小青龙汤中药提取物配方颗粒汤剂与传统汤剂的比较研究

任大伟 ，王淑君 ，李 平 ，刘 琼

（1.上海绿谷制药有限公司，上海 201203；2.郑州大学第一附属医院，河南郑州 450052）

单味中药提取物配方颗粒是以中药材经炮制后的饮片为原料，按照药物性质选择不同方法进行大工业提取，并经适当浓缩、干燥、制粒等工序精制而成并定量包装颗粒剂，使用时按处方当量调剂后热开水冲兑即可，既保留了中药饮片的药性药效，又不需煎煮，易于调剂、使用方便、质量可控，符合现代消费与生活需求，是传统饮片汤剂现代化改革的一种形式[1]。笔者曾对四逆汤配方颗粒进行了研究，取得了满意的结果，为进一步探讨单味中药提取物配方颗粒的制备方法及成分变化情况，笔者对小青龙汤配方颗粒与传统饮片汤剂进行了比较研究。

小青龙汤始载于《伤寒杂病论》，为治疗风寒感冒的重要方剂，由麻黄、桂枝、芍药、细辛、半夏、五味子、干姜、甘草共八味药组成，其中麻黄含麻黄碱，芍药含芍药苷，甘草含甘草次酸等有效成分，本研究根据有效成分的性质及方剂特点进行了单味中药提取物配方颗粒的制备，用薄层色谱法对单味中药提取物配方颗粒汤剂和传统汤剂化学成分进行定性定量比较，现将实验结果报道如下：

1 仪器与试药

CS-930双波长薄层扫描仪（日本岛津）；麻黄、桂枝、芍药、甘草、细辛、干姜、半夏、五味子生药饮片均购自河南省药材公司，经河南省药材公司侯惠鸣副主任中药师鉴定为正品。试剂为分析纯，芍药苷、甘草次酸、麻黄碱标准品均购自中国药品生物制品检定所。

2 方法与结果

2.1 样品制备

2.1.1 单味中药提取物配方颗粒及其汤剂的制备 麻黄、桂枝、细辛、干姜、五味子分别提取挥发油后，残渣按 1∶20，1∶10加水提取两次，分别为3、1.5 h，合并提取液，80℃以下浓缩至适当浓度，喷雾制粒，60℃干燥，加入挥发油，定量包装即可；芍药、甘草、半夏直接按上比例加水，煎煮时间分别为4、3 h，煎煮液在80℃以下浓缩至适当浓度，喷雾制粒，定量包装，备用。

按处方量取单味中药提取物配方颗粒，以80℃热开水冲兑。本实验为方便起见，冲兑成1 000 ml，制成配方颗粒汤剂，备用。

2.1.2 传统汤剂的制备 取小青龙汤处方量调剂，按1∶20、1∶10加水煎煮两次，12层纱布过滤后，合并煎出液，定容到1 000 ml，备用。

2.2 单味中药提取物配方颗粒汤剂与传统汤剂的比较

2.2.1 两种汤剂中麻黄碱的成分比较[2]

2.2.1.1 麻黄碱的含量测定 分别精密量取饮片汤剂及颗粒汤剂各60 ml，用10%Na2CO3调节 pH至 12～13，置分液漏斗中分别以乙醚萃取6次，合并萃取液于三角烧瓶中，回收乙醚后，用95%乙醇定容至1 ml量瓶中，备用。取上述两种溶液6μl、1.895 mg/ml的麻黄碱对照品溶液 3μl，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以正丁醇∶乙醇∶水∶40%乙醛（16∶1∶4∶2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.20%茚三酮乙醇液，110℃烘10 min，两种汤剂显示相同颜色的斑点，表明成分的一致性。在CS-930型薄层扫描仪上对麻黄碱扫描定量（扫描条件：双波长反射法锯齿形扫描，λs 500 nm，λR为 700 nm，Sx＝3，灵敏度：中，狭缝：1.2 mm×1.2 mm），折算为一个处方量中含量，结果见表1。

表1 传统汤剂及配方颗粒汤剂中麻黄碱含量比较Tab.1 Comparison of the ephedrine content between Traditional Decoction and Dispensing Granule

2.2.1.2 麻黄碱回收率试验 采用加样回收法。精密取已知含量的样品，分别精密加入一定量的麻黄碱对照品，按上述方法制备样品，按麻黄碱的测定项下薄层扫描条件进行扫描测定，结果见表2。

