畜牧兽医科技文摘

畜牧兽医科技文摘

猪圆环病毒2型Cap蛋白在杆状病毒表面的展示/邢福珊(西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100)，许信刚，童德文等//《中国兽医杂志》.-2010(12).-7～9

本试验将猪圆环病毒2型（PCV2）去核定位区ORF2基因克隆到杆状病毒表面展示转座载体pBacSC中,转化DH10Bac大肠杆菌感受态,经抗性及蓝白斑筛选得到含ORF2基因的重组杆状病毒DNA,以脂质体介导法将此重组DNA转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒。对重组病毒进行Western-blot分析和免疫金电子显微镜检测。结果表明,PCV2Cap蛋白在重组杆状病毒中获得表达；免疫金电子显微镜观察表明,重组蛋白展示在杆状病毒囊膜上。本试验成功构建表面展示PCV2Cap蛋白的重组杆状病毒,为下一步应用重组杆状病毒作为亚单位疫苗奠定基础。

中药复方对热刺激大鼠空肠热休克蛋白70的影响/董虹（北京农学院兽医学（中医药）北京市重点实验室,北京昌平102206），杨凯，程飞等//《中国兽医杂志》.-2010(12).-10～12

为探讨中药复方的抗热应激机理,以大鼠为热应激模型,热应激条件为41℃,2 h。用Real-time PCR和ELISA方法检测了中药复方对热刺激后空肠组织中Hsp70的表达。结果显示,高温刺激后大鼠空肠组织中Hsp70的mRNA和蛋白表达均升高（P＜0.01）,且中药组Hsp70表达高于热应激组（P＜0.01）,说明中药复方能通过诱导Hsp70的表达来抵抗高温对机体造成的热刺激。

实验性脾虚大鼠小肠结构与免疫功能的变化/尹朋（中国农业大学动物医学院,北京海淀100193），赵烨，朱晓宇等// //《中国兽医杂志》.-2010，(12).-16～19

本试验采用利血平复制大鼠脾虚模型,观测和探讨其小肠结构与免疫功能变化。与对照组比较结果显示,脾虚组大鼠体重显著下降（P＜0.05）,十二指肠、空肠和回肠的组织结构均有不同程度的损伤,绒毛长度与肠黏膜厚度均显著降低；黏膜上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量均显著增加；绒毛顶端与黏膜下层TLR2表达量均显著降低。表明,小肠黏膜结构损伤是脾虚动物体重下降的原因之一；局部过强的免疫反应是造成小肠黏膜结构损伤的主要机制,且此过程并非通过TLR2介导；小肠结构损伤及TLR2表达的显著下降均提示其抵御病原侵袭的功能下降。

鸡传染性喉气管炎病毒江苏分离株的分离鉴定/高巍（扬州大学兽医学院,江苏扬州225009），梅梅，王桂军等//《中国兽医杂志》.-2010(12).-19～21

江苏某养殖场28周龄蛋鸡发生以呼吸困难、咳血和产蛋下降为主要症状的疾病。利用特异性引物,从发病鸡喉头及其分泌物中扩增出鸡传染性喉气管炎病毒（infectious laryngotracheitis virus,ILTV）TK基因的1.3 kb大小片段；发病鸡喉头及分泌物接种鸡胚后,在鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）上形成痘斑,产生特征性的多核巨细胞和核内包涵体；第3代分离毒的毒价为10-6.2EID50/0.2 mL；分离毒株可被ILT标准阳性血清中和,中和价为1∶40；人工发病试验显示,接种鸡有ILT典型的呼吸道症状和病理变化。以上结果表明,分离病毒为ILTV,将此分离株命名为XZ09。

兔TLR2 TLR4部分cDNA克隆及其在组织中的分布/聂奎（西南大学动物科技学院,重庆北碚400715），曾兴艳，王裕文等//《中国兽医杂志》.-2011,47(3).-12～14

