血浆可溶性P选择素与炎症因子对糖尿病肾病的影响

苗艳 阎磊 邵凤民 曹慧霞 朱清

血浆可溶性P选择素与炎症因子对糖尿病肾病的影响

苗艳 阎磊 邵凤民 曹慧霞 朱清

目的探讨血浆可溶性P-选择素(sP-selectin)及炎症因子对糖尿病肾病的影响。方法138例糖尿病肾病患者根据尿白蛋白排泄率(UAER)分为正常蛋白尿组(DM组)、早期糖尿病肾病组(DN1组)及临床糖尿病肾病组(DN2组)，收集相关临床资料并检测血浆糖化血红蛋白(HbAlc)、空腹C肽(FCP)、三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、C反应蛋白(CRP)、白介素6(IL-6)、UAER及sP-selectin。结果糖尿病病程、CRP、IL-6、UAER及sP-selectin在DM、DN1、DN2 3组间依次递增，且组间差异具有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);FCP的水平在DM、DN1、DN2 3组间依次递减，组间差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);在所有糖尿病患者中sP-selectin与糖尿病病程、LDL-C、CRP、IL-6、UAER呈正相关(r=0.17，P＜0.05;r=0.23，P＜0.05;r=0.39，P＜0.05;r=0.31，P＜0.05;r=0.56，P＜0.05);与FCP呈负相关(r=-0.35，P＜0.05)。多元线性回归分析结果显示FCP、IL-6、UAER是sP-selectin的独立影响因素(P＜0.05)。结论可溶性P-选择素与CRP、IL-6及LDL-C、FCP等一起参与了糖尿病肾病的发生及发展。

可溶性P-选择素;炎症因子;糖尿病肾病

糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病的主要微血管病变，是糖尿病患者致残、致死的主要原因。P-选择素(P-selectin)是细胞黏附分子选择素家族的重要成员，被认为与糖尿病肾病的发生发展明显相关［1］，但其作用机制仍不十分明确，可能与其介导的细胞黏附、血栓形成及促进炎症有关。本文通过对糖尿病肾病患者血浆中可溶性P-选择素(soluble P-selectin，sP-selectin)及炎症因子的研究了解P-选择素及炎症反应对糖尿病肾病的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料选择符合WHO1999年2型糖尿病诊断标准，于2008年6月至2010年12月在我院内分泌、肾病内科门诊和住院的2型糖尿病患者，所有患者血清肌酐(SCr)＜133 μmol/L，肾损害原因不明确者行经皮肾活检。排除标准:合并其他原发性或继发性肾脏疾病;进入观察期前4周内曾合并感染性疾病、自身免疫性疾病、急性冠脉综合征、严重肝功能不全、脑血管意外、恶性肿瘤;进入观察期前4周内应用抗血小板药物、非甾体类抗炎药、激素、免疫抑制剂等。入组患者共138例，根据尿白蛋白排泄率(UAER)分为3组: UAER＜30 mg/24 h为正常白蛋白尿组(DM组)，共45例，其中男21，女24例，平均年龄(56.1±16.8)岁，平均病程(4.8 ±2.4)年;UAER 30～300 mg/24 h为微量白蛋白尿组，即早期糖尿病肾病组(DN1组)共43例，其中男23例，女20例，平均年龄(58.7±16.4)岁，平均病程(6.8±4.7)年;UAER＞300 mg/24为大量白蛋白尿组，即临床糖尿病肾病组(DN2组)共50例，其中男28例，女22例，平均年龄(61.3±22.1)岁，平均病程(9.6±6.2)年。

1.2 方法

1.2.1 收集患者一般资料如年龄，性别，糖尿病病程等。患者在入组后第2天空腹12 h后抽取静脉血，分离血清，测定血糖化血红蛋白(HbAlc)、空腹C肽(FCP)、三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDLC);应用免疫透射比浊法测定C反应蛋白(CRP);另收集空腹静脉血标本2 ml，在4℃以3000r/min离心5 min分离血清，-80℃保存，实验结束后采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定sP-selectin及白介素6(IL-6);所有患者于采血当天留取24 h尿，混匀后记录总量，用放免法测定尿白蛋白浓度，并计算UAER。

