陈朝阳,张锐虎,景志杰,庞文彪,王志平,刘田福
(山西医科大学实验动物中心,太原 030001)
研究报告
山医群体近交系中国地鼠血液生理生化指标的测定分析
陈朝阳,张锐虎,景志杰,庞文彪,王志平,刘田福
(山西医科大学实验动物中心,太原 030001)
目的对山医群体中国地鼠近交A、E家系主要血液生理、生化和血清电解质指标进行检测分析。方法对山医群体中国地鼠近交A、E家系成年动物进行空腹采血,常规方法测定13项血液生理、12项生化以及4项电解质指标,分别对相同性别不同家系间和同一家系不同性别间指标进行统计分析。结果相同性别A、E家系间动物血小板(PLT)、中间细胞数(M ID)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆固醇(TC)、总胆红素(TBiL)、肌酐(Cr)和血钾(K)差异有显著性;相同家系雌、雄动物间PLT、TBiL和尿酸(UA)差异有显著性。结论A、E家系动物间产生了一定的血液生理、生化性状的分离。
中国地鼠;生理指标;生化指标
中国地鼠(Chinese hamster)是黑线仓鼠(Cricetulus barabensis Pallas)的俗称。1980年春山西医科大学薄家璐教授等从北京郊区购回捕获的60只野生中国地鼠,进行近交培育,称为A家系;1981年4月又从北京购回74只中国地鼠进行近交培育,称为E家系。近交繁育至20代已建成近交系,定名为SYBI,并于1992年公布于Bred Strain of Mice杂志[1]。陈朝阳等[2]曾对该群体动物的生长曲线、脏器系数及部分生理学指标等生物学性状进行报道。
到目前为止,A、E家系分别繁殖至47代和38代,随着的近交代数的升高,可能会出现一些生物学性状的分离。对其基础生物学性状的研究,对该品系动物的标准化和科学应用具有重要意义。本文对近交系中国地A、E家系血液生理、生化指标进行了测定和比较分析。
1.1 实验动物
38周龄普通级山医群体近交中国地鼠A家系F47代,山西医科大学实验动物中心提供【SCXK(晋)2009-001】,70只,雌雄各半;E家系F38代70只,雌性34只、雄性36只。饲料成份符合国家标准(GB14924.6-2001)《实验动物地鼠配合饲料》的要求。
1.2 血样采集
动物禁食12 h后,眼眶静脉丛采血2.5 mL。其中EDTA抗凝血1 m L,颠倒混匀,用于血常规检查;非抗凝血1.5 m L,2000 r/min离心20 min取血清,用于生化指标的测定。
1.3 测定指标
1.3.1 血液生理指标:测定红细胞(RBC)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞压积(MCV)、血红蛋白(Hb)、平均红细胞含量(MCH)、平均红细胞浓度(MCHC)、血小板(PLT)、白细胞(WBC)、淋巴细胞数(LY)、中间细胞数(MID)、中性粒细胞数(GR)单核细胞(Mon)、嗜酸细胞(E)等13项指标。
1.3.2 血液生化指标:测定谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBiL)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、Glu(葡萄糖)、高密度脂蛋白(HDL)、尿素氮(UN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、碱性磷酸酶(AKP)等12项指标。
1.3.3 血清电解质指标:测定了血清内钾(K)、钠(Na)、氯(Cl)、钙(Ca)等4项指标。
1.4 检测方法
采用Sysmex公司生产的自动血液分析仪(Sysmex XT.2000iV),测定各项血液生理指标;采用日本日立公司生产的全自动生化仪(automatic biochemical analyzer,Hitachi 7020),常规操作测定各类血液生化和血清电解质指标。生化试剂盒购自美国Sysmex公司。
1.5 统计方法
2.1 血液生理指标比较
山医群体中国地鼠近交A、E家系动物血液生化指标测定结果及比较见表1。同一性别A、E家系动物间PLT和MID差异有显著性;而同一家系不同性别间仅PLT差异存在显著性。其他指标间差异没有显著性。
表1 山医群体近交系中国地鼠血液生理指标(±s)Tab.1 Blood physiological indexes in the Shanyi colony inbred strain of Chinese hamster(±s)
表1 山医群体近交系中国地鼠血液生理指标(±s)Tab.1 Blood physiological indexes in the Shanyi colony inbred strain of Chinese hamster(±s)
*P<0.05,相同家系雌、雄动物间比较;△P<0.05,相同性别A、E家系间动物比较Note:*P<0.05,comparison between females and males of the same family;△P<0.05,comparison between families A and E of the same sex
