急性胰腺炎患者血清高迁移率族蛋白B1水平的变化及意义

沈美琴 夏敏

·论著·

急性胰腺炎患者血清高迁移率族蛋白B1水平的变化及意义

沈美琴 夏敏

目的检测急性胰腺炎(AP)患者血清高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)的水平变化，探讨HMGB1在AP发生发展中的作用。方法以33例重症急性胰腺炎(SAP)、38例轻症急性胰腺炎(MAP)以及28例健康体检者为研究对象，在发病72 h内收集血标本，采用ELISA法检测血清HMGB1水平，分析其与患者性别，年龄，病因，发病时间，Ranson评分，Balthazar CT评分，血清C-反应蛋白(CRP)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酐、总胆红素等指标，局部和(或)全身并发症的关系。结果健康对照组、MAP组、SAP组血清HMGB1水平分别为(1.82±0.64)μg/L、(6.13±5.80)μg/L、(11.48±6.94)μg/L，SAP组显著高于MAP组，MAP组又显著高于健康对照组(P值均<0.05)。在发病24 h内患者血清HMGB1水平开始增高，48 h内达峰值，后开始下降，至72 h仍维持在高于正常值水平。血清HMGB1水平与患者性别、年龄、病因无关；与Ranson评分、Balthazar CT评分、CRP、LDH、血肌酐值呈正相关关系。有局部和(或)全身并发症患者血清HMGB1水平高于无并发症者，但差异不显著。结论HMGB1是一种晚期炎症介质，与AP病情的严重程度相关，并可能参与了SAP时肾功能不全的发生。

胰腺炎，急性坏死性； 高迁移率族蛋白质类； 酶联免疫吸附测定； 炎症介质

高迁移率族蛋白(high mobility group protein,HMG)是一类真核细胞核内的非组蛋白，HMGB1为其家族成员之一。1999年Wang等[1]首先发现HMGB1延迟释放至胞外后介导持续的炎症反应，它作为一种晚期炎症介质，参与了脓毒症、关节炎、急性肺损伤、结缔组织疾病等病理生理过程。本研究检测急性胰腺炎(AP)患者血清HMGB1水平的变化，探讨其与AP发生、发展和预后的关系。

资料与方法

一、研究对象

收集2007年12月至2009年3月确诊为重症急性胰腺炎(SAP)患者33例 (男16例，女17例，年龄36～90岁)和轻症急性胰腺炎(MAP)患者38例(男22例，女16例，年龄22～87岁)。诊断均符合中华医学会消化病学分会胰腺病学组制定的标准[2]。排除标准：入院后1 d内病死者；结缔组织疾病患者；肿瘤患者。以28例健康体检者作为对照组。

二、血清HMGB1水平及其他生化指标的检测

发病72 h内采集血标本，3 h内分离血清并于-20℃冰箱保存。采用ELISA法[3]检测血清HMGB1水平，检测试剂盒为日本SHINO-TEST公司产品，按产品使用说明书操作。血C-反应蛋白(CRP)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酐、总胆红素、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血钙、血糖、血淀粉酶、三酰甘油等由本院检验科检测。

三、统计学方法

结 果

一、AP患者血清HMGB1水平

SAP组、MAP组及对照组血清HMGB1水平分别为(11.48±6.94)μg/L、(6.13±5.80)μg/L和(1.82±0.64)μg/L，差异显著(P<0.05，)。

二、血清HMGB1水平与性别、年龄的关系

男、女患者血清HMGB1水平分别为(8.02±7.75)μg/L和(9.31±8.52)μg/L，无统计学差异。

将患者按年龄分为≤44岁、45～54岁、55～64岁、65～74岁、≥75岁5组，各组血清HMGB1水平分别为(8.89±7.99)μg/L、(7.10±7.01)μg/L、(9.58±6.88)μg/L、(10.82±8.91)μg/L、(7.50±6.76)μg/L，无显著性差异。