从日本大耳白兔的脾脏组织克隆出Toll样受体基因2（RTLR2）和Toll样受体基因4（RTLR4）,并对其在兔的17种组织中的表达分布进行了检测。RTLR2和RTLR4核苷酸序列与GenBank中登载的穴兔（Oryctolagus cuniculus）TLR2序列（NM_001082781）、TLR4序列（NM_001082781）的相似性分别为99%和100%；推导氨基酸序列的同源性比对发现,与人、马、野猪、猫、猩猩、牛、绵羊和鼠等8种动物相比,RTLR2与马的同源性最高,为80%,与鼠最低,为61%,而RTLR4与这几种动物的同源性在62%～5%之间；兔的胸腺、盲肠、睾丸等15种组织中均检测到TLR2和TLR4 mRNA的转录产物,但骨骼中未发现TLR2和TLR4,TLR4在皮肤中也未见表达。

畜牧业温室气体排放与减排技术/汪开英（浙江大学生物系统工程与食品科学学院,浙江杭州310058），黄丹丹，应洪仓//《中国畜牧杂志》.-2010(24).-20～22,26

畜牧业是农业温室气体的主要排放源之一,畜牧业温室气体排放是当前国际上关注的热点。本文主要介绍畜牧业温室气体排放源、减排技术及相关政策。探讨中国畜牧业温室气体减排潜力及存在问题,并结合国情提出中国畜牧业温室气体减排策略与亟待开展的研究。

联苯胺比色法测定饲料中有机硒的含量/刘娜（广州市博善生物饲料有限公司,广东广州510730），朱棠君，赵志湘//《中国畜牧杂志》.-2010(24).-54～55

本文介绍了一种简便可靠的测定富硒酵母中有机硒含量的方法。采用双氧水∶高氯酸∶硫酸为3∶3∶1的消化液处理样品,用联苯胺比色法测定样品硒含量。在酸性条件下,硒与3,3′-二氨基联苯胺作用,生成黄色络合物（Se-DAB）。在pH值6.5～7.0左右时,用甲苯萃取,根据有机层显色的程度,可进行分光光度法测定。测定总硒和无机硒,用差减法求出有机硒含量。

己烯雌酚残留检测技术的研究进展/邓省亮（中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所,北京100081），李平，于洪侠等//《中国畜牧杂志》.-2010(24).-56～60

己烯雌酚是一种人工合成的非甾体雌激素,能有效促进动物生长,因而广泛应用于畜牧养殖业,但由于其易在动物体内残留并产生严重的致癌作用,许多国家已经禁止在饲料中添加己烯雌酚,但其偷用现象依然存在。本文就己烯雌酚的危害、残留及检测方法作一综述。

枯草芽孢杆菌和抗生素对断奶仔猪生长性能的影响/孙燕（沈阳农业大学畜牧兽医学院,辽宁沈阳110866），边连全，刘显军等//中国畜牧杂志.-2011,47(7).-59～62

选用135头平均体重为8.43kg的杜×长×大三元杂交断奶仔猪,采用3×3两因子完全交叉试验设计,研究了饲料中添加3个枯草芽孢杆菌水平（0、0.1%、0.15%）和3个抗生素（金霉素＋抗敌素）水平（0、0.1%＋0.04%、0.15%＋0.06%）对断奶仔猪生产性能的影响。试验共设9个处理,每个处理3个重复。试验期为28d,分为前期（1-14d）和后期（15-28d）2个阶段。结果表明：单独或联合添加枯草芽孢杆菌和抗生素能显著提高断奶仔猪前期、后期、全期的日增重,显著降低饲料增重比和前期腹泻。其中添加0.1%枯草芽孢杆菌和0.1%金霉素、0.04%抗敌素能显著提高断奶仔猪全期日增重、显著降低饲料增重比。试验表明,芽孢杆菌和抗生素可不同程度上提高断奶仔猪的生产性能,且两者存在互作效应。

ClassⅠ新城疫病毒核衣壳蛋白在体外细胞感染过程中表达定位的检测/孙英杰（中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241），陈鸿军，詹媛等//《中国预防兽医学报》.-2011,33(2).-85～88

