复方中药制剂对人工感染肾型IBV的蛋雏鸡血清免疫球蛋白的影响的研究

贾 丹，陈书明，王志强，贺毅鑫

（1.北京农学院，北京 102206；2.山西农业大学动物科技学院，山西 太谷 030801）

鸡传染性支气管炎（IB）是由鸡传染性支气管炎病毒（IBV）引起的鸡的一种急性，高度接触传染的呼吸道疾病。本病以呼吸道症状、肾脏病变、肠道损害、产蛋下降为主要特征。该病的广泛流行给养鸡业带来严重危害。目前，在药物治疗和疫苗免疫方面均无有效方法，而中草药在药物研究和应用上具有多效性、双向调节和适应性作用等优势。许多滋阴、补血、益气、助阳的中草药物均能提高机体的免疫功能，对动物机体体液免疫、细胞免疫及非特异性免疫功能均有一定的促进作用。

本实验中药复方含有保肝护肾的熟地、山茱萸、茵陈，抗菌抗病毒的板蓝根、甘草，以及提高机体免疫功能的各种药物。本实验通过研究此复方中药对感染肾型传染性支气管炎雏鸡血清球蛋白的影响，以期为中药复方治疗禽病毒性疾病提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验动物

1日龄健康海兰褐蛋雏鸡400羽，购自山西省太谷县韩村种鸡场。

1.1.2 传染性支气管炎病毒

IBV标准T株，购自中国兽药监察所。

1.1.3 实验药品

中药复方（方剂由熟地、山茱萸、板蓝根、茵陈、甘草等组成），采用传统中药煎煮方法将中草药制成水煎液，并浓缩成1 g/mL，作为实验药剂。由山西伟业生物技术有限责任公司提供。病毒灵、电解多维、安肾灵。

1.1.4 主要仪器

酶标仪、漩涡振荡器、电热鼓风干燥箱、自动双重纯水蒸馏器、手提式灭菌器、超低温冰箱、生物洁净工作台、微量可调移液器等。

1.2 试验方法

1.2.1 IBV抗体测定（双向琼扩试验）

将雏鸡饲养至18日龄时，每组随机取5羽，心脏采血，离心，取血清进行IBV抗体检测。

1.2.2 动物分组及处理

在雏鸡21日龄时挑选360羽健康、体重均匀的雏鸡，随机分成6组，每组60羽，分别是空白对照组、攻毒对照组、复方中药高剂量组、中剂量组、低剂量组、西药治疗组。除空白组外，其余组当天气管攻毒（0.2 mL/羽）。攻毒后48 h～72 h在多数出现临床症状后饮水给药，每日2次，连续给药6天。高、中、低剂量组以及西药治疗组的给药剂量分别为1.5%，1.0%，0.5%，1g/L。

1.2.3 样本的采集与处理

分别于给药后 3、6、9、14、19 d 时，每组随机取鸡 5 羽，无菌心脏采血，用肝素钠抗凝。

1.2.4 血清中IgG、IgA、IgM的测定

按免疫球蛋白试剂盒说明操作。

1.2.5 数据处理

测定结果以“平均数±标准差”表示，用SPSS12.0进行数据分析。

2 结果与分析

2.1 各组鸡血清IgG含量测定结果

见表1，统计结果显示，血清IgG含量，攻毒对照组在给药后3 d、6 d、9 d高于空白对照组，在给药后14 d、19 d低于空白对照组，但差异都不显著（P＞0.05）。给药后 3 d、6 d、9 d、14 d 各治疗组与攻毒对照组血清IgG含量差异显著（P＜0.05），给药后19 d高剂量组和攻毒对照组差异显著（P＜0.05）。给药后3 d，高、低剂量组之间差异显著（P＜0.05）；给药后6 d高、低剂量组和西药组差异显著（P＜0.05），中、低剂量组之间差异显著（P＜0.05）；给药后9 d高、中剂量组与低剂量组差异显著（P＜0.05）；给药后14 d高、中剂量组与低剂量组和西药组差异显著（P＜0.05）；给药后19 d高剂量组与其它治疗组差异显著（P＜0.05）。

2.2 各组鸡血清IgA含量测定结果

见表2，统计结果显示，攻毒对照组与空白对照组在给药后6 d血清IgA含量差异显著（P＜0.05）。给药后3 d、9 d、14 d各治疗组与攻毒对照组血清IgA含量差异显著（P＜0.05），给药后6 d、19 d高剂量治疗组与攻毒对照组差异显著（P＜0.05）。给药后3 d各治疗组之间差异不显著（P＞0.05）；给药后6d高剂量组与低剂量治疗组和西药治疗组差异显著（P＜0.05）；给药后9 d、14 d高剂量治疗组与低剂量治疗组和西药治疗组差异显著（P＜0.05）；给药后19 d高剂量组与低剂量组和西药治疗组差异显著（P＜0.05）。

表1 各组鸡血清IgG含量测定值（单位：g/L）

表2 各组鸡血清IgA含量测定值（单位：g/L）

表3 各组鸡血清IgM含量测定值（单位：g/L）

2.3 各组鸡血清IgM含量测定结果

见表3，统计结果显示，攻毒对照组除了在给药后19 d血清IgM含量低于空白组，其它时间均高，但差异不显著（P＞0.05）。给药后3 d、6 d、9 d、14 d各治疗组与攻毒治疗组血清IgM含量差异显著（P＜0.05），给药后19 d高剂量治疗组与攻毒对照组之间差异显著（P＜0.05）。给药后3 d高剂量组与低剂量组差异显著（P＜0.05）；给药后6 d、9 d高剂量治疗组与低剂量组和西药治疗组差异显著（P＜0.05）；给药后14 d高剂量组与低剂量组和西药治疗组差异显著（P＜0.05）；给药后19 d高剂量组与低剂量治疗组和西药治疗组差异显著（P＜0.05）。

3 讨论与结果

复方中药制剂对人工感染肾型传染性支气管炎病毒雏鸡外周血免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）的影响血清中IgG、IgA、IgM的含量是机体免疫器官组织中的体液免疫活性细胞产生的体液免疫分子，在血液中的体现，是体液免疫系统功能状态的重要指标[9]。

本实验结果显示，攻毒对照组免疫球蛋白含量高于空白对照组，其中，IgA含量在给药后6 d与空白对照组差异显著（P＜0.05）。IgG含量除给药后19d各治疗组与攻毒对照组差异显著（P＜0.05），高、中剂量组之间差异不显著（P＞0.05），但高剂量组高于中剂量组，高剂量组与低剂量组和西药组在给药后6 d、14 d差异显著（P＜0.05），中、低剂量组与西药组差异不显著（P＞0.05）。IgA含量各治疗组都高于攻毒对照组；高、中剂量组差异不显著（P＞0.05），高剂量组与低剂量组和西药组在给药后6 d、9 d、14 d差异显著（P＜0.05），中、低剂量组与西药组差异不显著（P＞0.05）。IgM含量除给药后19 d各治疗组与攻毒对照组差异显著（P＜0.05）；各治疗组之间在给药后3 d差异不显著，随后高剂量组与低剂量组和西药组差异显著（P＜0.05），中、低剂量组和西药组差异不显著（P＞0.05）。结果表明，实验中药复方可以促进机体免疫球蛋白含量增加，提高攻毒机体的体液免疫功能，高、中剂量治疗组效果优于低剂量组和西药治疗组。

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