表2 麻黄碱回收率试验Tab.2 Recovery test of the ephedrine

由表2可知，传统汤剂与单味中药提取物配方颗粒汤剂相关成分薄层层析图谱一致；单味中药提取物配方颗粒汤剂麻黄碱含量高于传统汤剂，且含量较为稳定。

2.2.2 两种汤剂中芍药苷的成分比较[3]分别精密量取饮片汤剂和颗粒汤剂各60 ml，用10%HCl调pH至2～3，置分液漏斗中分别用乙醚萃取6次，合并萃取液于三角烧瓶中，水浴挥发乙醚后，用95%乙醇定容至1 ml量瓶中，备用。取上述两种溶液各6μl及1.956 mg/ml的芍药苷对照品溶液9μl，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以氯仿∶甲醇∶乙酸乙酯（8∶3∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，碘蒸气显色。在与对照品溶液色谱相应位置上，两种汤剂显相同的黄色斑点，以CS-930型薄层扫描仪对芍药苷进行扫描定量（扫描条件：双波长反射法锯齿形扫描，λS为 415 nm，λR为 650 nm，Sx=3，狭缝：1.2 mm×1.2 mm，灵敏度：中），折算为一个处方量中含量，结果见表3。

由表3可知，传统汤剂与单味中药提取物配方颗粒汤剂相关成分薄层层析图谱一致；单味中药提取物配方颗粒汤剂芍药苷含量明显高于传统汤剂，且含量较为稳定。

2.2.3 两种汤剂中甘草次酸的成分比较[4]

2.2.3.1 甘草次酸含量测定 精密吸取饮片汤剂及颗粒汤剂各80 m1，加盐酸6 ml，回流提取1 h，置分液漏斗分别以氯仿萃取4次，合并氯仿液水浴回收氯仿至干，残渣以乙醇溶解并定容至2 ml，在同一硅胶G薄层板上分别点样8μl、2.036 mg/ml的甘草次酸标准品溶液8μl，用石油醚 （30～60℃）∶苯∶乙酸乙酯∶冰醋酸（10∶20∶7∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸乙醇液，在105℃烘5 min，两种汤剂显相同颜色的斑点，以CS-930型薄层扫描仪上对甘草次酸进行扫描定量（扫描条件：双波长反射法锯齿形扫描，λs=665 nm，λR=400 nm，Sx=3，灵敏度：中，狭缝：1.2 mm×1.2 mm），折算为一个处方量中含量，结果见表4。

表3 传统汤剂及配方颗粒汤剂中芍药苷含量比较Tab.3 Comparison of the paeoniflorin content between Traditional Decoction and Dispensing Granule

表4 传统汤剂及配方颗粒汤剂中甘草次酸的含量比较Tab.4 Comparison of the cyrrhetinate content between Traditional Decoction and Dispensing Granule

2.2.3.2 回收率试验 采用加样回收法。精密取已知含量的样品，分别精密加入一定量的甘草次酸对照品，按上述方法进行样品制备和含量测定，结果见表5。

表5 甘草次酸回收率实验Tab.5 Recovery test of cyrrhetinate

由表5可知，传统汤剂与单味中药提取物配方颗粒汤剂相关成分薄层层析图谱一致；单味中药提取物配方颗粒汤剂甘草次酸含量明显高于传统汤剂，且含量较为稳定。

2.3 结果

2.3.1 传统汤剂与单味中药提取物配方颗粒汤剂薄层层析图谱一致。

2.3.2 单味中药提取物配方颗粒汤剂中有效成分均高于传统汤剂，但不同成分高出的倍数不尽一致。

2.3.3 单味中药提取物配方颗粒汤剂有效成分含量稳定，RSD值小，表明其重现性好。

3 讨论

单味中药提取物配方颗粒汤剂的成分含量与传统汤剂差别较大，代替饮片汤剂应进行处方调剂当量的研究。

本研究为保持与传统汤剂以水为提取溶媒的一致，采用提取挥发油后再水提的配方颗粒制备方法。配方颗粒制备应通过研究确定不同的方法。

单味中药提取物配方颗粒汤剂制备时以热开水冲兑，尽量提高温度，有利于接近制备饮片汤剂的高温条件，使两者尽量趋于一致。

配方颗粒汤剂与传统汤剂的等效性应从成分的比较、药效的比较和临床疗效的比较3个方面进行综合评价[5]，本研究仅对小青龙汤配方颗粒汤剂与传统汤剂的成分进行了比较，药效和临床疗效的比较有待进一步研究。

临床疗效问题是制约配方颗粒汤剂临床推广的关键因素之一，而质量稳定才能保证疗效，因此，中药配方颗粒质量标准的研制和发展，是临床大规模推广使用的基础和前提[6-8]。

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[2]任大伟,董霄汉,张广强,等.中药煮散临床应用研究(二)——小青龙汤饮片煎剂与颗粒煎剂的化学成份对比分析[J].河南中医,1989,(4):20-24.

[3]钟立贤,王运荣,李世芳,等.汤剂改进研究——复方小青龙汤浓煎剂的研究[J].中成药研究,1983,(1):7-10.

[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].一部.北京:化学工业出版社,2005:59-60.

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[8]王政,谢素治.中药配方颗粒和传统饮片的化学成分及药效学研究概述[J].海峡药学,2004,16(12):78-80.