为分析核衣壳蛋白（NP）在新城疫病毒（NDV）感染真核细胞过程中细胞内定位的情况,本研究以NDV Class I强毒株9a5b作为免疫原制备4株NP特异性单克隆抗体（MAb）,并将病毒株9a5b按5 MOI感染量接种DF1单层细胞,当接种后1 h～3 h时,NP有极少量表达并逐量增加,主要呈点状分布于细胞浆内；当接种后4 h～20 h时,NP聚集于细胞浆中,聚集数量与感染时间成正比；感染24 h后,细胞核碎裂,NP散在分布于细胞浆中。表明NP作为立早期蛋白,始终在胞浆中进行复制；在病毒感染初期,NP介导核糖核蛋白复合物发挥转录和翻译功能。本研究为深入开展NP与病毒mRNA转录、复制和包装的相互关系机制的研究奠定了基础。

猪血凝性脑脊髓炎病毒在人工感染仔猪体内侵染过程和分布规律的研究/王栋（吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春130062），臧德跃，赵魁等//《中国预防兽医学报》.-2011,33(2).-89～92

为研究血凝性脑脊髓炎病毒（HEV）在人工感染仔猪体内的侵袭过程和分布规律,本实验采用滴鼻的方式感染5头1日龄未食初乳仔猪,并在感染后每隔24 h迫杀1头仔猪,采集鼻黏膜、气管、口腔黏膜、舌、食管、胃、肠、心肌、肝、脾、肺、肾、各段脊髓和脑等组织脏器制作切片,通过间接免疫组织化学方法检测HEV在仔猪体内的动态侵袭过程。此外,采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR（Real-time PCR）方法检测病毒在各组织脏器中的分布情况。结果显示：感染病毒后2 d～3 d,仔猪出现精神沉郁、全身震颤等中枢神经系统症状,免疫组织化学检测可见病毒抗原首先出现于脑桥,并进一步蔓延至延髓和各段脊髓,最后进入小脑浦肯野氏细胞和大脑皮层锥体细胞中；Real-time PCR检测结果显示病毒广泛分布于大脑皮层、脑桥、延髓、脊髓和小脑等中枢神经系统的组织中,其中大脑皮层的检出率最高。

马传染性贫血弱毒疫苗株致弱过程中表面蛋白gp90的进化分析/王雪峰（内蒙古农业大学兽医学院,内蒙古呼和浩特010018），王帅，韩秀娥等 //中国预防兽医学报.-2011,33(2).-93～96

为进一步研究马传染性贫血病毒（EIAV）弱毒疫苗的减毒机制,本实验对EIAV弱毒疫苗的原始种毒EIAVLN40、亲本病毒株EIAVDV、驴白细胞弱毒疫苗EIAVDLV121和EIAVDV减毒过程中的3个中间代次病毒（EIAVDLV32、EIAVDLV62和EIAVDLV92）的gp90基因进行测序分析。结果显示,适应白细胞培养的病毒株的进化距离更接近,与亲本病毒株处于进化树的不同分支。与强毒株相比,适应白细胞培养的病毒株在9个位点发生优势氨基酸的转换和V3区糖基化位点191NSSN194的缺失。此外,伴随EIAV毒力减弱的过程,有8个位点出现优势氨基酸残基的转换,在各代次病毒株中V4区具有糖基化位点237NNTW240和246NETW249的克隆所占的比例逐渐降低,其中EIAVDLV121的糖基化位点237NNTW240完全缺失。

5种脑炎人兽共患病病毒多重RT-PCR检测方法的建立/蔡绪禹（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／农业部兽医公共卫生重点开放实验室,黑龙江哈尔滨150001），康晓平，刘洪等//《中国预防兽医学报》.-2011,33(2).-118～121

