氯虫苯甲酰胺对甜菜夜蛾敏感基线的测定和幼虫体重的影响

张琴，王少丽，杨愿愿，董钧锋

（1.河南科技大学植物保护系，洛阳，471003；2.中国农业科学院蔬菜花卉研究所）

氯虫苯甲酰胺对甜菜夜蛾敏感基线的测定和幼虫体重的影响

张琴1，王少丽2，杨愿愿1，董钧锋1

（1.河南科技大学植物保护系，洛阳，471003；2.中国农业科学院蔬菜花卉研究所）

田间采集的甜菜夜蛾室内饲养20代后，以饲料混毒法测定了氯虫苯甲酰胺对其3龄幼虫的毒力。结果表明，药剂处理 48 h 和 72 h 后，LC50值分别为 0.747 5 mg/L 和 0.218 2 mg/L。 药后 48 h，在最低浓度（0.004 3 mg/L）处理下，甜菜夜蛾幼虫体重略高于对照，但未差异显著水平，随着处理浓度的提高，幼虫体重显著降低。本研究为氯虫苯甲酰胺对甜菜夜蛾的毒力提供了可参考的敏感基线，同时表明其对甜菜夜蛾具有较高的杀虫活性。

氯虫苯甲酰胺；甜菜夜蛾；敏感基线；幼虫体重

氯虫苯甲酰胺是美国杜邦公司开发上市的一种邻甲酰胺基苯甲酰胺类高效广谱杀虫剂，可防治常见的鳞翅目害虫和部分其他害虫[6,7]。其作用机理是激活害虫鱼尼丁受体，导致细胞内源钙离子释放失控，使肌肉细胞的收缩功能难以为继[8]。经氯虫苯甲酰胺处理后的害虫表现为进食迅速停止、反胃和肌肉瘫痪，直至死亡。氯虫苯甲酰胺对非靶标节肢动物具有良好的选择性，对哺乳动物、鱼类和鸟类的毒性极低，对作物也十分安全，是一种环境友好、作用机理独特的新型杀虫剂。

对害虫进行化学防治之前，需要监测害虫对特定杀虫剂的抗药性程度，这是指导杀虫药剂合理使用的重要依据，但任何一种抗性监测方法都必须首先建立敏感毒力基线，将其作为参比的标准[9]。氯虫苯甲酰胺作用机制独特，因此在大田应用初期，害虫对其应该均处于敏感状态。本研究于2009年度采集田间甜菜夜蛾的自然种群，室内饲养20代后，测定了氯虫苯甲酰胺对其幼虫的毒力活性，建立了甜菜夜蛾对该药剂的敏感基线，同时测定了经氯虫苯甲酰胺处理后，甜菜夜蛾幼虫体重的变化，以期为以后甜菜夜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗性监测和抗性治理工作提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试药剂为20%氯虫苯甲酰胺悬浮剂，美国杜邦公司生产。

甜菜夜蛾试虫采自河南洛阳郊区大葱田，室内连续饲养20代以上。养虫室内温度为25～28℃，相对湿度为 60%～70%，光周期为 L∶D＝18 h∶6 h。 初孵幼虫在塑料养虫盒（直径10 cm，高2.3 cm）内群体饲养，每盒100头左右，3龄后单独饲养于平底指形管内。甜菜夜蛾幼虫饲养以人工饲料，主要成分为熟大豆粉、麦胚粉和抗坏血酸等。化蛹后第3天把蛹从指形管内取出，经4%甲醛水溶液消毒15 min，用自来水冲洗并晾干后放入羽化笼内待羽化。成虫羽化后转入交配笼内，笼内悬挂塑料纸供成虫产卵，以10%的蜂蜜水补充营养。

1.2 室内毒力测定

采用饲料混毒法。按照常规方法制作甜菜夜蛾幼虫人工饲料，待饲料温度降至40℃时，分别加入不同浓度的氯虫苯甲酰胺水溶液，用电动九阳料理机搅拌60 s后迅速倒入无菌培养皿内，制成不同浓度的混毒饲料，冷却后放入4℃冰箱内备用。

甜菜夜蛾初孵幼虫在常规人工饲料上饲养至2龄末，挑选生长一致的试虫单独置于空的指形管内，塞紧棉塞以防逃逸。待幼虫蜕皮进入3龄后饥饿3～6 h，然后饲以系列浓度的混毒饲料。共设置5个浓度，每个浓度设置3次重复，每次重复处理试虫30头，以饲喂常规人工饲料为空白对照，试验条件同饲养条件。以试虫身体明显缩短、用毛笔尖轻触不能协调运动为死亡标准，处理48 h和72 h时检查幼虫死亡情况，计算死亡率。