测定项目A家系(A family) Measurement E家系(E family)♀(n=35)♂(n=35)♀(n=33)♂(n=36) RBC(1012/L)8.438±0.965 8.318±1.239 8.718±0.958 8.505±1.192 HCT(%)38.283±5.082 37.280±5.686 39.703±3.835 38.576±5.669 MCV(fL)45.143±1.478 44.943±1.697 45.639±1.915 45.143±2.158 Hb(g/L)160.743±15.760 157.743±18.318 164.194±16.787 159.235±19.134 MCH(fg)18.600±1.265 18.686±2.349 18.278±1.344 18.371±1.573 MCHC(g/L)417.735±22.186 415.806±88.872 414.306±29.079 417.059±40.099 PLT(109/L)607.257±124.965 658.471±144.379*650.083±171.436△741.182±146.444△*WBC(109/L)3.014±1.755 3.363±1.991 3.719±2.218 3.529±2.236 LY(109/L)2.409±1.264 2.426±1.290 2.772±1.600 2.643±1.469 MID(109/L)0.214±0.237 0.349±0.387 0.358±0.371△0.460±0.465△GR(109/L)0.391±0.350 0.583±0.577 0.536±0.469 0.686±0.577 Mon(109/L)0.034±0.020 0.039±0.024 0.039±0.023 0.041±0.019 E(109/L)0.015±0.010 0.012±0.004 0.013±0.004 0.014±0.008
2.2 血液生化指标比较
山医群体中国地鼠近交A、E家系生化指标测定结果见表2。相同性别不同家系间差异均有显著性的有ALT、TC、TBiL和Cr四项指标;E家系雌性动物Glu高于A家系雌性动物,差异具有显著性。同一家系不同性别间差异有显著性的有TBiL和UA两项指标。
2.3 血清电解质指标
血清电解质指标测定结果见表3。经统计学处理发现,除血清K之外,其他3项指标的测定值在不同家系之间和不同性别动物之间差异均无显著性。A家系的雌、雄动物血清K分别低于E家系,差异具有显著性。
表2 山医群体近交系中国地鼠血液生化指标(±s)Tab.2 Measurement of biochemical indexes in the Shanyi colony inbred strain of Chinese hamster(±s)
表2 山医群体近交系中国地鼠血液生化指标(±s)Tab.2 Measurement of biochemical indexes in the Shanyi colony inbred strain of Chinese hamster(±s)
*P<0.05,相同家系雌、雄动物间比较;△P<0.05,相同性别A、E家系间动物比较Note:*P<0.05,comparison between females and males of the same family;△P<0.05,comparison between families A and E of the same sex
测定项目A家系(A family) Measurement E家系(E family)♀(n=31)♂(n=32)♀(n=34)♂(n=32) ALT(U/L)105.931±44.821 92.600±41.249 81.771±20.405△74.156±19.266△TBiL(umol/L)2.204±0.985 1.464±0.618*2.776±1.911△1.922±0.974*△TPr(g/L)72.613±10.512 75.129±11.260 66.303±7.256 70.656±10.820 ALB(g/L)34.933±5.212 37.567±6.574 35.559±6.698 38.500±5.582 TC(mmol/L)3.936±0.961 3.946±0.897 4.518±0.887△4.448±0.750△TG(mmol/L)1.550±1.378 1.788±1.205 1.226±0.637 1.243±0.696 Glu(mmol/L)3.452±1.201 3.597±0.962 4.219±1.201△3.672±1.051 HDL(mmol/L)2.370±0.599 2.254±0.618 2.688±0.671 2.848±0.585 UN(mmol/L)13.227±4.958 12.77±13.803 14.96±14.910 13.568±2.593 Cr(umol/L)58.484±15.556 60.800±17.553 48.853±17.790△51.531±15.110△UA(umol/L)172.613±103.519 117.000±90.088*150.182±75.383 111.250±57.332*AKP(U/L)128.807±27.216 140.966±38.440 126.000±26.492 132.656±23.720
表3 山医群体近交系中国地鼠电解质指标(±s)Tab.3 Measurement of electrolyte indexes in the Shanyi colony inbred strain of Chinese hamster(±s)
表3 山医群体近交系中国地鼠电解质指标(±s)Tab.3 Measurement of electrolyte indexes in the Shanyi colony inbred strain of Chinese hamster(±s)
△P<0.05,相同性别A、E家系间比较Note:△P<0.05,comparison between families A and E of the same sex