为建立同时检测流行性乙型脑炎病毒（JEV）、森林脑炎病毒（TBEV）、东方马脑炎病毒（EEEV）、西方马脑炎病毒（WEEV）和基孔肯雅病毒（CHIKV）5种人兽共患脑炎病病毒的多重RT-PCR方法,本研究根据GenBank登录的相关病毒基因序列设计特异引物,通过优化引物组合及PCR反应条件,建立可同时检测5种病毒的方法,扩增片段长度分别为411 bp（JEV）、945 bp（TBEV）、193 bp（EEEV）、545 bp（WEEV）和769 bp（CHIKV）；该方法具有良好的特异性,对病毒核酸最低检测拷贝数分别为7.1×103、3.6×103、2.2×103、5.6×103和5.1×103。该方法具有特异性强、灵敏度高、操作简便等优点,为以上5种人兽共患脑炎病病毒提供快速检测手段。

牛结核γ干扰素ELISA检测方法的建立及应用/胡文婷（青岛农业大学,山东青岛266109），曹瑞，张旭霞等//《中国预防兽医学报》.-2011,33(2).-122～125

为建立快速、敏感的牛结核分枝杆菌检测方法,本研究利用两株牛γ干扰素（IFN-γ）的单克隆抗体（MAb）建立检测牛IFN-γ的抗原捕获夹心ELISA方法。通过优化反应条件,确定抗体包被浓度为5μg/mL；全血刺激上清最佳稀释倍数为1∶2,作用时间为1 h；最佳酶标抗体作用时间为1 h；底物作用时间为15 min。该方法对重组牛IFN-γ的最小检测量可达25 pg/mL,对重组和天然牛的IFN-γ均具有特异性,与IFN-α、IFN-β或白细胞介素4为阴性反应；与山羊和绵羊的IFN-γ呈阳性反应,而与猪、鸡、鹿、犬和人的IFN-γ呈阴性反应。通过对177头牛进行检测,该方法与皮内变态反应的符合率为78.9%,与进口试剂盒的符合率为89.8%,表明该方法具有良好的应用价值。本研究为牛结核早期及其潜伏期感染的监测及流行病学调查提供了快速敏感的检测方法。

牛病毒性腹泻病毒BVDV-JL株的分离与鉴定/张淑琴（中国农业科学院特产研究所,吉林吉林132109），郭利，冷雪等//《中国预防兽医学报》.-2011,33(3).-181～184

本研究从吉林某牛场表现严重腹泻症状濒死牛的胸腺病料样品中分离一株病毒,该病毒在MDBK细胞中盲传4代无细胞病变产生,而通过RT-PCR和间接免疫荧光试验、微量血清中和试验检测表明该分离病毒株为牛病毒性腹泻病毒（BVDV）,并命名为BVDV-JL。将BVDV-JL株F4代细胞培养液（107.13TCID50/mL）经鼻内喷雾人工感染3月龄～6月龄BVDV抗体阴性黄牛（6mL/头）,感染牛表现连续两天体温升高,白细胞数量下降,并在感染牛的白细胞提取物及鼻拭子样品中分离到该病毒株,表明该病毒株具有致病性。BVDV-JL株的分离对进一步开展疫苗研发、流行病学调查以及致病机理等方面的研究具有重要意义。

野猪YFM复方麻醉剂麻醉效果的研究/刘焕奇（青岛农业大学动物科技学院,青岛266109），曲志娜，邹明等//《中国农学通报》.-2011,27(5).-405～408

为了评价YFM复方麻醉剂对野猪的麻醉效果及生理功能的影响,试验将YFM合剂以0.1mL/kg体重对野猪进行颈部肌肉注射实施全身麻醉,通过临床观察和麻醉监护仪监测野猪的麻醉效果和生理功能的变化。结果显示,YFM合剂麻醉野猪的诱导期为3.05±0.22min,麻醉期为60.20±1.72min,苏醒期为30.79±1.53min,并且其对野猪的镇静、镇痛和肌松效果良好；对呼吸和循环系统影响轻微,脉搏血氧饱和度维持在（91.30±0.40）%以上。试验证明,YFM合剂对野猪麻醉效果确实,对机体主要生理功能影响轻微。

土壤中磺胺类兽药残留的生态效应及转归/张敏（沈阳农业大学工程学院,沈阳110866），李轶，敖永华等//《中国农学通报》.-2011,27(3).-369～373

