中药退黄外洗液的质量标准研究

林冬杰 广西梧州食品药品检验所生测室（543002）

中药退黄外洗液的质量标准研究

林冬杰 广西梧州食品药品检验所生测室（543002）

目的 建立中药退黄外洗液的质量标准。方法 用薄层色谱法鉴定薄荷脑；采用高效液相色谱法对枳壳中的柚皮苷进行含量测定，色谱柱：Agilent SB-C18柱(250 mm×4.6 mm，5μm)，流动相：以乙腈-水，流速1.0ml/L检测波长：λ=283nm，柱温：30℃。结果 柚皮苷在47.6～1190ng范围内线性关系良好（r=0.9999）,平均回收率为99.25%，RSD=0.54%(n=6)。阴性对照无干扰。结论 该法操作简便，结果准确可靠，可作为中药退黄外洗液的质量控制方法。

中药退黄外洗液；HPLC；柚皮苷；中药化学；中成药研究

中药退黄外洗液是由栀子、茵陈、大黄、柴胡、枳壳等16种中药组成。具有行气解郁，利胆退黄功效，主要用于预防和治疗新生儿黄疸，黄疸性肝炎等疾病。该药用于临床疗效较好。为控制该药品的质量，本文采用TLC方法鉴别中药退黄外洗液中薄荷脑，HPLC方法检测中药退黄外洗液中柚皮苷的含量。

1 仪器与试药

安捷伦AgilentLC-1200高效液相色谱仪 ,ChemStation色谱工作站，可变波长检测器，日本AND GR-202电子分析天平。中药退黄外洗液由南宁市第一人民医院制剂室提供；薄荷脑（批号：110728-200506，供含量测定用），柚皮苷（批号：110722-200309，供含量测定用）对照品购于中国药品生物制品检定所；乙腈为色谱纯；水为纯化水；其他化学试剂均为分析纯。

2 薄层鉴别

取本品10ml，置具塞锥形瓶中，加乙醚10ml，振摇数分钟，静置分层，分取乙醚层，浓缩至2.5ml，作为供试品溶液。另取薄荷脑对照品，加乙醚制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-醋酸乙酯(17:3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。按同法实验，其缺薄荷脑的阴性对照无干扰。（见图1）

图1 中药退黄外洗液薄层色谱图

2.1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱 Agilent SB-C18柱(250 mm×4.6 mm，5μm)；流动相乙腈-水（20∶80）；流速1.0ml/min；波长283nm。柱温：30℃，进样量10μl，理论板数按柚皮苷峰计算，应不低于3000。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取柚皮苷11.90mg，置50 ml量瓶中加甲醇使溶解，并稀释至刻度，作为对照品储备液（浓度：柚皮苷238μg/ml）,精密吸取对照品储备液1ml置10 ml量瓶中加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液（浓度：柚皮苷23.8μg/ml）。

2.3 供试品溶液的制备 用内容量移液管精密量取本品1ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度,摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取续滤液，即得。

2.4 阴性对照溶液的制备 取缺枳壳样品按供试品溶液制备方法制备缺栀子阴性对照样品，按2.3 项下供试品溶液的制备方法制备缺枳壳阴性对照溶液。

2.5 专属性试验 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液和对照品溶液各10μl 注入液相色谱仪，记录色谱图2。由图2可见，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，有相同保留时间的色谱峰，阴性对照试验无干扰。

图2 HPLC色谱图A . 对照品 B. 样品 C. 缺枳壳阴性样品 1柚皮苷

2.6 精密度试验 取同一份对照品溶液(柚皮苷浓度为23.8μg/ml)，按2.1项下色谱条件，连续进样6次，测定峰面积积分值，柚皮苷RSD为0.35%（n=6）。结果表明，仪器精密度良好。

2.7 线性关系考察 分别精密量取对照品储备液0.5、1、2、3、5ml置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得不同浓度的对照品溶液。按2.1项下的色谱条件分别吸取上述对照品溶液10μl注入色谱仪，测定，以峰面积积分值为纵坐标（Y），对照品进样量（ng）为横坐标（X）绘制标准曲线，得柚皮苷的回归方程为：Y＝26.84X -11.22（r=0.9999）。结果表明：柚皮苷在47.6～1190ng范围内，进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系。

2.8 稳定性试验 取同一份样品溶液，分别在0，2，4，8，12h，按2.1项下色谱条件进样测定，分别测定峰面积积分值，柚皮苷RSD为1.05%（n =5）。结果表明，柚皮苷在12小时内稳定。

2.9 重复性实验 精密称取同一批(批号：091009)样品 6份，按2.1色谱条件和2.3项下方法试验，结果柚皮苷平均含量是0.742 mg.mL-1，RSD＝1.05%（n =6）。结果表明，本方法重复性良好。

2.10 加样回收率实验 精密量取已测定含量的中药退黄外洗液(柚皮苷含量为0.742 mg/ml)0.5、1、2ml置25ml量瓶中，平行取样6份，精密加入柚皮苷浓度为0.364mg/ml的对照品溶液0.5、1、2ml，加甲醇稀释至刻度，按2.1项下色谱条件及2.3项下的方法制备供试品溶液、测定，计算回收率，结果见表1。柚皮苷的平均回收率为99.25%，RSD=0.54%。结果表明，本方法回收率良好,符合定量分析要求。

2.11 样品含量测定 按上述含量测定方法，测定了本品3批样品中的柚皮苷含量，结果见表2。

3 讨论

3.1 检测波长的选择 参考《中国药典》2005年版一部枳壳中柚皮苷的检测，选定283nm作为柚皮苷的检测波长。

3.2 流动相的选择 本方法考察了流动相乙腈-0.1%磷酸（20∶80）、乙腈-0.5%磷酸（20∶80）、乙腈-水（15∶85）、乙腈-水（20∶80）洗脱条件下对样品中柚皮苷与杂峰分离的情况，结果发现采用乙腈-水（20∶80）洗脱时，样品中的柚皮苷能得到较好的分离，峰形良好，效率高，且流动相配制简单，故采用乙腈-水（20∶80）进行洗脱。

Quality standard for Zhongyaotuihuangwaixiye Lotion

Lin Dong-jie Wuzhou institute for food and drug control,Wuzhou 543002,China

Objective To establish quality standard for Zhongyaotuihuangwaixiye Lotion．Methods Menthol was identified by TLC；Naringin were determined by HPLC． A Agilent SB-C18 Column(250 mm×4.6 mm，5μm) was used．The mobile phase was Acetonitrile一H2O The column temperature was 30℃，The waveleng detection was at 283nm，flow rate was 1.0 ml.min-1.Results The linear range of Naringin was within 47.5～1190ng(r=0.9999)．The average revovery was 99.25%，RSD was 0.54%(n=6).The negative sample had no interference. Conclusion This method is simple，accurate and suitable for its assaying．It can be used for quality control in production of Zhongyaotuihuangwaixiye Lotion.

Zhongyaotuihuangwaixiye Lotion；HPLC；Naringin

10.3969/j.issn.1672-2779.2010.10.170

1672-2779（2010）-10-0194-02

2010-03-05）

表1 柚皮苷回收率测定结果（n=6）

表2 样品测定结果（n=3）