犬瘟热的诊断与治疗研究

2010-06-09 02:49曲明祥山东省青岛市畜牧兽医研究所266100
山东畜牧兽医 2010年2期
关键词:犬瘟热试纸化验

曲明祥 (山东省青岛市畜牧兽医研究所 266100)

病犬的各种分泌物、排泄物和血液都含有大量病毒,并可随呼吸道分泌物和尿液排出体外。犬瘟热潜伏期3~6d,初期体温升高为39~1℃,2~3d后可见白细胞减少,3~5d后体温再升高,并且临床症状加重,多继发感染,精神高度沉郁,食欲下降甚至废绝,急剧消瘦,单侧或双侧眼结膜炎或角膜炎,脓性眼屎,后期出现神经症状;幼犬还易发生下腹部脓性皮疹与病犬接触或通过污染的空气或食物而经呼吸道和消化道感染。但是,CDV对热和干燥敏感,50~60℃,30min即可灭活,在炎热季节不能长期存活,故该病流行于冬春寒冷季节;此外,CDV也对紫外线和碱性溶液敏感,可见光容易将病毒灭活,临床上可用3%氢氧化钠(火碱)、漂白粉作为消毒剂。

虽然犬瘟热是一种高度接触性的高致死性传染病,现今没有特效药,但随着生命科学事业的不断进展,各种高新尖生物学技术在兽医学的应用,伴随着量变的不断积累,犬瘟热的最终克服也会在不久的将来得以实现。

随着现代生命科学对病毒学的研究进一步深入,CDV再次引起了研究人员对这种高致病性、高死亡率病毒的重视,并取得了一定的进展。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物 2007年4月在本单位宠物医院就诊的6只病犬。

1.1.2 化验仪器和检测试纸 Bost-3100全自动血细胞分析仪,此仪器采用WINDOWS CE分析、处理平台,结合先进的前端数据采集系统。韩国进口犬瘟热病毒抗原快速检测试纸。

1.1.3 药品选择 犬瘟热单克隆抗体、安乃近、氯霉素眼药水等。

1.2 方法

1.2.1 临床检查 测量体温。对患病犬只进行常规临床检查,检查眼睛浓性分泌物、鼻子、呼吸。

1.2.2 血常规化验 采用Bost-3100全自动血细胞分析仪将血液吸样、稀释并进行分析。

操作方法:取头皮针、3ml一次性注射器、抗凝管各1个,准备酒精棉球,找到疑似犬瘟热病犬的前肢静脉,抽取1ml~3ml血液,抽样完毕后及时快速地进行血液化验分析,写出血常规检测报告。

1.2.3 CDV试纸法 采用犬瘟热病毒抗原快速检测试纸(Anlgen Rapid CDV Ag Test Kit)以免疫色谱分析法定性地检测犬类眼部分泌物、鼻液、唾液中的犬瘟热病毒抗原。

在Anlgen犬瘟热病毒抗原快速检测试纸条表面有字母“T”和“C”作为测试线和控制线。在提供任何样品前,测试线和控制线在结果窗口中都不显示。如果测试正常地完成,控制线试剂会工作,而且控制线会始终显示。如果在样品中含有足够的犬瘟热病毒抗原,一条紫色的测试线会在结果窗口中显示在测试线处绑定了特异性的犬瘟热病毒抗体用来捕捉和检测该抗体。

测试步骤:(1)用已经被生理盐水沾湿的棉棒收集犬类眼部分泌物(或结膜)、鼻液或者唾液。(2)将棉棒浸入装有300µl反应缓冲液的样品收集管或者用滴管向装有300µl反应缓冲液的样品收集。(3)将棉签上的样品和反应缓冲液充分混匀。(4)取出试纸,将它平放于宽敞和干燥的表面。(5)用滴管向样品孔中缓慢并准确地加入4滴混合液,滴稀释缓冲液准确缓慢地一滴一滴地加入。(6)当反应进行时,会看到紫色的条带在试纸中间的结果窗口中移动。5~10min后判断结果。

图1 CDV快速检测试纸的样品收集管

1.2.4 治疗方案 对3组患病犬只分别用3种不同处方进行治疗。

处方一:对症治疗(体温高、角膜发炎、眼结膜发红等)。安乃近注射液,0.3g/次,肌注,2次/d。氯霉素眼药水,4滴/次,点眼,3次/d,一直用药到症状消失作为一个疗程。

处方二:针对病毒治疗。单克隆抗体,1.5ml/kg肌注,1次/d,连用3d,7d作为一个疗程。

处方三:综合治疗(针对病毒及临床症状)。(1)犬瘟热单克隆抗体,1.5ml/kg,股内侧肌注。(2)安乃近注射液,0.3g/次,肌注,2次/d。(3)氯霉素眼药水,4滴/次,3次/d。(4)乳酸林格钠液,20ml/kg;头孢噻肟钠,0.04g/kg;三磷酸腺苷,2mg/kg;辅酶A,5u/kg;维生素C,0.02g/kg;混合1次性静滴。(5)双黄连粉针,1mg/kg,肌注,1次/d。注:其中(1)1次/d;(4)2次/d,连用1周,配合对症治疗。