磺胺类药物（Sulfonamides,SAs）是指具有对氨基苯磺酰胺结构的一类药物。磺胺类抗生素是人工合成的高效广谱抗菌药,广泛应用于农业、水产、畜牧养殖和人类疾病治疗中,其在环境中的大量残留带来了潜在的环境风险。此文综述了磺胺类抗生素兽药对土壤环境的生态毒性、土壤中磺胺类兽药残留的检测,以及在土壤中的吸附转移和降解,并对今后的研究方向进行了展望。

对抗菌肽的应用研究/陈朝光（辽宁新华鲁抗大药房有限公司）//《中小企业管理与科技》.-2011(10).-289～290

大量的β－内酰胺类抗生素，对保护人类健康作出了巨大贡献。随着上述“传统抗生素”的广泛使用，不断产生出诸多如β－内酰胺类抗生素的过敏反应以及长期使用导致抗药菌株的产生。随之发现，某些阳离子型多肽具有广谱的抗菌活性，同时具有“传统抗生素”无法比拟的优越性成为新一代抗菌剂。本文就其发展过程进行分析叙述。

L-肉碱生理作用及其机理的研究进展/徐少辉（中国农业科学院饲料研究所,农业部饲料生物技术重点开放实验室北京100081），武书庚，张海军等//《动物营养学报》.-2011,23(3).-357～363

L-肉碱作为一种新型的饲料添加剂日渐受到重视。本文从L-肉碱的基本生理功能——脂肪酸β氧化谈起,对其新近发现的生理功能如抑制细胞凋亡、抗氧化和免疫调节的研究进展进行了总结,同时对其发挥抗氧化、免疫调控作用的可能机理也进行了分析归纳,以期为L-肉碱的研究和其在动物生产中更好地应用提供理论依据。

鱼腥味鸡蛋的研究进展/王晶（东北农业大学动物营养研究所,哈尔滨150030），武书庚，许丽等//《动物营养学报》.-2011,23(3).-370～375

随着消费者对畜禽产品要求的不断提高,畜禽产品的风味、营养价值及其安全性越来越成为关注的热点。鱼腥味问题严重影响了鸡蛋的风味和可接受性。本文综述了鸡蛋鱼腥味形成的物质基础及代谢过程、鸡蛋鱼腥味的影响因素以及目前研究存在的问题及展望,旨在为相关研究提供参考。

泌乳反刍动物乳腺中小肽的摄取、利用及影响因素/周苗苗（浙江大学动物科学学院奶业科学研究所,杭州310029），刘红云，赵珂等//《动物营养学报》.-2011,23(3).-376～380

乳蛋白是人类饮食中重要的动物蛋白质来源。乳腺是合成乳蛋白的主要场所。然而,反刍动物乳腺由血液摄取的游离氨基酸并不能满足乳腺合成蛋白质的需要,动物对完整蛋白质本身或小肽有着特殊需要。近年来,由于小肽优于氨基酸的跨膜转运机制和特殊的生理功能,小肽营养受到越来越多的关注。本文主要从泌乳反刍动物乳腺对小肽的摄取、利用以及影响乳腺小肽摄取利用的因素3个方面进行简要综述。

应用体外产气与体外消化法评定不同生育期豆科牧草营养价值/张桂杰（中国农业大学动物科技学院动物营养学国家重点实验室,北京100193），王红梅，罗海玲等//《动物营养学报》.-2011,23(3).-387～394

