母猪早孕胶体金检测试纸法与其它方法的比较

刘 薇

（北京万华生物工程有限公司，北京 102200）

母猪的早期妊娠诊断是提高母猪繁殖效率和养猪业生产效益的重要技术措施，母猪配种后，能够尽早地妊娠确诊，能够减少母猪的空怀期或非繁殖天数，可以提高母猪的平均年产仔窝数，并有利于对繁殖障碍母猪的及早治疗处理。目前普遍采用的母猪早期妊娠诊断技术方法很多，本文就当前较成熟、简便、普遍应用的早期妊娠诊断技术综述如下。

1 返情观察法

母猪的发情周期为18～22天，依据母猪的发情周期来判断配种后母猪是否出现发情现象。多采用公猪试情与人工查情相结合，每天固定时间让公猪与母猪接触，如果母猪对公猪表示出兴趣，查情人员则进一步观察母猪的返情症状，如压背反应、阴户肿胀、竖耳、鸣叫等。确定母猪返情之后则认定母猪没有受孕，而没有发情的就认为已经妊娠。但该法早期诊断妊娠会受一些因素影响，实际上没有返情的母猪可能不一定是妊娠，其它一些原因，如母猪安静发情、乏情、卵巢囊肿等能导致母猪不发情。此外，外部环境如猪场管理混乱、饲料中含有霉菌等毒素、炎热、母猪营养不良时，则母猪持续乏情或假妊娠率会增高。因此，观察法不够准确，但该方法简单易行，是最常用的妊娠诊断方法。

2 注射雌激素检测法

即为用注射激素来判断母猪是否妊娠的方法，但过早使用雌性激素可引起猪体内内分泌紊乱致长期不发情，此法实用性有待进一步探讨。

（1）孕马血清促性腺激素（PMSG）法：母猪妊娠后有许多功能性黄体，抑制卵巢上卵泡发育。功能性黄体分泌孕酮，可抵消外源性PMSG和雌激素的生理反应，母猪不表现发情即可判为妊娠。方法是于配种后14～26天的不同时期，在被检母猪颈部注射700IU的PMSG制剂，以判定妊娠母猪并检出妊娠母猪。判断标准：以被检母猪用PMSG处理，5天内不发情或发情微弱及不接受交配者判定为妊娠；5天内出现正常发情，并接受公猪交配者判定为未妊娠。

（2）己烯雌酚法：对配种16～18天母猪，肌肉注射己烯雌酚1mL或0.5%丙酸己烯雌本分和丙酸睾丸酮各0.22mL的混合液，如注射后2～3天无发情表现，说明已经妊娠。

（3）注射雌二醇：在配种后的第17天注射低剂量的雌二醇，如果母猪妊娠，则3～5天内母猪没有明显变化，如果未孕，母猪会表现发情征状。这种方法显然有一定的风险性，如果日期计算不准，处于配种后21～28天的妊娠母猪，注射雌激素可诱导母猪假孕；如果剂量过大，也会使配种后17天的妊娠母猪妊娠中止；处于假孕状态的母猪，用此方法也会出现假阳性结果。

3 直肠触诊法

由于初产母猪或接近临产期的经产母猪的骨盆腔和直肠通常很小，不利于检查。此方法只适用于大型经产母猪。操作者把手伸入直肠，如有粪便应先掏出，触摸子宫，妊娠子宫内有羊水，子宫动脉搏动有力，而未妊娠子宫内无羊水，弹性差，子宫动脉搏动很弱，很容易判断是否妊娠。但如果检查时误把髂外动脉或其分支之一当作子宫中动脉，则会造成假阳性诊断。此外，该法对技术人员的技术水平和经验有较高的要求，且操作者体力消耗很大，又必须是大型经产母猪，所以生产中较少采用。

4 超声波诊断法

超声诊断法是根据超声波回声来检查妊娠的一种物理学诊断方法。

（1）B型超声波诊断仪：B型超声诊断仪可通过探查胎体、胎水、胎心搏动及胎盘等来判断妊娠阶段、胎儿数、胎儿性别及胎儿状态等。具有时间早、速度快、准确率高等优点，但价格昂贵、体积大，只适用于大型猪场定期检查。

