自动化分析仪检测NSTE-ACS患者血清BNP与sST2水平变化分析

高建华 林凌云 邹文蓉 文洪林*

近年来，大量临床研究结果使人们对非ST段抬高急性冠状动脉综合征(non-ST elevation acute coronary syndrome,NSTE-ACS)的诊断与治疗策略有所改变。国外研究表明，血清B型钠尿肽(B-type natriuretic peptides,BNP)在不同类型的ACS患者中均可升高，并且可以作为ACS患者预后的标记物[1]。而与BNP同属心肌细胞牵张相关标志物的血清可溶性ST2(sST2)可由心脏成纤维细胞和心肌细胞表达，是生物机械应力诱导产生的一种心肌蛋白，对心血管事件也具有一定的的预测价值。本研究采用病例对照研究的方法对临床不同类型的NSTE-ACS患者及正常对照进行对比研究，旨在探讨NSTE-ACS患者中血清BNP和sST2的水平变化情况及二者的相关性。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选择2008年4月至2011年4月因24 h内出现胸痛，初始心电图表现为非ST段抬高，被诊断为ACS的患者233例，患者分别来自北京世纪坛医院、北京中医医院、北京积水潭医院。按冠脉造影结果及临床诊断将患者分为急性非ST段抬高性心肌梗死(non-ST-elevation myocardial infarction,NSTEMI)组139例，其中男性87例，女性52例，平均年龄为(64.3±16.1)岁；不稳定性心绞痛组(UA)94例，其中男性57例，女性27例，平均年龄为(59.8±11.6)岁。对照组30名，均为正常体检者，其中男性15名，女性15名，平均年龄为(47.6±11.4)岁。各组间在性别、年龄之间差异均无统计学意义(P＞0.05)。

排除标准：所有患者留取标本时均排除有扩张型心肌病病史或其他导致容量负荷增加的疾病，如肺栓塞、风湿性心脏病、成人呼吸窘迫综合症、急性或慢性肾功能不全、肾衰竭、肝硬化、原发性醛固酮增多症、Cushing’s综合症、甲状腺机能亢进等症。排除急性感染、活动性结核、近期发生脑血管事件、严重肝功能异常、严重甲状腺功能异常、恶性肿瘤、自身免疫性疾病等以及24 h内死亡患者。

1.2 方法

1.2.1 标本采集

ACS患者取入院即刻(发病24 h内)肘静脉血5 ml，对照组采集清晨空腹平卧位肘静脉血5 ml，分别注入一次性真空采血管，使用安新县白洋离心机厂B320A型医用低速离心机3000 r/min、15 min离心分离血清后冰箱冷冻(-80 ℃)保存。

1.2.2 血清BNP、sST2水平测定

使用雅培AXSYM全自动发光分析仪进行BNP的定量检测，采用微粒子捕捉酶促免疫发光分析技术(MEIA)测定；使用雅培配套专用试剂，测定严格按操作规程要求进行。使用MBL公司酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒测定血清sST2水平，采用美国Biorad公司EVOLIS全自动酶标仪进行比色分析，在450 nm波长处测定样本的光密度值(D)，具体步骤严格按照说明书进行。以标准品浓度为横坐标，D值为纵坐标，计算标准曲线并将待测样本的D值转化为浓度值。

1.2.3 统计学方法

所有数据经SPSS 13.0统计软件分析。计量资料以x±s表示，不符合正态分布的计量资料经转换为自然对数后进行组间比较和相关分析。采用单因素方差分析进行组间比较和变化趋势分析，Pearson相关分析进行相关性检验。以P＜0.05为差异显著有统计学意义。

2 结果

2.1 各组BNP和sST2水平的比较

NSTEMI组和UA组，其BNP水平分别为(296.7±111.5) pg/ml和(92.7±68.3) pg/ml，对照组BNP水平为(16.9±9.7) pg/ml。sST2水平分别为(1.35±0.53) ng/ml和(0.83±0.22) ng/ml，对照组sST2水平为(0.65±0.27) ng/ml。NSTE-ACS患者BNP和sST2水平均显著高于对照组，其中NSTEMI组血浆BNP和sST2水平高于UA组(P<0.05)及对照组(P<0.01，P<0.05)，UA组高于对照组(P<0.01)，见表1。

表1 不同类型冠心病患者血浆BNP和sST2水平比较

表1 不同类型冠心病患者血浆BNP和sST2水平比较

注：#为与对照组P＜0.01；*为与对照组比较P＜0.05；△为与UA组比较P＜0.05。

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2.2 患者血清BNP和sST2水平相关分析

对NSTE-ACS患者(n=233)血清BNP和sST2相关分析显示，BNP与sST2呈显著正相关(r=0.722，P<0.01)。

3 讨论

急性冠脉综合征(ACS)为冠心病急性发病的临床表现，其发病机制主要是因为斑块破裂、脱落继发血栓形成，临床类型包括ST段抬高急性心肌梗死(STEMI)、NSTEMI和UA，后两者常被称为NSTE-ACS。其冠状动脉病变的严重程度和发生急性“血栓形成”的风险即进展为心肌梗死的风险程度并不相同，因此对于明确诊断为ACS的患者，必须早期采用精确可靠、快速、简单而且低成本的指标进行风险评定，有助于迅速为患者选择恰当的干预策略。通常根据患者危险分层而制定治疗策略，分层有两个标准，即ST段压低程度和肌钙蛋白。本世纪以来，大量随机临床研究结果改变了临床上对NSTE-ACS的诊断与治疗策略。