本试验旨在探讨华北农牧交错带紫花苜蓿、棘豆、草木樨和野豌豆4种主要豆科牧草不同生育期营养价值变化规律。利用常规化学成分分析、体外消化技术和体外发酵产气技术测定4种豆科牧草盛花期和结实期的主要营养成分、体外消化率和瘤胃微生物体外发酵产气量。结果表明：开花期草木樨、紫花苜蓿的粗蛋白质含量差异不显著（P＞0.05）,与棘豆和野豌豆相比差异显著（P＜0.05）,野豌豆与棘豆粗蛋白质含量差异显著（P＜0.05）,棘豆、紫花苜蓿、草木樨、野豌豆的粗蛋白质含量随生育期延长而下降,差异极显著（P＜ 0.01）；结实期与开花期相比,中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的含量有增长趋势（P＞0.05）,4种牧草的干物质体外消化率（DMD）、中性洗涤纤维体外消化率（NDFD）、酸性洗涤纤维体外消化率（ADFD）呈下降趋势（P＞0.05）；棘豆、紫花苜蓿结实期和开花期的24 h产气量差异显著（P＜0.05）,只有棘豆2个生育期的48 h产气量差异显著（P＜0.05）,4种牧草2个生育期的理论最大产气量差异不显著（P＞0.05）,4种豆科牧草结实期的延滞期相比开花期有增长趋势（P＞0.05）。综上所述,本研究所选4种豆科牧草结实期营养价值低于开花期。

饲粮添加黄芪多糖对蛋鸡免疫功能及肠道菌群的影响/高杨（河北农业大学动物科技学院,保定071001），王洪芳，陈辉等//《动物营养学报》.-2011,23(3).-447～451

本试验旨在研究饲粮中添加不同水平黄芪多糖对蛋鸡免疫功能及肠道菌群的影响。试验选取健康且生产性能相近的380日龄海兰灰商品蛋鸡1 440只,随机分为6组,每组4个重复,每个重复60只鸡。以玉米-豆粕型饲粮为基础饲粮,各组分别在基础饲粮中添加0（Ⅰ,对照组）、50（Ⅱ组）、100（Ⅲ组）、150（Ⅳ组）、200（Ⅴ组）和250 mg/kg（Ⅵ组）黄芪多糖,试验期8周。结果表明：1）饲粮中添加不同水平的黄芪多糖,可以不同程度地提高脾脏系数,试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组均显著高于对照组（P＜0.05）。试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组盲肠扁桃体淋巴小结数量和绒毛长度均高于试验Ⅰ组,但均未达到显著水平（P＞0.05）。2）试验Ⅳ组盲肠大肠杆菌数量极显著低于对照组（P＜0.01）,试验Ⅲ组与对照组差异不显著（P＞0.05）；试验Ⅲ组盲肠乳酸菌数量极显著地高于试验Ⅵ组（P＜0.01）,显著高于试验Ⅳ组（P＜0.05）,与对照组相比无显著差异（P＞0.05）；试验Ⅲ组盲肠双歧杆菌与试验Ⅵ组相比差异极显著（P＜0.01）,与对照组和试验Ⅳ组相比无显著差异（P＞0.05）。综合评定,饲粮中添加100 mg/kg黄芪多糖效果较佳。

饲粮添加生姜粉对蛋鸡生产性能及免疫功能的影响/赵旭（山东农业大学动物科技学院,泰安271018），杨在宾，杨维仁等//《动物营养学报》.-2011,23(3).-459～465

本试验旨在研究饲粮中添加不同水平的生姜粉对蛋鸡生产性能及免疫功能的影响。试验选用27周龄的海兰褐商品蛋鸡675只,随机分为5个处理,每个处理5个重复,每个重复27只。对照组饲喂基础饲粮,其余4组分别用0.5%、1.0%、1.5%和2.0%的生姜粉等量替代基础饲粮中的麸皮。试验期为70 d。结果表明,饲粮中添加适量生姜粉可以显著提高蛋鸡的平均日产蛋量和试验3～4周的产蛋率以及试验1～2周的平均蛋重（P＜0.05）,降低试验5～6周和9～10周蛋鸡的料蛋比（P＜0.05）,但对蛋鸡的平均日采食量没有显著性影响（P＞0.05）；此外,生姜粉的适量添加可以提高蛋鸡的免疫力,在试验第70天时,显著提高了蛋鸡血清中H9和Re-5 H5亚型禽流感抗体效价以及全血中粒细胞数（P＜0.05）；且以1.0%的生姜粉添加量效果最佳。以上结果说明,饲粮添加生姜粉能够提高蛋鸡的生产性能和免疫力,以1.0%生姜粉为最适添加量。