1.3 药剂处理后幼虫体重的测定

氯虫苯甲酰胺处理甜菜夜蛾试虫的方法同室内毒力测定方法。处理48 h和72 h后，在电子天平上分别称取各系列药剂浓度下存活的全部幼虫体重。

1.4 数据分析

幼虫死亡率数据经Probit软件处理，求出药剂毒力回归曲线、计算LC50值及95%置信限等。幼虫体重数据经SPSS13.0软件进行方差分析，并用 Duncan’s的新复极差法 （P=0.05）检验其差异显著性。

2 结果与分析

2.1 室内毒力测定

氯虫苯甲酰胺对甜菜夜蛾3龄幼虫有较高的杀虫活性，在2.666 7 mg/L浓度下，处理10～30 min即停止取食，并伴有呕吐现象。由表1可以看出，处理48 h后，氯虫苯甲酰胺对甜菜夜蛾3龄幼虫的LC50为0.747 5 mg/L，处理72 h后，药剂毒力显著增加，LC50降为0.218 2 mg/L，比48 h时的LC50值下降了70.8%。

2.2 不同浓度氯虫苯甲酰胺对甜菜夜蛾3龄幼虫体重的影响

不同浓度氯虫苯甲酰胺对甜菜夜蛾3龄幼虫体重的影响见表2。从表2可以看出，药后48 h，在最低药剂浓度（0.004 3 mg/L）处理下，幼虫体重略高于对照，但未达到显著水平；随着处理浓度的提高，幼虫体重显著降低。最高浓度（2.666 7 mg/L）处理下，存活的甜菜夜蛾幼虫体重仅为1.16 mg，而空白对照处理下，体重为6.36 mg。药后72 h，不同浓度氯虫苯甲酰胺对甜菜夜蛾3龄幼虫的体重均有显著的影响，幼虫体重随药剂浓度的提高呈下降趋势，最高浓度处理下，幼虫体重仅为1 mg。取食对照饲料48 h至72 h，甜菜夜蛾3龄幼虫生长迅速，24 h内体重由6.36 mg增长到了 8.92 mg，增加了40.3%。取食混毒饲料48 h至72 h，仅在0.106 7 mg/L浓度下，甜菜夜蛾幼虫体重增加了5.6%，在其他浓度下，均保持不变或略有降低。

3 结论与讨论

氯虫苯甲酰胺作用于害虫的肌肉组织，见效快，高浓度下10～20 min甜菜夜蛾幼虫即停止取食并伴有呕吐、身体卷曲缩短等中毒症状，但死亡过程较为缓慢，低浓度下，从出现中毒症状到彻底死亡可持续5～10 d，所以在试验过程中，判断害虫的死亡标准尤为关键。陈焕瑜等[10]以轻触虫体不能协调运动为小菜蛾幼虫死亡标准，测出氯虫苯甲酰胺处理48 h后对小菜蛾3龄幼虫的LC50为0.808 mg/L；而程东美等[11]以轻触虫体不动作为判断小菜蛾幼虫死亡标准，测出氯虫苯甲酰胺处理48 h后对小菜蛾 3龄幼虫的LC50为 13.90 mg/L，两者相差 16.2倍。经过多次观察比较，作者以甜菜夜蛾幼虫身体明显缩短、轻触不能协调运动为幼虫死亡标准。按照这个标准判定死亡的甜菜夜蛾幼虫即使转移到寄主叶片或者对照人工饲料上也不能存活，因此这个标准适合作为死亡判断标准，但需要研究者细心观察、谨慎判定。

表1 氯虫苯甲酰胺对甜菜夜蛾3龄幼虫的室内毒力测定

表2 不同浓度氯虫苯甲酰胺对甜菜夜蛾3龄幼虫体重的影响

室内毒力测定选用的甜菜夜蛾3龄初幼虫均进行了饥饿处理。研究发现，饲料中添加高浓度的氯虫苯甲酰胺时，甜菜夜蛾幼虫很快停止取食并出现中毒症状，而药剂含量较低时幼虫取食量较大，生长发育较快，但取食一段时间后绝大部分幼虫停止取食，个别幼虫可以继续取食而存活下来。所以在田间进行防治时要选用较高浓度药剂进行喷施，防止害虫对叶片过多取食，造成品质下降和产量损失。