测定项目A家系(A family) Measurement E家系(E family)♀(n=31)♂(n=31)♀(n=34)♂(n=31) K(mmol/L)5.818±0.747 5.813±0.909 6.580±0.905△6.232±0.659△Na(mmol/L)156.258±6.706 156.139±6.566 153.079±7.661 154.697±6.950 Cl(mmol/L)110.684±7.957 108.307±3.475 110.735±5.606 109.229±4.609 Ca(mmol/L)2.332±0.221 2.410±0.286 2.383±0.308 2.397±0.309
本实验采集样本数为山医群体中国地鼠A、E家系动物各70只,因个别样品溶血等原因,测定结果两家系样本数均不足70例。所测指标中,血液生理指标PLT和MID,生化和电解质指标ALT、TC、TBiL、Cr和血K等在相同性别两个家系间差异存在显著性。而同一家系不同性别间存在显著差异的指标仅有PLT、TBiL和UA三项。可见有些指标与性别之间有一定的相关性,而更多项指标的差异存在于不同家系之间。从测定结果分析,提示两个家系已出现一定程度的生物学性状分离,这与对近交系山医群体中国地鼠A、E家系的遗传分析的结果相一致[3]。
中国地鼠近交繁殖有自发性高血糖或糖尿病倾向[4,5]。从所测本群体动物血糖指标来看,E家系雌性动物血糖要高于A家系雌性动物,而E家系雌雄动物间血糖值差异无显著性。A家系近交代数高于E家系,但血糖浓度并不高于E家系,可见血糖高低与近交代数并无直接关系,可能与近交过程中与动物基因遗传漂变有关。因此,利用近交系中国地鼠培育自发性高血糖动物的过程,应不断地监测动物血糖值选择较为稳定的高血糖动物进行近交培育。
本文仅对成年动物的部分血液生理生化指标进行了测定,这主要是由于山医群体近交系动物繁殖与饲养比较困难。兼顾群体数量与样本数量,因此选择测定了成年动物。今后,将进一步对不同周龄动物的主要生物学指标进一步研究和比较分析,为本品系动物的开发和实验提供更为完善的基础生物学数据。
[1]刘田福.中国地鼠山医群体近交系的培育[J].实验动物科学与管理,2003,20(增刊):22-24.
[2]陈朝阳,张瑞虎,景志杰,等.山医群体近交系中国地鼠主要生物学指标的建立[J].山西医科大学学报,2009,40 (5):388-390.
[3]宋国华,刘田福,赵嘉慧,等.近交系中国地鼠山医群体遗传结构的随机扩增多态分析[J].山西医科大学学报,2005,36(3):270-274.
[4]Gerritsen GC.The Chinese hamster as a model for the study of diabetes mellitus[J].Diabetes,1982,31(2):14-23.
[5]孙淑华,刘德惠,田金菊,等.自发NIDDM中国地鼠血液电解质及血脂的变化研究[J].中国实验动物学杂志,1999,9 (4):222-224.
Determ ination and Analysis of Blood Physiological and Biochem ical Indexes in Shanyi Colony Inbred Strain of Chinese Ham ster
CHEN Zhao-yang,ZHANG Rui-hu,JING Zhi-jie,PANG Wen-biao,WANG zhi-ping,LIU Tian-fu
(Laboratory Animal Center of Shanxi Medical University,Taiyuan 030001,China)
Objective To determine and analyze the blood physiological and biochemical indexes in Shanyi colony inbred strain of Chinese hamster.M ethods Thirteen blood physiological,twelve biochemical and four electrolyte indexes in Shanyi colony of Chinese hamster inbred strain families A and E were measured by conventional methods.The differences between both sexes in the same family were analyzed as well as both families of the same sex.ResultsIn the same sex there were significant differences in PLT,MID,ALT,TC,TBiL,Cr and K between families A and E,and PLT,TBiL and UA showed significant difference between both sexes in the same family.ConlusionThere were blood physiological and biochemical characteristics segregation between Shanyi colony Chinese hamster inbred strain families A and E.
Chinese hamster;Colony inbred strain;Physiological indexes;Biochemical indexes
R-332
A
1005-4847(2010)03-00262-03
2010-03-12
山西省自然科学基金资助(编号:20051087);山西省实验动物专项基金项目(编号:2005K02)。
陈朝阳(1972-),男,高级实验师。主要研究方向:实验动物学。
刘田福(1954-),男,教授,硕士生导师。主要研究方向:实验动物学。E-mail:ykdltf@yahoo.com.cn