EB病毒抗体检测在儿童 EB病毒感染相关疾病临床诊断中的应用价值

贵阳医学院检验系临床微生物免疫教研室(贵阳 550004) 周 艳 艾 芳

EB病毒感染是儿科比较常见的病毒感染性疾病,感染的婴幼儿多为隐性感染,在学龄前儿童和青少年则表现为传染性单核细胞增多症(Infectious mononucleosis,IM),感染时期症状轻重不一,可累及全身多个系统诱发多种疾病,很多时候不能早期诊断,给临床诊断带来困难。EBV感染的血清学反应复杂多样,尽管抗 EBV衣壳抗原抗体 (EBV-CA-IgM)是EBV原发感染急性期的指标,但是有些病例抗 EBVCA-IgM产生可能出现延迟,或一直阴性,也可能持续数月[1,2],这给临床原发性 EBV感染的早期诊断造成一定的困难。我们采用德国欧蒙公司的 EB病毒抗体(亲合力检测)试剂盒,可同时检测抗 EBV壳抗原抗体,抗早期抗原抗体,抗核心抗原抗体和抗 EBV-CAIgG抗体亲合力,现将检测结果及相关性疾病分析报告如下。

材料与方法

1 检测对象 2008年 5月至 2008年 12月 74例前来我院诊治的患儿,符合 EB病毒感染诊断标准[3],男 44例,女 30例,年龄 2岁～ 13岁,平均年龄 6岁。其中传染性单核细胞增多症 45例,EBV感染 7例、上呼吸道感染 3例、支气管肺炎 2例、肾炎 2例,化脓性扁桃体炎 2例,川畸病 1例,另外发热病人 5例,淋巴结肿大病人 6例,临床出现血尿病人 1例。

2 EBV相关性 IM的诊断标准 ①临床症状:发热、咽痛、淋巴肿大、扁桃体肿大和上腭瘀点。②EBV相关抗体检测:抗 EBV-CA-IgM阳性和 (或)抗 EBVCA-IgG为低亲合力抗体且抗 EBV-NA-IgG阴性。

3 材料与方法 采集病人单份血清标本,-20℃保存备用。采用德国欧蒙公司生产的抗 EBV抗体(亲合力检测)试剂盒(间接免疫荧光法):检测抗 EBVCA-IgM、抗 EBV-CA-IgG、抗 EBV-EA-IgG、抗 EBVNA-IgG及抗 EBV-CA-Ig G抗体亲合力。实验操作及结果判定均按照试剂说明书进行。

结 果

EBV四种抗体检测结果:74例患儿中,抗 EBVCA-IgM阳性 56例,阴性 18例,阳性率为 75.7%。抗EBV-CA-Ig G100%,抗 EBV-EA-IgG68.9%,抗 EBVNA-IgG23%,抗 EBV-CA-IgG为低亲合力抗体患儿57例(77%)。有 44例(59.4%)抗 EBV抗体反应的类型为抗 EBV-CA-IgG与抗 EBV-CA-IgM均阳性,抗EBV-NA-IgG阴性且 EBV-CA-IgG为低亲合力抗体,是其抗 EBV抗体反应的主要类型(见表 1～ 2)。

表1 抗 EBV-CA-IgM阳性的 EBV抗体检测结果

表2 抗 EBV-CA-IgM阴性的 EBV抗体检测结果

讨 论

EB病毒感染是儿科比较常见的病毒感染性疾病,可以累积全身各个系统,而且症状多变,病情轻重不一,可以出现典型的传染性单核细胞增多症体征及其他复杂的临床表现等隐性感染[4],而且很多时候不能早期诊断,给临床治疗带来困难。本组 74例患儿中传染性单核细胞增多症 45例(占 60.8%),另外还有EBV隐性感染、上呼吸道感染、化脓性扁桃体炎、支气管肺炎、肾病等与文献所说全身各个系统均可累及大致相同[5,6]。

