法阳性83例，占66.4%；免疫双联法任一种为阳性122例，占97.6%。

表4 上、下消化道出血阳性检出率结果Tab.4 Positive detection rate of upper and lower gastrointestinal hemorrhage

3 讨论

化学法在消化道出血患者中的检出率略低于胶体金法和转铁蛋白法，因为血红蛋白化学法的检测下限在0.5 μg/ml以上，而胶体金法的检测下限是大于或等于0.2 μg/ml，转铁蛋白法的检测下限仅仅是大于或等于10 ng/ml。而且，当患者进食入动物性肉、血、肝脏和VitC、铁剂、中药、富含叶绿素的食物等干扰物时，化学法易出现假阳性结果[1-2]。目前胶体金法和转铁蛋白法只是定性检测，仅能给出阳性或阴性结果，很难进行定量测定，甚至不能报告强阳性、弱阳性或几个加号(+1，+2，+3，+4)，故而不能对消化道出血病人进行疗效观察[2-3]，因此观察止血程度欠佳，而化学法可根据反应时间和颜色深浅报告强阳性、弱阳性或几个加号，大致估计出血量，适合对临床的正确引导。表1结果显示，转铁蛋白法的敏感性高于胶体金法，这是由于在血液中Hb和Tf的比值为51.2/1，而粪便中Hb和Tf的比值为5.4/1，血红蛋白在胃肠内受到消化酶和细菌的作用易变性，转铁蛋白在肠道内有抗菌能力强，性质比较稳定的特点。联合检测血红蛋白和转铁蛋白时发现阳性率明显提高，为54.0%，说明在检测上消化道出血时有一部分病例隐血，用单克隆法不能测出Hb，以致出现了假阴性。此原因可能有三：①过量大出血而致反应体系中抗原过剩出现前带现象；②上消化道出血后，血红蛋白或红细胞经过消化后已不具有原来的免疫原性，抗原性发生改变；③部分病人血红蛋白与单克隆抗体不匹配而致假阴性[3-5]。用转铁蛋白法检测也出现了假阴性，原因可能是出血很少，转铁蛋白法检测法达不到它的检测下限[5-6]，因此出现假阴性结果。

在上消化道出血病例中，Tf测定阳性率高于Hb测定阳性率，是由于Hb在消化道中受肠内细菌和消化酶的作用而变性，导致其抗原性降低，由于体液中的Hb成分阻碍抗原抗体反应，而出现假阴性结果，大量出血而致反应体系中抗原过剩而出现后带现象[6-7]。在下消化道出血病例中，Hb测定阳性率高于Tf测定阳性率，可以看出在下消化道出血病例中Tf不如Hb敏感，这是因为约有10%的病例出现Tf值较低的现象。已知遗传性无转铁蛋白血症，各种恶性疾病、炎症为主的多种疾病均可导致Tf值低下，使其出现假阴性结果[8-9]。但联合检测Hb和Tf发现阳性率明显提高，能够起到优势互补的作用，减少假阴性，提高上下消化道阳性结果的检出率。当Hb法受到干扰时，将Tf法作为补充检测手段，是判断是否存在消化道出血最有价值的方法。从表4中还可看出，在下消化道出血患者中，转铁蛋白法检出阳性率仍较胶体金法低，这是因为约有10%的病例出现转铁蛋白值较低的现象[10]。已知遗传性无转铁蛋白血症，各种恶性疾病，炎症为主的多种疾病(如手术、创伤、心肌梗死、感染等)均可导致转铁蛋白值低下（Tf为负性急性时相反应蛋白[10-11]，只有大肠癌患者的粪便中会出现大量的Tf），因此在这些情况下，转铁蛋白法检测结果为阴性。联合检测Hb和Tf 发现阳性率为97.8%，这可能是由于有一部分消化道大量出血的病例，胶体金法测定隐血很容易出现前带现象，造成假阴性，而通过Tf测定可以将这部分假阴性结果检出，起到弥补作用，提高检出率。

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