康儿灵颗粒中紫丁香苷的测定

李作堂

（哈药集团三精制药诺捷有限责任公司，黑龙江 绥化 152000）

康儿灵颗粒由刺五加、白术(炒)、莲子、六神曲(炒)、茯苓、麦芽(炒)、陈皮、枳壳(炒)、山楂(炒焦)、甘草(炙)、胡黄连、使君子组成，在临床上具有益气健脾，开胃消食。用于脾胃虚弱，食欲不振，消化不良，形体瘦弱。该质量标准为卫生部药品标准，标准中无含量测定项，为了有效控制产品质量，我们拟对处方中的君药进行含量测定，从而确保产品在临床上的有效性。

1 材料

高效液相色谱仪：LC-10ATVP，日本导津制作所。

工作站：浙大2000。

甲醇：色谱纯。

水：二次蒸馏水。

康儿灵颗粒：哈药集团三精诺捷制药有限公司；批号：060801、060802、060803

紫丁香苷：中国生物制品检定所提供，批号：111574-200201

2 方法

2.1 色谱分析条件：

色谱柱：C18柱（250mm×6mm，5um）；

流动相：甲醇-水（用冰醋酸调pH值为3.0）（20：80）

流速：1.0ml/min

检测波长：267nm

2.2 对照品溶液制备：取紫丁香苷适量，加甲醇溶解并定量稀释成每1ml中含80ug的溶液。

2.3 检测波长的确定：取紫丁香苷对照品溶液适量，在190～400nm波长范围内进行扫描结果对照品溶液在267nm波长处有最大吸收，因此确定检测波长为267nm。

2.4 供试品溶液的制备：取样品研细，称取适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，超声处理（功率250W，频率33kHz）30 分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.5 专属性实验：分别精密吸取上述供试品溶液、对照品溶液、阴性样品溶液各20ul，在确定的色谱条件下，注入液相色谱仪中，记录色谱图，结果见附图 1～3。

结果：样品中干扰紫丁香苷测定的峰与紫丁香苷峰分离度良好，不干扰测定。

2.6 线性关系的考察：精密吸取上述对照品液 0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL 于 lOmL 量瓶中，加甲醇稀至刻度，按上述色谱条件，分别进样20ul，测定其峰面积，并以峰面积A对对照品浓度作图，其回归方程为：A=5770.1×C+27401.3，r=0.9996。

结果表明，紫丁香苷在4～20μg范围内呈良好的线性关系。

2.7 重复性试验：取同一批供试品，分别照上述供试品溶液制备方法制备6份，测得其含量的平均值为标示量的4.82μg/g，SD为1.2%。

2.8 加样回收率试验：精密称取已知含量的供试品颗粒剂适量(约相当于紫丁香苷12μg/g)9份，分别置25m L量瓶 中，分别精密加入对照品储备液（80ug/ml）0.1、0.15、.0.21mL 各 3 份，按拟定的色谱条件进行测定，计算回收率，平均回收率为98.6%，RDS为1.3%。

2.9 稳定性试验：精密吸取同一浓度供试品溶液于 0、2、4、8、24小时进样测定，计算日内误差；于第二天进样测定，计算日间误差。结果表明：样品稳定性良好。峰面积基本稳定。日内测得结果的RDS为1.4%，日间测得结果的RSD为1.5%。

2.10 样品测定：取3批制剂 (批号：060801，060802，060803) 按“2.4”项制备成供试品溶液，分别精密量取供试品液和对照品液(8ug/ml)各20进样，记录色谱图，测量对照品和样品的峰面积，按外标峰面积计算含量，3批样品的含量见表1。

表1 三批样品测得结果

3 讨论：

3.1 色谱条件确定：我们先用流动相甲醇-水-冰醋酸（15：85：1.5）进行测定，结果紫丁香苷对照品峰的前沿峰较大，峰形不好，我们又对其流动相进行了调整，调整为：甲醇-水（用冰醋酸调 pH 值为 3.0）（20：80）

3.2 供试品溶液制备筛选：对提取溶剂的筛选：在供试品的配制过程中，提取工艺是重要的一个环节，紫丁香苷属于极性成分，溶于水及甲醇或乙醇，根据提取工艺可知经过了水提醇沉，所以采用溶剂为不同浓度的甲醇进行提取溶剂的筛选。结果用甲醇提取收率最高，因此确定提取溶剂为甲醇。

[1]康儿灵颗粒质量标准