机体感染 EBV后,B细胞被激活并转化为浆细胞,产生各种病毒抗体,主要包括抗壳抗原抗体,抗早期抗原抗体,抗核心抗原抗体。早期产生的是针对EBV-CA-IgM和 IgG抗体,随后产生针对 EBV-EA的抗体,而 EBV-NA-IgG通常在感染晚期出现,因此,根据 EBV感染期间产生的抗体的不同动力学特点同时检测患者血清中上述四种抗体可以初步判断感染时期。临床上常常检测抗 EBV-CA-IgM作为 EBV感染急性期的指标,但是机体的免疫反应是一个复杂的过程,研究表明,有的病人抗 EBV-CA-IgM产生延迟,少部分病人感染 EBV后 EBV-CA-IgM持续阴性,也有的病人抗 EBV-CA-IgM持续几个月阳性,且在 EBV感染再激活或巨细胞病毒等原发感染的多克隆激活时出现,因此在临床上常常只有单份血清的情况下,用抗EBV-CA-IgM阳性作为原发性 EBV感染的诊断有一定缺陷。近年来,抗体亲合力检测以用来判断是否急性期感染,机体在受到病原体入侵后,病原特异性 IgG抗体的亲合力会呈现明显动态变化,首先产生低亲合力IgG抗体,随感染的继续合发展,抗体亲合力升高,因此,低亲合力的检出提示原发性感染[7]。有研究[8]报道90%以上的原发性急性 EBV感染病人在临床症状出现 10d内 EBV-CA-Ig G低亲合力抗体阳性,在病程30d后,仍有 50%的病人阳性。结合抗 EBV-N A-IgG阴性和 EBV-CA-Ig G为低亲合力抗体,其诊断原发性EBV感染的敏感性和特异性为 100%[1]。

本组病例中有 56例抗 EBV-CA-IgM阳性(75.7%),18例抗 EBV-CA-IgM阴性病例通过查 EBV四种抗体及亲合力检测确诊为 EB病毒感染。有文献报道[9,10],IM病例中抗 EBV-CA-IgM的阳性率在 59%～88.5%,本组病例中 45例为 IM患者,检出的抗EBV-CA-IgM阳性有 34例,阳性率为 75.6%,11例阴性病例中有 4例为恢复期患者,故抗 EBV-CA-IgM阴性,抗 EBV-NA-IgG阳性且抗 EBV-CA-IgG为高亲合力抗体。有 7例抗 EBV-CA-IgM阴性病例,通过检测,其抗 EBV-NA-Ig G阴性且 EBV-CA-IgG为低亲合力抗体,结合临床可以诊断为 EBV原发感染引起的 IM。而 EBV-NA-IgG虽然是 EBV感染恢复期指标,但是少数病例也会在临床症状出现后较短时期内检出[11],本组检测的 45例 IM患者中,有 3例抗 EBVNA-IgG阳性,但 EBV-CA-IgG为低亲合力抗体,可能是患者就诊时病程已较长,已处于原发感染相对较晚阶段,故此时抗 EBV-NA-IgG已出现,结合临床这 3例病例仍然是 EBV原发感染引起的 IM。本组有 5例发热病人,6例淋巴结肿大病人及临床出现血尿患者,查 EBV四种抗体及亲合力检测最后确诊为 EBV感染。

由于 EBV感染的血清学反应复杂多样,个体之间抗体产生又存在差异,并且在临床工作中,患者就诊时间合检测 EBV抗体的时间不同,给 EBV原发感染的诊断带来一定困难,尤其是如何采取单份血清标本检测结果诊断 EBV近期感染对临床工作十分重要。本组研究结果复杂多样,单纯依靠某一种抗体检测结果诊断 EBV原发感染容易造成漏诊与误诊。四种抗 EBV抗体及亲合力检测结果能为临床医生提供更多信息,从而更准确判断 EBV感染时期,提高 EB病毒感染相关疾病诊断的敏感性。

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