2 结果与分析

2.1 临床检查结果

通过对试验动物详细的身体检查,体温普遍较高,达39~41℃,角膜炎症较明显,流泪、眼结膜发红、眼睛有浓性分泌物 。鼻镜发干,有鼻液流出,干咳,呼吸困难。嗜睡、精神高度沉郁,食欲下降,身体虚弱消瘦。图2为典型患犬瘟热病的临床症状。

图2 典型患病犬只

图3 CDV检测试纸检测结果对照

由于犬瘟热病毒的影响,患病犬只表现出相应的临床症状,病毒侵入机体,机体产生抵抗,导致体温升高,机体水分缺乏出现鼻镜干燥,由于犬瘟热病毒已经侵入病犬呼吸系统,所以会引起病犬的各种呼吸系统病症,导致干咳和呼吸困难。

2.2 血常规化验结果

所有患病犬只淋巴细胞及白细胞都明显减少,6×109/L以下,其他未见异常。

2.3 犬瘟热病毒抗原快速检测试纸化验结果及分析

如图3所示,上面一个为最新检测结果,下面一个为阴性对照试纸板,经犬瘟热病毒抗原快速检测试纸的化验得出结论为阳性,证明宠物狗携带犬瘟热病毒。

由于患病犬只携带犬瘟热病毒所以CDV测试试纸内有效成分发生反应,进行免疫色谱分析检测到CDV的存在,所以显示为阳性。

2.4 治疗结果

三种处方的治疗效果明显不同。处方一没有采用单克隆抗体,也没有采用抗病毒药,仅仅对症治疗,导致病犬最终死亡;处方二仅仅采用单克隆抗体,没有进行响应的对症治疗,最终未能达到理想治疗效果;处方三采用单克隆抗体和对症治疗药物进行联合用药治疗,最终患病犬只6d康复出院,花费治疗时间最短,效果显著,所以第三方案为是最佳治疗方案。

3 讨论

3.1 临床检查

临床常规检查对犬瘟热确诊较为困难,故一般根据流行病学和临床症状作出初步诊断。根据临床经验,若同时出现以下症状的两种,就要首先怀疑是犬瘟热:(1)双相热:即发病初期体温升高(39~41℃)1~2d,后趋于正常,3~4d后又再次发热。(2)病情迁延不愈:对症治疗效果不明显,如初期轻微的咳嗽、流涕症状,通过消炎治疗收效甚微、恶化、甚至转归肺炎;呕吐、稀便,通过多日输液消炎,仍无法彻底控制(但必须先排除犬细小病毒)。(3)双眼结膜炎,有大量粘性脓性分泌物。(4)出现神经症状,莫名的不正常表现。(5)脚垫及鼻境出现干燥甚至干裂严重现象。

由于常规普通的临床诊断仅仅是怀疑,不能真正确诊,所以一般采用犬瘟热病毒抗原快速检测试纸进行CDV检测确诊最佳。

3.2 血常规化验分析

血常规化验可以了解患病犬只的白细胞、红细胞等细胞的基本情况,及时发现病情的严重性。血常规化验时应注意血液抽取的选材和血液的保存,虽然抗凝管有一定的抗凝作用,但是如果较长时间放置仍然会出现凝血现象,会严重影响化验结果,另外对于血常规细胞分析仪的全血和预稀释的操作不能混淆,否则结果截然不同,极有可能造成误诊。

3.3 CDV试纸检测结果判定

如果在结果窗口中出现一根条带说明是阴性结果。如果在结果窗口中出现两根条带(“T”和“C”),无论哪条先出现都表明阳性结果。如果在反应开始后紫色条带看不见,结果可被认为是无效的,可能使用方法不当或者试纸条已经变质,要重新测试样品。

特别注意:检测试纸出现的两根条带(“T”和“C”)由于受到外界环境的影响,20min后出现的结果是无效的。

3.4 CDV的治疗

对较早出现消化道症状如呕吐、腹泻、脱水的犬,在静脉输液时给予充分电解质平衡液如复方氯化钠或葡萄糖氯化钠等,同时增加能量的投入如ATP、辅酶A等。对肺功能差和呼吸困难的患犬,减少输液量以防医源性肺水肿,给予平喘、镇静的药物如氨茶碱、氯丙嗪、安定等。对出现神经症状的患犬,可口服扑癫酮或苯妥英钠以缓解症状。本试验中CDV的最佳治疗方案是:首先采用犬瘟热单克隆抗体配合安乃近降温、氯霉素眼药水滴眼等联合用药达到比较理想的治疗效果。

4 结论

4.1 诊断方法

经过对犬瘟热的诊断与治疗的研究可以得出结论:CDV试纸法较临床检查、血常规化验两种方法方便、快捷,诊断准确率高等优点,是犬瘟热诊断的最佳方法。

4.2 犬瘟热的最佳治疗方案

处方三治疗的病犬采用犬瘟热单克隆抗体控制犬瘟热病情的发展后,再采用药物安乃近、氯霉素眼药水等对症治疗,治疗效果显著,达到了最佳治疗效果。对于犬瘟热临床症状明显,但是在犬瘟热初期或中期注射CDV单克隆抗体,配合对症药物进行治疗,防止出现更严重的临床症状,大大缩短治愈时间,是本试验治疗犬瘟热的最佳方案。

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