用BED－CEIA方法估算2010年云南省玉溪市MSM人群HIV-1感染

高良敏，陈 良，赵金仙，鲁建波，马 懿,李连学,郭春园，李孝安

（1.玉溪市疾病预防控制中心，云南 玉溪 653100；2.红塔区疾病预防控制中心，云南 玉溪 653100）

自Janssen等于1998年报道了采用实验室血清学方法检测艾滋病病毒(HIV)新近感染，进而估算发病率以来，实验室方法检测新近感染估算HIV发病率就受到越来越多的关注[1]。HIV-1 BED捕获酶免疫测定法（简称BED-CEIA）是目前应用最为广泛最成功的识别HIV新发感染实验室监测方法，并成为其它新近感染检测方法评价的重要参照[2～4]。2010年在云南省疾病预防控制中心性艾中心实验室的支持下，应用BED-CEIA方法在玉溪市MSM人群(Men who sex with men，MSM)艾滋病监测哨点中开展 HIV-1新近感染检测，旨在初步了解 MSM人群HIV-1的感染及对BED-CEIA方法的扩展应用进行初步探讨。现将结果报告如下：

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 研究对象

根据云南省MSM哨点监测方案要求，对在监测期内进入同一哨点的目标人群MSM人群采用连续抽样的方法开展行为学和血清学调查，HIV抗体初筛阳性者采用免疫印迹试验或HIV抗体替代策略确证，所有HIV-1抗体阳性标本送云南省疾控中心保存。

1.1.2 研究样本入选及排除标准[5]

入选标准如下：①根据《全国艾滋病检测技术规范》，标本诊断为HIV-1抗体阳性的血样（包括WB确认阳性和替代策略检测阳性）；②样品保存条件：保存在-20℃以下，冻融次数小于三次；③样品质量：要求清亮、无严重溶血；④没有交叉污染，个案信息准确。

排除标准如下：①已知长期感染的样本（通过姓名等个人信息，查阅既往的检测记录及艾滋病专报系统，确定是否为原阳性）；②所有已知HIV-1抗体阳性超过6个月的原阳性样本，所有艾滋病病人样品及接受抗病毒治疗感染者的样本，视为长期感染样本，不进行BED检测；③对有多份阳性样本的HIV新报告感染者，只将首份样品纳入新近感染检测；④所有CD4＜200的艾滋病病人样品（如有CD4细胞检测结果）。艾滋病病人及抗病毒治疗人员仍纳入HIV-1感染率指标的计算。

1.2 方法

1.2.1 检测试剂及结果判断[2]

使用Calypte HIV-1 BED新近感染检测试剂盒（Calypte Biomedical Corperation，美国，批号：BF2501），该检测分初筛检测及确认检测。初筛试验中样品为单份检测，其ODn值＞1.2时为长期感染，ODn值≤1.2时做确认检测，即三孔重复检测。确认试验中，若ODn值≤0.8时，该份样品认为是新近感染，可以指明平均血清阳转时间为155天；确认试验ODn值＞0.8时为长期感染。

1.2.2 质量控制

试验操作在云南省疾控中心艾滋病确证中心实验室进行。操作人员参加艾滋病新发感染的相关培训，实验室参加国家CDC及美国CDC组织的BED-capture EIA检测能力验证。严格按试剂盒说明书进行实验操作及结果判断，采用Excel录入数据和分析，包括检测人群总数、HIV-1抗体阳性人数、BED-CEIA检测人数和新近感染人数。

1.2.3 计算公式[6～7]

使用中国校正系数对所获得的 HIV-1数据进行校正，分别为：W＝155天，α=0.7682，β=0.7231，γ=0.9443，ε=0.0557。新近感染率估算公式：HIV-1年新近感染率=[(365/155)×HIV-1近期感染人数]/[HIV-1抗体阴性数+(365/155)×HIV-1近期感染人数]×100%。95%可信区间：95% CI=+/-1.96(I/SQRT R)。HIV感染率=监测人群中所有HIV-1抗体阳性人数/总监测人数。

2 结果

2.1 基本情况

监测的105例MSM人群中，平均年龄33.3±11.3岁；与异性婚姻状况中,未婚57例（占54.3%），已婚有配偶38例，占36.2%，离异或丧偶10例，占9.5%；文化程度为文盲者1例，占1.0%，小学18例，占17.1%，初中38例，占36.2%，高中及中专30例，占28.6%，大专及以上18例，占17.1%；民族为汉、彝、回、壮及其他族5个民族，以汉族居多（87例，占82.9%），彝族11例（占10.5%），回、壮各2例各占1.9%；有13个职业中，无业（20例，占19.04%）、服务行业（9例，占8.6%）、农民（12例，占11.4%）、医务人员（10例，占9.5%）居多，其余职业54例（占51.4%）。