1.2.2 统计学方法应用SPSS 12.0软件进行统计学分析，计量资料用均数±标准差(±s)表示;两组间比较采用两独立样本均数比较的t检验;相关性分析采用Spearman相关性分析和多元线性回归分析;P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料分析(见表1)。

表1 各组患者临床资料

2.1.1 3组间年龄、性别差异无统计学意义，但糖尿病病程在DM、DN1、DN2 3组间依次延长，且组间差异具有统计学意义(P＜0.01)。

2.1.2 DN2组HbAlc较DN1组升高(P＜0.05)，而其余组间的HbAlc差异无统计学意义。FCP的水平在DM、DN1、DN2 3组间依次递减，组间差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)。

2.1.3 血浆HDL-C在DM与DN1组、DN1与DN2组之间差异有统计学意义(P＜0.05)，而在DM与DN2组间差异无统计学意义;LDL-C在DM与DN2组、DN1与DN2组之间差异有统计学意义(P＜0.01)，而在DM与DN1组间的差异无统计学意义。TG、CH在3组间均差异无统计学意义。

2.1.4 CRP、IL-6、UAER及sP-selectin在DM、DN1、DN2 3组间依次递增，组间均差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)。

2.2 sP-selectin与各指标的相关性分析在所有糖尿病患者中sP-selectin与糖尿病病程、LDL-C、CRP、IL-6、UAER呈正相关(r=0.17，P＜0.05;r=0.23，P＜0.05;r=0.39，P＜0.05;r =0.31，P＜0.05;r=0.56，P＜0.05)，与FCP呈负相关(r=-0.35，P＜0.05)。

2.3 多元线性回归分析结果以sP-selectin为因变量，患者年龄、糖尿病病程、HbAlc、FCP、TG、TC、HDL-C、LDL-C、CRP、IL-6、UAER为自变量进行多元线性回归分析，结果显示FCP、IL-6、UAER是sP-selectin的独立影响因素(P＜0.05)。

3 讨论

糖尿病肾病是糖尿病的微血管并发症之一，其发病机制复杂，可能与多种因素如代谢紊乱、血流动力学改变、晚期糖基化终末产物、氧化应激、内皮损伤、细胞因子有关。近年来免疫、炎症等引起的内皮功能紊乱对糖尿病肾病的影响备受关注，认为其与糖尿病发生、发展密切相关［2］。

P-选择素为选择素黏附分子家族中的成员之一，其表达于血小板和内皮细胞上，与中性粒细胞和单核细胞上的配体结合后介导白细胞的黏附、滚动、聚集及活化并释放炎症递质，参与炎症过程，既是启动早期炎性反应的重要分子又是维持慢性炎症状态的重要因素。P-选择素有两种变型:可溶性的P选择素和膜的P选择素。可溶性P选择素是内皮损伤或血小板活化时由部分表达于细胞表面的P选择素释放到血液中形成的，可以反映体内血小板活化及内皮损伤程度［3，4］。

已有多种证据表明在原发及继发性肾小球疾病中，P-选择素在肾小球系膜区、内皮细胞及小管上皮细胞高表达，参与了肾小球及肾小管间质的炎症反应［5-7］。研究表明，P-选择素与糖尿病微血管病变尤其是DN发生发展密切相关。Hirata等［8］用免疫组化方法对DN患者肾活检组织中P-选择素进行检测，与其他肾小球疾病比较发现，P-选择素在DN患者肾组织的表达程度要显著高于正常对照组和其他肾小球疾病组; Omoto等［9］发现DN患者血液中可溶性P-选择素水平显著高于无并发症组与健康对照组。本研究中亦发现可溶性P-选择素水平与糖尿病病程及尿微量白蛋白率呈正相关，且尿微量白蛋白率是影响可溶性P-选择素水平的独立影响因素，这与上述的研究结果一致，即P-选择素的持续表达可能与DN进展有关。

