慢性肝炎肝窦毛细血管化的临床病理研究

邵颖 宋光平

(黑龙江省大庆市第二医院肝一科,*病理科,黑龙江大庆 163461)

在病理状态下,肝窦内皮细胞的窗孔闭塞、减少或消失,内皮下形成基底膜,形似连续毛细血管,称为肝窦毛细血管化。肝窦毛细血管化是肝纤维化过程中一个重要的病理改变[1]。研究肝窦毛细血管化的形成机理以及和肝纤维化、肝硬化发生的关系已经成为肝病研究领域的一个热点。目前国内关于肝窦毛细血管化的研究多集中在动物实验方面,本研究观察慢性肝炎患者的肝窦毛细血管化与慢性肝炎患者的肝脏组织学、血清学指标及肝纤维化指标的相关性,探索肝窦毛细血管化在疾病诊疗中的意义。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选择2006年7月—2009年9月来我院就诊的慢性肝炎患者68例,年龄27～53岁,平均39.7岁,其中男性51例,女性17例,无并发症及其他器官系统疾病。行肝穿刺活组织病理检查,其肝活检标本长度超过1.5 cm,至少含有4个完整的汇管区;并于当日晨采血检测肝功能、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)。病理诊断为慢性乙型肝炎36例、慢性丙型肝炎3例、慢性药物性肝炎4例、自身免疫性肝炎3例、原发性胆汁性肝硬化(Ⅰ～Ⅲ期)6例、乙醇性肝炎9例、血吸虫病2例、胆汁性肝纤维化5例。以6例正常肝组织(尸检标本)作为阴性对照。

1.2 血清学检测方法 日本日立公司7170S型全自动生化分析仪检测患者血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)。应用放射免疫分析方法检测血清HA、LN 、PCⅢ,应用 ELISA 法检测CⅣ,试剂盒购自上海海研医学生物技术有限公司。

1.3 肝活检标本处理 行一秒钟快速肝穿刺活检,活检枪为美国产Bard型,活检针亦为Bard型,规格16～18G,所获标本用10%中性甲醛溶液固定,常规石蜡包埋,作3μm厚度连续切片,行HE(苏木素-伊红)染色、网织染色及Masson染色,以免疫组化法行CD34染色。鼠抗人单克隆CD34抗体、即用型快捷免疫组化MaxVision试剂盒及阳性对照片等均购自福州迈新生物技术有限公司,严格按说明书操作。

1.4 统计学方法 采用Spearman Correlation进行统计学处理,P＜0.05(双侧)为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 肝窦毛细血管化程度与肝功能指标的关系 肝窦毛细血管化程度与血清肝功能指标中GGT明显相关,与ALT、AST、TBIL等无明显相关,见表1。

2.2 肝窦毛细血管化程度与血清肝纤维化指标的关系 肝窦毛细血管化程度与血清肝纤维化指标中的HA显著相关,与 LN、CⅣ、PCⅢ等无明显相关性,见表2。

2.3 肝窦毛细血管化程度与肝病变分级、分期的关系 肝窦毛细血管化程度与肝组织炎症分级、纤维化分期呈正相关,与分期相关性更强,见表3。

表1 肝窦毛细血管化程度与肝功能指标的关系

表2 肝窦毛细血管化程度与血清肝纤维化指标的关系

表3 肝窦毛细血管化程度与肝组织分级、分期的关系(例)

3 讨 论

肝窦是肝脏微循环的重要组成部分。肝窦毛细血管化可增强某些损伤介质(如自由基)的肝损伤作用,使肝细胞功能减退甚至衰竭,加快肝纤维化的进程,并可促使门脉压力升高,直接影响肝脏功能。本研究显示,肝窦毛细血管化程度与血清肝功能指标中的GGT具有相关性,而临床常用的ALT、AST、TBIL等指标对肝纤维化的早期阶段-肝窦毛细血管化很不敏感。正常人血清中的GGT主要来自肝脏,并由输胆管道排出,如果肝脏发生病变,肝细胞合成、释放GGT增强,导致血清中GGT增高。本组有7例(占10.3%)其他肝功能检测指标均正常,唯GGT升高。单独GGT异常预示存在着“悄悄”进展的肝损伤,GGT与肝窦毛细血管化的相关性则提示肝脏长期存在的轻度炎症刺激是肝纤维化的元凶。肝窦毛细血管化是肝纤维化的初始阶段,当反映肝脏功能变化的转氨酶等主要血清学指标正常时,如何判断与治疗“悄悄进展的肝损伤”值得不断探索。

血管形成是任何器官发生发育、创伤愈合、功能恢复的先决条件[2],但是肝脏这样一个承担着众多极其复杂功能的器官,对于各种损伤因素的修复反应是有限的。损伤早期肝星型细胞(HSC)被激活,之后在HSC的自分泌作用促使其进入持续激活状态,不断分裂增殖并合成与分泌细胞外基质,导致肝窦毛细血管化,毛细血管闭锁而发生纤维化[3]。本研究显示,肝窦毛细血管化程度与肝组织纤维化分期显著相关,并与血清肝纤维化指标中的HA显著相关,提示HA是判断肝窦毛细血管化与肝纤维化的一个灵敏的指标。

本研究显示肝窦毛细血管化改变与肝组织炎症分级明显相关,提示肝窦毛细血管化可能在某种意义上加剧了肝组织炎症的进展。然而,肝窦内皮细胞不仅仅只在损害因素作用下发生病理学改变,而且也“主动”参与了肝窦毛细血管化的进一步发展。在慢性肝炎时肝组织复杂的微观环境中,两者之间的相互影响尚需进一步研究。

1 陆雄,刘平.肝纤维化过程中一个重要的病理改变-肝窦毛细血管化[J].中华肝脏病杂志,2001,9:53-54.

2 Matsumoto S,Yamamoto K,Nagano T,et al.Immunon is tochemical study on phenotypical changes of hepatocy tes in liver diseases with reference to ex tracellular matrix composition[J].Liver,1999,19(1):32-38.

3 张爱龙,杨镇,尚亮,等.结缔组织生长因子在血吸虫病肝纤维化肝窦毛细血管化形成中的作用[J].中华实验外科杂志,2007,24(3):282-284.