三、血清HMGB1水平与病因的关系

71例AP中胆源性47例、高脂血症性15例、酒精性5例、其他原因4例,其血清HMGB1水平分别为(6.81±6.27)μg/L、(10.17±8.32)μg/L、(10.17±6.43)μg/L及(8.32±4.19)μg/L，各病因间无显著性差异。

四、血清HMGB1水平与发病时间的关系

71例AP患者分别于发病24 h内、>24～48 h、>48～72 h内留取标本，血清HMGB1水平分别为(5.03±3.06)μg/L、(12.67±4.00)μg/L、(6.72±4.74)μg/L。发病24 h内患者血清HMGB1水平开始增高，48 h内达峰值，后开始下降，但至72 h时仍维持在高于正常值水平。

五、血清HMGB1水平与胰腺炎病情的关系

血清HMGB1水平与Ranson评分呈正相关(r=0.367，P<0.01；图1)，Ranson评分≥3者血清HMGB1水平为(11.13±10.70)μg/L，显著高于<3者的(6.17±5.84)μg/L(P<0.05)。血清HMGB1水平与Balthazar CT评分亦呈正相关(r=0.295，P<0.05；图2)。CT分级D～E级者的血清HMGB1水平为(10.66±9.63)μg/L，显著高于A～C级者的(4.61±3.69)μg/L(P<0.01)。

六、血清HMGB1水平与血生化指标的关系

血清HMGB1水平与血CRP、LDH、肌酐值均呈正相关，r值分别为0.436、0.486、0.378，P值均<0.05；与血清总胆红素、ALT、AST、血钙、血糖、血淀粉酶、三酰甘油水平均无相关性。

七、血清HMGB1水平与局部和(或)全身并发症的关系

33例SAP患者出现局部和(或)全身并发症者20例，包括胰腺假性囊肿8例、胰腺坏死3例、胰腺脓肿1例以及入院后出现急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、急性肾功能不全、急性心衰、胰性脑病、休克等全身并发症；13例无并发症。两组血清HMGB1水平分别为(13.06±9.93)μg/L、(9.05±5.89)μg/L，无统计学差异。33例患者中转外科手术1例，病死2例。

图1 AP患者血清HMGB1水平与Ranson评分的相关性

图2 AP患者血清HMGB1水平与Balthazar CT评分的相关性

讨 论

HMGB1可由活化的单核-巨噬细胞主动分泌，也可由坏死或损伤的细胞被动释放。血清HMGB1水平在正常人群中不易被检测出，但在脓毒症、休克、急性肺损伤、类风湿关节炎、弥散性血管内凝血(DIC)等疾病时明显升高。杨智勇等[4]报道，急性坏死性胰腺炎大鼠血清HMGB1水平明显增高，但AP患者血清HMGB1的水平变化尚未见报道。本研究结果显示，SAP患者血清HMGB1水平显著高于MAP患者，MAP患者又显著高于健康对照组，且血清HMGB1水平与患者性别、年龄、病因无关。

体外培养的小鼠巨噬细胞株RAW 264.7在内毒素(LPS)刺激6～8 h后以时间依赖方式释放大量HMGB1；在小鼠腹腔内注射LPS后8 h可检测出血清HMGB1，并于16～32 h内达峰值[1]。本试验观察AP患者在发病72 h内血清HMGB1水平，结果显示发病24 h内患者血清HMGB1水平开始增高，48 h内达峰值，后开始下降，但至72 h时仍维持在高于正常值水平，提示HMGB1作为一种晚期炎症介质参与了AP的发生，具有延迟释放、介导持续炎症反应的特点。