此外，晚近研究揭示DN的发病在代谢紊乱与血流动力学机制基础上，炎症机制是其持续发展的关键因素［10，11］。本研究证实可溶性P-选择素与炎症因子CRP、IL-6呈正相关，IL-6也是影响可溶性P-选择素水平的独立影响因素，进一步证实在体内高糖环境下P-选择素参与慢性微炎症状态的持续发展，是DN进展不可忽略的因素。

本研究还发现，可溶性P-选择素水平与LDL-C水平呈正相关，这就提示我们高水平的LDL-C可以导致内皮损伤，从而加重糖尿病肾损害。其机制可能与脂质过氧化加重氧化应激反应有关［12］。

在本研究中FCP与可溶性P-选择素水平有着负相关性且为其独立影响因素，这在以前的研究中尚未见报道。生理浓度的C肽在动物实验和临床研究中发现具有糖尿病微血管保护作用，如降低肾小球高滤过、减少尿蛋白、抑制肾小球系膜基质的增加延缓肾脏损害［13，14］;降低视网膜毛细血管通透性，延缓糖尿病视网膜病变进展等［15］。本研究结果提示C肽可能是通过对血管内皮的保护而发挥微血管保护作用的，随着糖尿病病程的延长及胰岛功能的衰竭导致C肽的减少可能是糖尿病肾损害的原因之一。

综上所述，本研究证实了P-选择素与炎症因子CRP、IL-6及LDL-C、FCP等一起参与了糖尿病肾病的发生及发展，彼此之间相互影响、相互加重。为延缓糖尿病肾病进展中的抗炎、降脂及抗黏附治疗提供了一定的理论依据。

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The effects of serum soluble P-selectin and inflammatory factors in patients with diabetic nephropathy

MIAO Yan，YAN Lei，SHAO Feng-min，et al．Department of Rheumatism and Nephrology，Henan Provincial People's Hospital，Zhengzhou 450003，China

ObjectiveTo investigate the effect of serum sP-select and inflammatory factors in patients with diabetic nephropathy(DN).Methods138 diabetic nephropathy patients were divided into three groups according to their urinary albumin excretion rate(UAER):normal albuminuria group(DM)，incipient DN group (DN1)and overt DN group(DN2).The relationship of clinical data was analyzed.All patients were tested for HbAlc，FCP，TG，TC，HDL-C，LDL-C，CRP，IL-6，UAER and sP-selectin.ResultsThe duration of diabetes and the level of serum CRP，IL-6，UAER，sP-selectin were more and more higher in group DM、DN1 and DN2(P＜0.05或P＜0.01)，the level of serum FCP were more and more lower in group DM、DN1 and DN2(P＜0.05或P＜0.01).The level of serum sP-selectin in all patients with diabetic nephropathy showed positive correlation with the duration of diabetes and the level of LDL-C，CRP，IL-6，UAER(r=0.17，P＜0.05;r=0.23，P＜0.05; r=0.39，P＜0.05;r=0.31，P＜0.05;r=0.56，P＜0.05)，but showed negative correlation with the level of FCP(r=-0.35，P＜0.05).The multivariate linear regression analysis showed that the level of FCP，IL-6 and UAER seemed independent risk factors for sP-selectin(P＜0.05)．ConclusionP-selectin maybe involved in the pathogenesis of diabetic nephropathy with CRP、IL-6、LDL-C and FCP．

Soluble P-selectin;lnflammatory factors;Diabetic nephropathy

450003河南省郑州人民医院肾病风湿免疫科

邵凤民Email:fengminshao@medmail.com.cn