2.2 HIV年新近感染情况

2010年玉溪市MSM哨点检测人数105人，13例HIV阳性，BED方法检测得出3例为HIV-1阳性，初步判断为新近感染。根据新近感染率估算公式[6～7]，计算得到2010年玉溪市 MSM人群 HIV-1年新近感染率为 6.67%（95%CI:2.07%～14.18%）。

3 讨论

近年来，国内对于BED-CEIA方法的研究主要集中于静脉注射吸毒人群[8～10]，很少应用于其他人群。胡海洋等[11]应用BED-CEIA方法对江苏省MSM人群HIV-1年新近感染率进行研究，估算得出的年新近感染率为 7.54%（95%CI:4.46%～10.62%）。本研究用同样方法对玉溪市MSM人群HIV-1年新近感染率估算的结果为6.67%（95%CI 2.07%～14.18%），略低于上述结果，但值得注意的是远远高于同样方法监测的吸毒人群、性病就诊者、孕产妇人群[8～10]，同样也远远高于2010年玉溪市用相同方法估算静脉注射吸毒人群的年新近感染率1.20%（95%CI:1.37%～2.55%）。可见，MSM人群HIV-1的感染较为严重，已经远远高于其他人群，加强监测干预时不可待。

在 MSM人群中开展类似研究除江苏省有报道外[8]，还未见更多关于MSM人群年新近感染的报道。本研究的局限性及建议如下：只为一年的监测结果，仅供横向比较，纵向比较MSM人群的感染趋势仍需进一步跟踪完善；BED-CEIA发病率的评估结果只适用于应用此方法对其进行研究的人群，对于更多人群的推断，必须有合法的辅助数据的支持才能进行[12],特此对于BED-CEIA在MSM人群中的应用还有待于探讨；无论是横断面血清学调查、病例为基础的HIV-1监测还是连续的代表性的研究都必须有充足的样本的数量以作出HIV-1发病率评估的正确结论[12]，而本研究样本数相对不足，可能会影响结果的稳定性。尽管本研究结果有诸多不足之处，但从结果粗略可见MSM人群HIV-1的感染较其他人群严重，加强干预、监测工作势在必行。特此，本结果仅供横向比较参考，不建议用于MSM人群新近感染趋势的评估。

（特别感谢云南省疾控中心艾滋病中心实验室的支持！）

[1]Janssen RS,Satten GA,Stramer SL,et a1.New testing strategy to detect early HIV 1 infection for use in incidence estimates and for clinical and prevention purposes[J].JAMA,1998.280:42-48.

[2]Parekh BS,Kennedy MS,Dobbs T,et al.Quantitative detection of increasing HIV type1 antibodies after seroconversion:a simple assay for detecting recent HIV infection and estimating incidence[J].AIDS Res Hum Retroviruses, 2002,18:295-307.

[3]Hargrove JW, Humphrey JH, Mutasa K, et al.Improved HIV-1 incidence estimates using the BED capture enzyme immunoassay[J].AIDS,2008,22(4):511-518.

[4]Westreich D,Pettifor A,Karuta E,et al. Over estimation of the South African HIV incidence using the BED IgG,assay[J].S Afr Med J,2007,97(7):476-478.

[5]CDC.HIV Incidence Surveillance : Estimating National and Local HIV Incidence Using a Population-based Serologic Method to Detect Recent HIV-1 Infection[R].March 30,2005.

[6]吕 繁,赵金扣,蒋 岩,等.BED HIV-1发病监测方法及其应用[J].中国艾滋性病,2006,12(2):179-181.

[7]田 飞,蒋 岩.BED-CEIA HIV-1发病捕获酶联法应用的现状和发展趋势[J].中国艾滋病性病,2007,13(6):582-584.

[8]梁 妹,魏东兵,曾亚莉,等.BED HIV-1发病捕获酶免疫测定法检测四川省2006年吸毒哨点HIV新发感染[J].中国艾滋病性病,2008,14(2):115-117.

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[10]杨 莉,马艳玲,罗红兵,等.云南省2000-2007年静脉吸毒者、性病就诊者和孕产妇HIV-1新近感染率及流行趋势变化[J].中华流行病学,2008,29(12):1204-1207.

[11]胡海洋,沈 圣,还锡萍,等.应用BED-CEIA方法估算江苏省男男性行为人群艾滋病病毒感染的新发感染率[J].南京医科大学学报(自然科学版),2010,30(4):467-471.

[12]张丽芳,郑克勤,李 洪.使用BED捕获酶联免疫方法对HIV—1发病率估计和监测的要点和建议[J].皮肤病与性病,2007,29(3):29-31.