鹿瓜复生胶囊抗股骨头无菌性坏死的药效学研究

赵五申，孙文格，霍文发

(1.河北省邢台市中医医院，河北 邢台 054001;2.河北省石家庄市中医院，河北 石家庄 050051;3.河北省石家庄霍文发中医骨伤医院，河北 石家庄 050000)

股骨头无菌性坏死发病率、致残率日渐增高，寻找特效药和确切的治疗方法是当前医学界极为关注的课题。国内外专家均主张早期坏死采取姑息手术，晚期不可避免地行人工关节置换术。但总体而言，手术疗法的痛苦大、费用高、恢复期长、局限性广、远期效果不能尽善尽美，因此很多患者难以接受。鹿瓜复生胶囊以阳和汤为基础加减而得，在临床上应用多年，疗效确切，已研究开发成医院制剂。笔者对鹿瓜复生胶囊抗股骨头无菌性坏死的临床作用进行了药效学研究，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 试验材料

生物显微镜(日本Olympus Corporation)。鹿瓜复生胶囊(石家庄霍文发中医骨伤医院提供，批号为20071120，规格为0.35 g/粒);仙灵骨葆胶囊(贵州同济堂制药股份有限公司，批号为071116，规格为0.5 g/粒);胆固醇试剂盒、甘油三酯试剂盒均为中生北控生物科技股份有限公司产品;内毒素(Sigma公司);注射用甲泼尼龙琥珀酸钠(Pfizer Manufacturing Belgium NV，批号为R03321，规格为40 mg)。SD大鼠(清洁级)，雄性，体重180～200 g，动物合格证号为808080，动物饲料为消毒饲料，垫料为消毒垫料，均由河北省实验动物中心提供;动物室环境温度为20～23℃，相对湿度45% ～60%;笼具用过氧乙酸溶液消毒;实验动物使用许可证号为SYXK(冀)2006-0047。

1.2 试验方法[1]

将大鼠随机均分为6组，每组8只，分别设为正常对照组、模型对照组和鹿瓜复生胶囊小剂量组(0.25 g/kg，相当于临床用药量的3.5倍)、中剂量组(0.5 g/kg，相当于临床用药量的7倍)、大剂量组(1.0 g/kg，相当于临床用药量的14倍)以及仙灵骨葆胶囊组(0.7 g/kg，相当于临床用药量的14倍)。除正常对照组外，其余各组大鼠均舌下静脉注射内毒素1次，剂量为10 μg/kg，然后分别于24，48，72 h时肌肉注射甲泼尼龙琥珀酸钠各1次，剂量为20 mg/kg，共3次。同时各给药组开始灌胃给药，每日1次，连续6周，剂量为10 mL/kg，正常对照组和模型对照组给予等量纯净水。试验期间除正常对照组外，其余各组大鼠均采用饮水瓶悬吊，使动物下肢直立饮水。末次给药30 min后将动物麻醉，腹主动脉取血，分离血清，检测总胆固醇和甘油三酯含量;剖取右侧股骨头，置10%甲醛溶液中固定，常规制成HE染色脱钙骨切片，光镜观察。骨细胞坏死病理变化以空骨陷窝百分数表示，即在100倍放大倍率下，任选20个高倍镜视野，每个视野读数50个骨陷窝，分别计数空骨陷窝数，计算空骨陷窝所占百分数。数据以±s表示，应用SPSS 12.0统计软件，采用 t检验比较各组间差异情况。

2 结果

2.1 病理组织学检查[2]

光镜观察可见正常对照组大鼠股骨头组织结构正常，骨小梁未见断裂、变细，偶见骨陷窝空虚;模型对照组大鼠股骨头组织结构紊乱，部分有骨小梁断裂、变细、稀疏现象，髓腔脂肪细胞明显增多增大，空骨陷窝数明显增多(P＜0.01);鹿瓜复生胶囊各剂量组大鼠股骨头组织结构较模型对照组改善，髓腔脂肪细胞均较少较小，骨小梁稀疏但未见断裂，空骨陷窝数均较模型对照组减少(P＜0.05或 P＜0.01)。结果见表1。

表1 鹿瓜复生胶囊对股骨头坏死大鼠空骨陷窝数的影响(±s)

表1 鹿瓜复生胶囊对股骨头坏死大鼠空骨陷窝数的影响(±s)

注:与模型对照组比较，＊P ＜0.05，#P ＜0.01(下表同)。

组别正常对照组模型对照组鹿瓜复生胶囊 小剂量组中剂量组大剂量组仙灵骨葆胶囊组剂量(g/kg)——0.25 0.5 1.0 0.7空骨陷窝数(%)9.2±2.82#27.2±6.67 21.0±5.34＊21.4±3.50＊18.9±4.70#16.5±4.87#

2.2 对股骨头坏死大鼠总胆固醇和甘油三酯的影响

模型对照组大鼠血清总胆固醇和甘油三酯水平均较正常对照组明显升高(P＜0.01);鹿瓜复生胶囊各剂量组大鼠血清总胆固醇和甘油三酯水平均较模型对照组明显降低(P＜0.05或 P＜0.01)。结果见表2。

表2 鹿瓜复生胶囊对股骨头坏死大鼠总胆固醇和甘油三酯的影响(±s)

表2 鹿瓜复生胶囊对股骨头坏死大鼠总胆固醇和甘油三酯的影响(±s)

组别正常对照组模型对照组鹿瓜复生胶囊 小剂量组中剂量组大剂量组仙灵骨葆胶囊组剂量(g/kg)——0.25 0.5 1.0 0.7总胆固醇(mmol/L)1.92±0.33#2.86±0.60 2.40±0.82 2.19±0.64＊2.11±0.46＊2.07±0.48#甘油三酯(mmol/L)0.69±0.11#1.42±0.40 1.06±0.18＊0.81±0.19#0.84±0.13＊0.82±0.20#

3 讨论

鹿瓜复生胶囊主要由熟地黄、续断、鹿角胶、骨碎补(烫)、芥子、肉桂、木瓜、丹参、当归、甘草等组成，临床用于精血不足、筋骨损伤、瘀血阻络之“骨蚀”所致髋部疼痛、活动后加重、跛行、活动受限、下肢无力、肌肉萎缩等，即西医诊断的股骨头无菌性坏死。本研究表明，鹿瓜复生胶囊可降低股骨头缺血坏死大鼠股骨头空骨陷窝数，改善股骨头显微结构，并对其脂代谢紊乱有调节作用，在一定剂量范围内，随着剂量增大，作用增强。该药效学结果与临床疗效基本吻合，并为临床用药提供了一定的药理学依据。

[1]李仪奎.中药药理实验方法学[M].上海:上海科学技术出版社，1991:300-302，353-355.

[2]李 鸿，贾丙申.激素合并内毒素诱导大鼠股骨头坏死扫描电镜观察[J].中国比较医学杂志，2007，17(5):256-258.