口服人参皂甙Rg3联合丝裂霉素C膀胱内灌注对表浅性膀胱癌术后血清VEGF的影响

莫乃新 常宝元 吕忠 吴斌 史红雷 王旭刚 钟敏 冯伟 魏汉平

(江苏大学附属武进医院泌尿外科,江苏 常州 213002)

手术是治疗表浅性膀胱癌的首选方法,术后常辅以经尿道膀胱内灌注治疗,以降低复发率,但疗效尚难令人满意。近年来一些研究[1]表明,血管生成抑制剂在抑制肿瘤生长、转移和复发中起着重要的作用。化疗与血管生成抑制剂联合应用,可以提高对肿瘤的治疗效果[2]。血管内皮生长因子(VEGF)能刺激血管内皮细胞增殖、转移并引发病理性血管的形成。为此,我们给表浅性膀胱癌患者术后口服人参皂甙Rg3联合丝裂素C(MMC)膀胱内灌注辅助治疗,并监测VEGF的水平,探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2006年3月—2008年5月,本院手术的表浅性膀胱癌患者65例,其中男性51例,女性14例;年龄21～86(65.6±11.1)岁;其中行经尿道膀胱肿瘤切除术(TURBT)56例,膀胱部分切除术9例;均经术后病理证实为表浅性膀胱癌,术前均未行放疗、化疗或免疫治疗。术后随机将患者分为单纯MMC治疗组(A组)33例;口服人参皂甙Rg3+MMC治疗组(B组)32例;同期健康体检者30例作为对照组(C组)。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 膀胱癌患者于术前、辅助治疗前及辅助治疗后2个月经肘静脉抽空腹血3 mL;健康体检者也经肘静脉抽空腹血3 mL,标本置室温自然凝固后,以 2000 r◦min-1离心10 min,分离血清,小管分装后置-70°C冰箱保存待测。

1.2.2 检测方法 采用Partec流式细胞分析仪测定血清VEGF浓度。试剂盒由美国BD公司提供,由专人进行监测,根据标准曲线求出VEGF浓度。

1.2.3 化疗方法 (1)A组：术后1周开始经尿道膀胱灌注MMC 20 mg+0.9%氯化钠液50 mL 1次/周,连续 8次后改每月1次,持续 1年。(2)B组：使用 MMC方法同 A组,同时口服人参皂甙Rg3(吉林亚泰制药有限公司)20 mg 2次◦d-1,连续服用2个月为1个疗程,持续至少4个月。

1.3 统计学分析 各组数据以均数士标准差表示,采用t检验、方差分析比较组内和组间差异,统计学分析应用SPSS13.0软件完成。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 表浅性膀胱癌患者术前血清VEGF水平(258.0士185.1)pg◦mL-1明显高于健康成人对照组(163.1±95.5)pg◦mL-1,差异有显著统计学意义(P＜0.01)(表1)。

表1 表浅性膀胱癌患者与健康成人对照组血清VEGF水平比较

2.2 辅助治疗后2个月人参皂甙Rg3+MMC治疗组血清VEGF水平(183.8±107.1)pg◦mL-1明显低于MMC治疗组(246.4±177.5)pg◦mL-1,差异有统计学意义(P＜0.05)(表2)。

表2 口服人参皂甙Rg3+MMC治疗组与MMC治疗组血清VEGF水平比较

3 讨 论

上世纪70年代初,Folkman等[3]提出了肿瘤生长和转移依赖于新生血管形成的观点。一般认为,肿瘤较小时,主要依靠弥散活动获得氧气和营养物质,不具有浸润和转移的能力;肿瘤变大,新生毛细血管进入肿瘤,为肿瘤提供丰富的血液供应和养分,促进肿瘤细胞进一步生长,表现出浸润和转移的恶性生物学特性[4]。有研究[5]表明,VEGF蛋白在正常尿路上皮中不表达,而在膀胱癌组织中呈高表达,而且随肿瘤分级、分期的增高,其阳性表达率越高。本研究结果显示：健康成人静脉血VEGF呈低表达,表浅性膀胱癌患者的血清VEGF浓度明显高于健康成人对照组。

