单纯电针刺激对大鼠行为的影响

王 泳,马素英

(1.新乡医学院实验动物中心;2.新乡医学院药学院,河南新乡 453003)

电针刺激在我国中医早已广泛应用于疼痛治疗,但其镇痛机制尚未完全明了。本实验采用动物行为学方法,观察单纯电针刺激对大鼠行为学的影响,以探讨电针刺激在镇痛方面可能的机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物 健康成年Wistar大鼠48只,雌雄不拘。

1.2 分组 将48只Wistar大鼠随机分成4组,每组 12只。正常组不做任何处理;疼痛刺激组在大鼠右侧后脚掌注射福尔马林 200μl致痛,置于笼内,饮食活动自由;电针刺激组用针灸治疗仪刺激大鼠右侧后肢足三里穴(电针强度3 V,频率8 Hz)持续

0.5 h;疼痛加电针刺激组是将动物疼痛刺激后再给予电针刺激。

1.3 自发痛反应监测 于实验前5 d,每日将大鼠置于实验观察箱中30 min使之适应。实验时,右后脚掌皮下注射福尔马林和(或)用针灸治疗仪刺激大鼠右侧后肢“足三里穴”后迅速将大鼠放回实验观察箱内,计数注射后10 min内及60 min内大鼠注射掌缩足反射次数。

1.4 统计学处理 应用SPSS 6.12统计软件处理,各组结果以均数±标准差(±s)表示,各组间比较采用单因素方差分析,组与组之间的两两比较采用q检验,方差不齐时采用秩和检验,检验水准 α= 0.05。

2 结果

疼痛刺激后,第一相、第二相缩足反射次数均较正常组明显增多(P＜0.01);单纯电针刺激后,第一相、第二相缩足反射次数与正常组相比无明显变化(P＞0.05),疼痛加电针刺激组,与正常组相比,第一相缩足反射次数明显增多(P＜0.01),而第二相缩足反射次数无明显变化(P＞0.05),与疼痛刺激组相比,第一相缩足反射次数无明显变化(P＞0.05),第二相缩足反射次数明显减少(P＜0.01)。

表1 各组第一相、第二相缩足反射次数比较(±s,n=12)

表1 各组第一相、第二相缩足反射次数比较(±s,n=12)

注:与正常组比较,1)P＜0.01;与疼痛刺激组比较,2)P＜0.01。

组别 0～10分(次/5m in) 10～60分(次/5min)正常组 5.12±0.34 4.02±1.32疼痛刺激组 15.45±0.561) 17.11±0.861)电针刺激组 14.80±0.661) 6.34±0.622)疼痛加电针刺激组 14.80±0.661) 6.34±0.622)

3 讨论

福尔马林刺激后,第一相、第二相缩足反射次数均较正常组明显增多。炎性痛时,脊髓后角 N0生成增多是多因素综合作用的结果。外周伤害性信息的传入,引起初级神经元纤维末梢释放兴奋性氨基酸等神经递质,这些递质与脊髓神经元胞膜上相应受体结合,通过不同途径激活胞内信使分子,促进NOS表达及 N0的产生[1-3]。

单纯电针刺激后,第一相、第二相缩足反射次数及阳性细胞数与正常组相比无明显变化,表明单纯电针刺激对自发性痛反应及 N0的产生均无影响。

疼痛加电针刺激后,与正常组相比,第一相缩足反射次数明显增多,而第二相缩足反射次数及阳性细胞数均无明显变化:与疼痛刺激组相比,第一相缩足反射次数无明显变化,第二相缩足反射次数及阳性细胞数均明显减少。表明本实验中电针刺激可以抑制NOS活性和福尔马林第二相反应,对第一相反应无明显影响。大量研究证实[4],低频电针可激活脑啡肽、内啡肽和吗啡肽,作用于 μ和 δ阿片受体而产生镇痛。由于神经元内 NOS的激活需兴奋性氨基酸等递质激活NMDA受体引起细胞内钙离子浓度增加,因此推测电针通过释放脑啡肽、内啡肽和内吗啡肽等内源性阿片肽,一方面抑制传入神经末梢谷氨酸、P物质的释放,影响NMDA受体的激活,另一方面与神经元上阿片受体结合,抑制钙通道活性,影响钙离子内流,使细胞内 NOS不能被激活。我们的实验证实了电针发挥镇痛作用,但其确切机制尚待进一步研究。

[1] 孙晓彩,李文斌,李淑琴,等.鞘内注射神经激肽-1受体激动剂Sar-SP增强大鼠脊髓一氧化氮合酶表达和一氧化氮生成[J].生理学报,2003,55(6):677-683.

[2] 李桐楠,李清君,李文斌,等.CGRP8-37对甲醛炎性大鼠自发痛反应及脊髓后角NOS表达和NO含量的影响[J].中国应用生理学杂志,2004,20(3):291-295.

[3] 曾静波,李文斌,李清君,等.MK-801降低炎性痛大鼠脊髓NOS表达和NO含量[J].生理学报,2001,53(1):55-60.

[4] Fei H,Sun SI,Han JS.Evidence supporting differential release of dynorphin and enkephalin in the spinal cord by high and low electro-acupuncture in rats[J].Science Bull(Beijing),1998,34:703 -705.