BNP是主要由心室肌细胞分泌的一种神经激素，主要在心室出现容量扩张和压力负荷时分泌，具有利尿、利钠、扩张血管等作用。近年来，BNP在不同类型冠心病患者中的特征及预后价值已逐渐受到重视[2]，BNP在心力衰竭患者中的诊断和预后价值已经得到确认。BNP在心血管疾病中是一很有价值的标志物，有助于非ST段抬高的ACS患者的进行早期危险分层，指导临床制定治疗方案[3]。当发生急性冠脉阻塞和持续性心肌缺血时，心室肌也可释放BNP[4]。BNP升高的时间早于肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌钙蛋白(TnI)，对于早期(胸痛发作5 h内)筛查NSTEMI患者有帮助，即对于ST段不抬高、尚不在心肌坏死指标CK-MB和TnI诊断窗口的胸痛患者，如BNP显著升高，则提示有心肌梗死发生的可能，需要对其进行更严密的监测，继续观察CK-MB的改变。BNP主要作为心肌梗死(AMI)亚急性时相预测患者再发生心梗及远期病死率的心脏标志物，而与其他标志物联合应用到临床，可能会增强临床诊断的可靠性。

ST2基因是白介素-1受体家族成员之一，1989年由Tominaga等[4]首先在BALB/c-3T3细胞系中得到,该基因表达两种蛋白产物:一种带有跨膜结构,称为跨模型ST2(ST2L),一种可以分泌到细胞外,称为分泌型ST2(即sST2)。研究发现ST2可由心脏成纤维细胞和心肌细胞表达，是生物机械应力诱导产生的一种心肌蛋白[5]。小鼠皮肤组织受到紫外线照射或前炎症细胞因子如肿瘤坏死因子、IL-1α和IL-lβ刺激后即可表达sST2。在各种与Th2细胞介导的疾病或炎症状态中，血清sST2水平升高。有研究报道[6]，sST2的分泌可能反映炎症信号，通过直接作用于巨噬细胞来调节炎症反应。

本研究中，NSTE-ACS各组患者BNP和sST2水平均高于对照组，并且NSTEMI组患者高于UA组患者，提示BNP和sST2参与了冠心病的发生发展过程并且是冠心病临床危险分层的较好标记物。结果显示，NSTEMI组和UA组患者的BNP水平和sST2水平显示正相关，可能的解释是sST2可与巨噬细胞结合，下调血清前炎症细胞因子IL-1，IL-6，TNF-α的分泌表达，sST2水平越高，冠状动脉粥样硬化程度越重，心肌细胞缺血和损伤就越重，由于心肌坏死引起心室功能障碍和心室重构，进一步影响了室壁张力而分泌更多的BNP。

4 结语

NSTE-ACS患者血清BNP和sST2均能在一定程度上独立预测心功能不全及其严重程度，两者的联合检测更有助于及时地识别不同类型的ACS，准确地评估患者病情及制定适合的治疗方案，并且可作为评价其预后的指标。

[1]李胜远,姜青龙.B型钠尿肽(BNP)全新的心脏标志物检测项目[J].江西医学检验,2005,23(4):355-356.

[2]张强,梁凤焱,杨玉香,等.B-型钠尿肽系列测定判定急性冠脉综合征患者预后的价值[J].中国心血管病研究杂志,2008,6(4):261-263.

[3]Weber M，Bazzino O，Navarro Estrada JL，et al.N-Terminal B-type natriuretic peptide assessment provides incremental prognostic information in patients with acute coronary syndromes and normal troponin T values upon admission[J]. J Am Coll Cardiol,2008,51(12):1188-1195.

[4]Tominaga S. A putative protein of a growth specific cDNA from BALB/c-3T3 cells is highly similar to the extracellular portion of mouse interleukin 1 receptor[J]. FEBS Lett,1989,258(2):301-304.

[5]Sanada S, Hakuno D, Higgins LJ, et al. IL-33 and ST2 comprise a critical biomechanically induced and cardioprotective signaling system[J].J Clin Invest,2007,117(6):1538-1549.

[6]Sweet MJ, Leung BP, Kang D, et al. A novel pathway regulating lipopolysaccharideinduced shock by ST2/T1 via inhibition of Toll-like receptor 4 expression[J].J Immunol,2001,166(11):6633-6639.