人参皂甙Rg3是中药人参中的一种单体成分,属四环三萜皂甙,其结构式为C42H72O13,分子量为784,化学名为 20(R)-达玛烷烯二醇-3-O-β-D-葡萄吡喃糖基(1-2)-β-D-葡萄吡喃糖。其胶囊制剂是我国独立研制和开发的、拥有完全知识产权的国家1类中药单体抗癌新药,是国内第一个运用于临床的肿瘤新生血管抑制剂和免疫增强剂。陈俊霞等[6]通过作体外实验表明,人参皂甙Rg3能显著抑制膀胱癌细胞系EJ细胞生长,且与浓度呈正相关。杨威等[7]通过实验观察发现,人参皂甙Rg3能明显抑制鼠源性膀胱癌细胞系BBT739的粘附力,抑制小鼠膀胱癌的肺转移。人参皂甙Rg3抑制肿瘤血管生成的分子机制主要是其抑制了肿瘤血管生成因子(主要是VEGF)的表达,从而使新生血管减少,促进肿瘤细胞的死亡或凋亡;人参皂甙Rg3还可促进体内一氧化氮(NO)生成,阻碍肿瘤细胞对纤维粘连蛋白和层粘连蛋白的粘附,抑制血管内皮细胞增殖和肿瘤新生血管形成;降低细胞内Ca2+浓度,破坏其在血管壁的着床和进入浸润血管内壁,从而起到抑制肿瘤生长、扩散和转移的作用。本研究结果显示,MMC治疗组2个月后血清VEGF水平较术前虽有降低,但仍明显高于健康成人对照组,说明从短期看单纯MMC膀胱内灌注治疗的抗肿瘤血管生成作用尚不理想;口服人参皂甙Rg3+MMC膀胱内灌注治疗组2个月后血清VEGF已明显低于术前并接近正常组水平,较单纯MMC治疗组明显降低,且两者有显著差异(P＜0.05),表明人参皂甙Rg3联合MMC有较强的抑制血清VEGF表达的能力。本研究采用人参皂甙Rg3与MMC膀胱灌注联合应用,就是利用两者的协同作用,人参皂甙Rg3还有增强人体免疫力的功能,从而有可能进一步降低膀胱肿瘤术后的复发率。

本研究将口服人参皂甙 Rg3联合MMC膀胱内灌注治疗膀胱癌术后患者,初步发现两者有协同治疗作用,从而有可能降低膀胱癌的复发率,值得进一步研究。

1 Iishi H,Tatsuta M,Baba M,et al.Inhibition by ginsenoside Rg3 of bombesin-enhanced peritoneal metastasis of intestinal adenocarcinimas induced by azoxymethane in Wistar rats[J].Clin Exp Metastasis,1997,15：603-611.

2 Morioka H,Weissbach L,Vogel T,et al.Antiangiogenesis treatment combined with chemotherapy produces chondrosarooma necrosis[J].Clin Cancer Res,2003,9：1211-1217.

3 Folkman JD,Amore PA.Blood vessel formation：what is its molecular basis[J].Cell,1996,87(4)：1153-1155.

4 Li CY,Shan S,Cao Y,et al.Role of incipinent angiogenesis in cancer metastasis[J].Cancer Metastasis Rev,2000,19(2)：7-11.

5 Crew JP,Brien J,Brudburn M,et al.Vascular end elial growth factor is a predictor of relapse and stage progression in superficial bladder cancer[J].Cancer Res,1997,51(24)：5281-5285.

6 陈俊霞,彭惠民,蒲淑萍,等.人参皂苷 Rg3诱导膀胱癌细胞系EJ的凋亡作用[J].中国中药杂志,2007,32(16)：1680-1683.

7 杨威,李博,乔世兴.人参皂甙 Rg3抗鼠源性膀胱癌BBT 739黏附、侵袭和肺转移作用的研究[J].中国老年学杂志,2005,5(25)：571-573.