李 立,王亚东,张聪恪,张 焱,王海玉
河南省疾病预防控制中心卫生检测检验中心郑州 450016
△女,1974年8月生,硕士,主管技师,研究方向:食品毒理学与保健食品功效学,E-mail:dlslily@163.com
大豆异黄酮和维生素 E结构中都含有酚性羟基,可将活泼的氢原子传递给氧自由基,终止自由基的链式反应,保护生物大分子免受氧化损伤。研究[1]表明,大豆异黄酮可使 D-半乳糖致衰老小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性明显升高,血清丙二醛(MDA)水平明显降低;大豆异黄酮可抵抗辐射引起的小鼠血清、肝脏和胸腺MDA水平升高及血清、肝脏和胸腺SOD活性和GSH-Px活性降低[2]。维生素E可显著提高 D-半乳糖致衰老小鼠肾、肝和睾丸组织SOD活性,并使衰老小鼠体内MDA含量明显下降[3]。作者在动物实验[4]观察到由大豆异黄酮和维生素 E混合物制成的胶囊具有抗氧化作用。为进一步评价其在人群中的有效性及安全性,进行了人体试食试验,报道如下。
1.1 仪器与试剂 Beckman-GC9AL7L全自动生化分析仪(美国);KY2000半自动生化分析仪(日本);肝功能、尿素氮和肌酐血液生化指标试剂盒(Beckman公司提供);SOD、MDA和GSH-Px试剂盒(南京建成生物工程研究所)。大豆异黄酮复合胶囊由某保健品有限公司提供,500 mg/粒(含有效成分大豆异黄酮100mg和维生素E 5 mg),人体推荐用量为1次/d,1粒/次。
1.2 受试对象及分组[5]选择某社区年龄在45~65岁健康状况良好的女性志愿者为受试对象。有下列情况之一者排除:①合并有心、肝、肾和造血系统等严重疾病患者。②妊娠或哺乳妇女,对保健食品过敏者。③3个月内服用与受试功能有关的物品,影响到对结果的判断者。④有嗜烟、嗜酒习惯者。⑤不合作者,不按规定食用受试样品,无法判定功效或资料不全影响功效或安全性判断者。依照标准选择自愿受试者 120名,随机分为受试组和对照组 2组,每组 60例。2组受试对象对该研究均知情同意。受试组按推荐服用方法服用受试产品,1次/d,1粒/次;对照组为空白对照,不作处理。试食时间为 3个月,试验期间受试组和对照组保持原来的生活、饮食不变。试验中受试者脱落 8例,最后实际有效人数为 112例,受试组和对照组分别为 57例和 55例,年龄分别为(50.4±4.2)和(49.6±3.6)岁。
1.3 观测指标 各项指标在试食开始及试食结束时分别进行检测。一般状况:精神、睡眠、饮食、大小便和血压;血[包括白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)和血小板(PLT)]、尿和便常规检查;胸透、心电图和腹部B超检查;血生化指标包括血糖(GLU)、总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、肌酐(Cr)和尿素氮(UREA);功效学指标包括MDA含量、SOD活性和GSH-Px活性。
1.4 统计学处理 采用SPSS 10.0进行分析,2组间各指标试食前后差值的比较采用两独立样本t检验,检验水准α=0.05。
2.1 安全性指标 试食前后 2组受试者血常规、生化、血压各项指标均无明显变化(表 1和表2),试食前后 2组受试者胸透、腹部 B超、心电图检查均未见明显变化;尿常规和大便检测指标试验前后无明显异常。
2.2 2组人群试食前后血清MDA、SOD和GSHPx差值的比较 结果见表 3。
表1 2组人群试食前后各项血常规指标和血压差值的比较
表2 2组人群试食前后各项血生化指标差值的比较
表3 2组人群试食前后功效指标差值的比较
自由基是一种具有高度活性的粒子,它是人体正常的代谢产物,正常情况下人体内有清除自由基的酶系统和非酶系统,使其处于不断产生与消除的动态平衡中。人体内产生少量的自由基不会对人体构成威胁,但数量过多时就会氧化生物大分子,如蛋白质、脂类和核酸等,引起多种疾病[6]。因此,寻找一种安全有效的清除体内多余自由基的保健食品非常必要。
体内过氧化脂质产物增加,抗氧化酶活性降低是导致衰老的重要原因[7]。MDA是受自由基攻击后细胞产生的脂质过氧化产物,SOD是体内主要的抗氧化酶之一,它可使超氧阴离子自由基歧化为过氧化氢和分子氧,而过氧化氢又在过氧化氢酶的作用下进一步分解为水,使超氧阴离子灭活,从而减少过氧化产物 MDA的生成,保护细胞膜免受侵害。GSH-Px可以清除由活性氧和·OH诱发的脂质过氧化物,保护细胞膜结构和功能的完整性。动物实验[4]表明,经口连续给予不同剂量的大豆异黄酮复合胶囊60 d,可降低血清中的MDA含量,提高SOD和GSH-Px活性。该研究旨在动物实验结果阳性的基础上进一步评价其在人群中食用的安全性和有效性。结果表明,试食前后对照组和受试组血、尿、大便常规和血生化检测指标均未见明显变化,腹部 B超、心电图和胸透检查结果亦未见异常,说明该试验样品对受试者健康无不良影响,提示对人体是安全的。试食后受试组MDA含量明显下降,SOD活性明显升高,GSH-Px活性升高。提示大豆异黄酮复合胶囊可能通过提高SOD的活性、降低MDA生成,从而实现其抗氧化作用。
[1]梁纪伟,田庆伟,王永明,等.大豆异黄酮对 D-半乳糖致衰老模型小鼠抗氧化系统作用的实验研究[J].中国老年医学杂志,2004,24(1):42
[2]刘丽,金宏,王先远,等.大豆异黄酮对电离辐射小鼠抗氧化功能的影响[J].解放军预防医学杂志,2005,23 (1):4
[3]孙晓芳,寇素茹,马幼敏,等.维生素 E抗 D-半乳糖致衰老小鼠的脂质过氧化作用[J].河北职工医学院学报, 2004,21(4):7
[4]李立,王亚东,张焱,等.大豆异黄酮和维生素E混合制剂对老龄大鼠的抗氧化作用[J].中国卫生检验杂志, 2009,19(11):2496
[5]中华人民共和国卫生部.保健食品检验与评价技术规范[S].2003.
[6]王亚东,李立,王海玉,等.葡萄籽软胶囊对人体抗氧化作用的试验研究[J].现代预防医学杂志,2008,35(7): 1239
[7]赵克毅.氧自由基与临床[M].北京:中国医药科技出版社,1999:134