50例肝细胞癌上皮钙粘着蛋白检测结果分析

张丽华，王振征，赵志文

2001～2007年收集经血清学证实为HBV感染50例原发性肝细胞癌（HCC），男47例，女3例；年龄31～69，平均52岁。肿瘤直径2.5～11 cm；35例伴肝硬化；40例AFP>30 μg/L；组织学检查示高、中、低分化HCC分别为9、31、10例；TNM Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期分别为20、21、9例。采用免疫组化SP法检测上皮钙粘着蛋白（E-cadherin）的表达。常规DAB显色，苏木精复染及中性树胶封固，其中抗原修复采用高温高压方法。对照设置：正常小鼠血清代替一抗作替代对照，TBS作空白对照。显微镜下观察，在良好的组织结构及清晰的背景上细胞膜棕黄色颗粒为阳性。对样本进行阳性细胞百分比和染色强度综合评分，10个随机高倍视野阳性细胞平均百分数<1%为0分，1%～10%为1分，11%～50%为2分，>50%为3分；染色强度计分：未着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。两者之积0～4分为弱阳性，>4分为强阳性。E-cadherin在正常胆管上皮的染色定为强阳性表达，为内参正常对照，膜阳性为E-cadherin正常的表达方式。

结果显示E-cadherin的阳性信号主要定位于非肿瘤组织的肝细胞和胆管的胞膜，呈棕黄色线状着色。对比癌旁组织的膜线性表达，80%（40/50）HCC的癌组织出现胞膜的E-cadherin下降表达，胞质表达未见明显变化。癌组织中E-cadherin膜的低表达相关于高的肿瘤分期。

E-cadherin基因是一种肿瘤转移抑制基因，其表达的E-cadherin蛋白是一种依赖钙的粘附分子，在上皮细胞间起着介导同质性粘附及维持组织结构完整性的作用。抑癌基因的失活导致蛋白表达下调从而促使肿瘤的发生发展。本文结果显示，对比正常和癌旁组织中胞膜线状表达，HCC癌组织中E-cadherin显示明显的膜缺失表达。分析原因，一方面在于E-cadherin膜下调表达使细胞间连接解体，同时也导致Wnt途径的关键蛋白β-catenin游离于胞浆，参与下游基因的转录激活，致使肝癌细胞增殖加速和易于转移；另一方面，新近研究显示乙肝病毒X基因具有下调E-cadherin表达的作用，这既是HBV感染相关HCC的特点，同时又加速了肿瘤进程。本文通过对50例HCC癌旁组织和癌组织进行了E-cadherin的免疫组化检测，提示肝癌组织中E-cadherin胞膜的下调表达在HCC发生发展及转移中可能发挥重要作用，并可能是肝细胞癌预后差的重要因素之一。