血清HMGB1水平与入院后Ranson评分、Balthazar CT评分、血CRP和LDH水平呈正相关，表明血清HMGB1水平与AP急性反应期胰腺病变、炎症反应程度有关。血清HMGB1水平与血肌酐值呈正相关，表明HMGB1可能参与了AP时急性肾功能不全的发生。因此HMGB1可作为评估胰腺炎轻重程度的指标之一。但SAP患者伴有全身衰竭或局部并发症者血清HMGB1水平虽高于无器官功能衰竭或局部并发症者，但二者间无显著性差异，与Lindström等[5]的报道相似，但他们发现合并器官功能衰竭的AP患者外周血中HMGB1的可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)水平显著高于无器官功能衰竭者。关于该现象还需更多的临床资料进行验证。

[1] Wang H,Bloom O,Zhang M,et al.HMG-1 as a late mediator of endotoxin lethality in mice.Science,1999,285:248-251.

[2] 中华医学会消化病学分会胰腺病学组.中国急性胰腺炎诊治指南(草案).胰腺病学,2004,4:35-38.

[3] Yamada S,Yakabe K,Ishii J,et al.New high mobility group box 1 assay system.Clin Chim Acta,2006,372:173-178.

[4] 杨智勇,王春友,熊炯炘,等.重症急性胰腺炎大鼠血清高迁移率族蛋白-1水平的时相变化及意义.华中科技大学学报(医学版),2004,33:466-468.

[5] Lindström O,Tukiainen E,Kylänpää L,et al.Circulating levels of a soluble form of receptor for advanced glycation end products and high-mobility group box chromosomal protein 1 in patients with acute pancreatitis.Pancreas,2009,38:e215-e220.

2009-11-23)

(本文编辑：屠振兴)

Serumlevelsandrolesofhighmobilitygroupbox-1proteininpatientswithacutepancreatitis

SHENMei-qin,XIAMin.DepartmentofGastroenterology,WuxiPeople′sHospital,NanjingMedicalUniversity,Wuxi

214023,China

XIAMin,Email：xmzb1013@163.com

ObjectivesTo determine the serum levels of high mobility group box-1 protein (HMGB1) in patients with acute pancreatitis (AP) and to investigate the contributions of HMGB1 in the pathogenesis of AP.MethodsThe serum HMGB1 concentrations were determined by enzyme-linked immunosorbent assay in 33 patients with severe acute pancreatitis (SAP), 38 patients with mild acute pancreatitis (MAP) and 28 healthy controls at the time of admission within 72 h after the onset. THe relationships between the serum HMGB1 levels and sex, age, etiology, disease onset, Ranson score, Balthazar CT score, C-reactive protein, lactate dehydrogenase and serum creatinine, total bilirubin levels, local and systematic complications were analized.ResultsThe serum HMGB1 levels in healthy control group, MAP group and SAP group were (1.82±0.64)μg/L, (6.13±5.80)μg/L and (11.48±6.94)μg/L, respectively. The mean value of serum HMGB1 level in MAP group was significantly higher than that in healthy group (P<0.05), while it was significantly lower than that in SAP group (P<0.05). Within 24 h after disease onset, the serum levels of HMGB1 began to increase, and reached the peak at 48 h, then decreased and remained higher than normal value at 72 h. There were no remarkable relationships between the serum HMGB1 levels and sex, age, etiology, but it was positively correlated with Ranson score, Balthazar CT score, C-reactive protein, lactate dehydrogenase and serum creatinine. The serum levels of HMGB1 in patients with local and/or systematic complications were higher than those in patients without complications, but the difference was not statistically significant.ConclusionsHMGB1 is a late inflammation mediator and serum HMGB1 levels were correlated with the severity of AP. HMGB1 may participate in the development of acute renal insufficiency during SAP.

Pancreatitis, acute necrotizing; High mobility group proteins; Enzyme-Linked immunosorbet assay; Inflammation mediators

10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2010.05.003

214023 无锡，南京医科大学附属无锡市人民医院消化内科(沈美琴现在南通市第一人民医院消化内科)

夏敏，Email：xmzb1013@163.com