（2）多普勒超声波诊断仪：该仪器可通过测定胎儿和母体血流量、胎动等做较早期诊断。当周围环境中有噪音干扰或直肠探查部位有粪便阻塞时会出现假阴性诊断。此种方法一般需要用不同妊娠期探查的录音进行比照。

（3）A型超声波诊断仪：是利用超声波来检查充满积液的子宫，声波从妊娠的子宫反射回来，并被转换成声音信号或示波器屏幕上的图像，或通过二极管形成亮线。这种仪器体积较小，操作简便，几秒钟便可得出结果，适合基层猪场使用。但膀胱积液、子宫积脓和子宫内膜水肿容易造成假阳性诊断结果。另外，这种诊断仪应注意其应用的对象，一些对大家畜使用的诊断仪应用于猪时，可能会使所有的被测对象都呈阳性。

5 血小板计数法

血小板显著减少是早孕的一种生理反应，根据血小板是否显著减少就可对配种后数小时至数天内的母畜做出超早期妊娠诊断为胚胎附植前的妊娠诊断开辟了新的途径。

在母猪配种当天和配种后第1～11天从耳缘静脉采血20μL置于盛有0.4mL血小板稀释液的试管内，轻轻摇匀，待红细胞完全破坏后再用吸管吸取一滴充入血细胞计数室内，静置15min后，在高倍镜下进行血小板计数。配种后第7天是进行超早期妊娠诊断的最佳血检时间，此时血小板数降到最低点（250±91.13）×103/mm3。

该方法虽有时间早、准确率高等优点，但应排除某些疾病所导致的血小板减少。例如，肝硬化、贫血、白血病及原发性血小板减少性紫癜等。

6 激素测定法

妊娠母猪体内激素发生变化，其中以孕酮（Progesterone，P4）的变化最为明显，孕酮是黄体和胎盘分泌的一种类固醇激素，一个情周期表现由低逐日上升，15天达到高峰期其后下降，到19天左右降到最低水平0 ng/mL，维持1天左右，又逐渐上升。猪受孕后孕酮继续维持较高水平，26～30天尿液孕酮达到0.05μg/mL应用血清中的孕酮浓度来诊断妊娠，其灵敏度可高达97%以上。实验室操作错误可能会导致诊断结果假阴性。

激素的测定可以采用放射免疫法或酶联免疫反应试验盒，这些方法准确性较高，但存在一个明显的限制条件就是需要采取血样，较繁琐，且费用较高，一般用于进行科学研究，不适用于商品猪场。

7 免疫胶体金快速检测法

本法是针对激素测定的一个新方法，通过捕捉到母猪妊娠期孕酮周期性变化的规律，利用胶体金免疫层析法原理，以孕酮作为检测目标物，以孕酮水平判断母猪是否妊娠。采用孕酮配对的单克隆抗体，使得灵敏度、特异性大大增强，利用胶体金免疫层析双抗夹心法，在情周期的规律中能正确的表达准确的诊断效果。取样方便，直接取待测母猪尿液即可检测。由于情周期孕酮的变化规律，此方法使用检测的日期推荐在猪配种后第23天为最后一天检测时间，配种后19、20、21、22天要密切观察猪的行为表现，一旦发现猪有发情的表现应立即进行检测，试剂板出现一条红线为阴性，确定为未怀孕，要及时配种，可避免假发情情况。在此期间内未出现发情表现者，在配种后23天为最后检测期限，在试剂板出现一条红线为阴性，表示未怀孕，可避免由于乏情延误诊断，出现两条红线为阳性，可确定猪已怀孕，应进入妊娠期管理。如果需要第2个情期复诊，可在配种后的第40天左右进行检测，孕猪复查可在任何时期进行。

猪早孕胶体金快速检测试剂用于猪早期妊娠诊断，具有准确率高、操作简便、检测迅速、常温储存、携带方便、对母体和胎儿安全无害等特点，因此极具实用性及推广应用前景。 □

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