本研究测定了氯虫苯甲酰胺对甜菜夜蛾3龄幼虫的敏感度，可作为以后进行抗性监测时的参考敏感基线。氯虫苯甲酰胺是一种作用机理独特的新型杀虫剂，在实验室条件下对甜菜夜蛾3龄幼虫表现出较高的杀虫活性，而且使幼虫身体缩短，体重降低，极大地减弱了其幼虫的生长，是防治甜菜夜蛾的理想杀虫剂，但其在田间的实际防治效果尚需进一步试验研究。

[1]张彬，刘怀，王进军，等.甜菜夜蛾研究进展[J].中国农学通报，2008，24（10）：427-433.

[2]王开运，姜兴印，仪美芹，等.甜菜夜蛾的抗药性变化及治理对策的研究[J].农药，2001，40（6）：29-32.

[3]兰亦全，赵士熙，吴刚.甜菜夜蛾对三种拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性遗传力及风险评估 [J].应用生态学报，2006，17（3）：468-471.

[4]黄琳瑞，王成菊，郑明奇，等.甜菜夜娥对虫酰肼的抗药性研究初报[J].农药学学报，2005，7（4）：376-378.

[5]Mou1ton J K,Pepper D A,Jansson R J,et a1.Pro-active management of beet-armyworm(Lepidoptera:Noctuidae)resistance to tebufenozide and methoxyfenozide base1ine monitoring,risk assessment,and iso1ation of resistance[J].J E-con Entomo1,2002,95:414-424.

[6]Tohnishi M,Nakao K,Furuya T,et a1.F1ubendiamide,a nove1 c1ass insecticide with high activity againstLepidoptera[J].J Pestic Sci,2005,30:354-360.

[7]徐尚成，俞幼芬，王晓军，等.新杀虫剂氯虫苯甲酰胺及其研究开发进展[J].现代农药，2008，7（5）：8-11.

[8]闫潇敏，宁斌科，王列平，等.新型邻酰胺基苯甲酰胺类杀虫剂氯虫苯甲酰胺的合成与应用[J].世界农药，2009，31（6）：20-23.

[9]吴益东，陈松，净新娟，等.棉铃虫抗药性监测方法——浸叶法敏感毒力基线的建立及其应用 [J].昆虫学报，2001，44（1）：56-61.

[10]陈焕瑜，张德雍，黄华，等.氯虫苯甲酰胺对广东小菜蛾杀虫活性和田间药效评价 [J].广东农业科学，2010，37（2）：96-98

[11]程东美，何龙凤，张志祥.6种杀虫剂对小菜蛾幼虫的室内毒力活性比较[J].长江蔬菜（学术版），2010（2）：68-70.

Effects of Chlorantraniliprole on Baseline Sensitivity and Weight of Larval ofSpodoptera exigua

ZHANG Qin1,WANG Shao1i2,YANG Yuanyuan1,DONG Junfeng1
(1.Department of P1ant Protection,Henan University of Science and Techno1ogy,Luoyang 471003;2.Institute of Vegetab1es and F1owers,Chinese Academy of Agricu1tura1 Sciences)

Beet armyworm,Spodoptera exigua,were co11ected from the fie1d and reared in 1aboratory for 20 generations,and the sensitivity of 3th 1arvae ofS.exiguato ch1orantrani1ipro1e was investigated.The resu1ts showed that LC50va1ues were 0.747 5 mg/L and 0.218 2 mg/L after insecticide treatment for 48 h and 72 h.The 1arva1 weight ofS.exiguais a 1itt1e higher than the contro1 after ch1orantrani1ipro1e treatment with the 1owest concentration (0.004 3 mg/L)for 48 h.However,there was significant difference between treatment and contro1 with the increase of ch1orantrani1ipro1e concentration.This study provided base1ine for the susceptibi1ity of S.exigua to ch1orantrani1ipro1e and revea1ed its higher toxicity to this insect.

Ch1orantrani1ipro1e;Spodoptera exigua;Base1ine sensitivity;Weight of 1arva1

10.3865/j.issn.1001-3547.2010.18.028

公益性行业科研专项（200803007）和北京市自然科学基金项目（6102021）

张琴（1985-），女，硕士研究生，研究方向为蔬菜害虫防治

2010-06-22