体外冲击波对犬血细胞和凝血功能影响的实验研究

张小勇 徐卫平 邱汉婴

激活的部分凝血活酶时间(APTT)临床实践表明，体外冲击波碎石术不仅可引起心律失常，还导致血尿、皮肤瘀血等出血症状［1］，这是由于局部组织损伤，还是同时伴有凝血功能障碍，目前尚未明确。心脏内含有大量血液，当其受到体外冲击波(ESW)冲击时，血液的某些成分或功能发生是否改变，笔者目前未见报道。本文以杂种犬的右心室作为ESW的冲击靶点，JT ESWL-Ⅲ型体外冲击波碎石机发放ESW，研究ESW对杂种犬血细胞和凝血功能的影响。报告如下。

1 材料与方法

1．1 仪器与试剂 (1)设备:仪器血球计数仪和LD 25-2型离心机。(2)试剂:2%的枸椽酸钠，冻干含钙凝血活酶，部分凝血活酶试剂盒，3%的戊巴比妥钠和JT ESWL-Ⅲ型体外冲击波碎石机。

1．2 实验方法

1．2．1 动物模型与体外冲击波的发放方式杂种犬8条，雌雄不拘，体重(13．0±2．1)kg，使用3%戊巴比妥钠经腹腔行注射麻醉(30 mg/kg)后，行右侧股静脉Seldinger穿刺，分别将6F Cordis 4极电极导管(极间距0．5 cm)送入，电极导管头端(Ⅰ极)右室心尖部。将同杂种犬固定于JT ESWL-Ⅲ型体外冲击波碎石机的平板床上，以电极导管第4极作为ESW冲击靶点，整个过程在X线下完成。ESW的工作电压为:10 kV，工作方式:自动连续(非R波同步)发射冲击波，频率40次/min，冲击总数为2 000次/犬。

1．2．2 血液标本的采集:于ESW冲击大心脏前、后即刻取其左侧股静脉血。测定凝血酶原时间(PT)和APTT的血液标本使用2%的枸椽酸钠0．2 ml抗凝，取血量为1．8 m l，经离心机处理15 min(3 000 r/min)后取上层血浆待检;用于血常规的标本使用专用的非抗凝管盛装，取血量为0．5 ml，混匀后立即送检。

1．2．3 血常规使用全自动血球计数仪对红细胞计数(RBC)、白细胞计数(WBC)及血小板计数(PLT)进行检测。PT使用一期法测定，APTT使用常规测定。

1．3 观察指数 记录ESW冲击犬心脏前、后血细胞数和PT、APTT的测值。

1．4 统计学分析计量资料以¯x±s表示，采用t检验，P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1 ESW冲击犬心脏后较冲击前，PLT下降明显［(115±76)×109/L与 (211±76)×109/L］，差异有统计学意义(P ＜0．05)。WBC数量稍升高［(21±17)×109/L与(16±6)×109/L］，但差异无统计学意义(P ＞0．05)。RBC数量也稍升高［(6．6±1．6) ×1012/L与(6．3±1．4) ×1012/L］，但差异无统计学意义(P ＞0．05)。

2．2 ESW冲击犬心脏后，PT及 APTT均明显延长(14．7±1．4)s与(12．7 ±1．0)s，(41 ±9)s与(39 ±8)s(P 均 ＜0．01)。

3 讨论

血细胞由红细胞、白细胞和血小板组成，血浆中含有多种具有酶活性的蛋白质，使用ESW冲击犬心腔内的血液，可能会使血液的某些成分或功能发生改变［2］。有鉴于此，我们对血常规和凝血功能进行了检测。结果发现:ESW冲击犬心脏后PLT明显明显减少(P＜0．05)。因此，我们推测，ESW导致PLT减少的可能原因是:(1)ESW对细胞的直接损伤;(2)心内膜损伤导致血小板易粘附、聚集，形成微血栓，血小板大量消耗。

但RBC和WBC没有明显改变(P＞0．05)。其主要原因是红细胞呈双凹面碟形结构，可塑性强，不容易造成机械破坏。而且从实验过程来看，也几无出血。白细胞主要分布于骨髓池、周围池和血液池。血液池中的白细胞只是比较小的一部分，其数量变化除受白细胞总量影响外，三池白细胞的动态分布对其影响也比较大［3］。ESW冲击使得机体处于应激状态，并由此可能释放出多种物质，二者共同作用，使得骨髓和周围池中的白细胞向血液池中转移，致使血液中的白细胞不但不减少，反而稍有上升。而血小板参与血管内皮层的完整性，其中的PF-3、PF-4等多种血小板因子也与凝血功能有关，因此，PLT的减少会导致凝血功能障碍。从实验来看，对凝血系统功能性指标的检测结果发现:PT和APTT均有明显延长(P＜0．05)。但孟庆军等［4］的研究认为:ESW后1～3 d内，血液中纤维蛋白原浓度升高，抗凝血物质如AT-Ⅲ活性下降，血液处于高凝状态。这与本组实验不符。就其原因，可能是ESW冲击导致了肾组织的损伤和出血，从而激活了凝血系统而呈高凝状态，故1～3 d后检查凝血功能仍呈高凝状态。APTT和PT的延长，其原因可能是:ESW引起凝血酶等多种蛋白酶的空间构象甚至一级结构改变，使其活性下降所导致，但目前还没有一致的结论，还有待于做进一步的研究。

1 蔡正行，田武汉，余琼芳．ESWL的并发症．中华泌尿外科杂志，1991，12:188-190．

2 叶应妩主编．临床实验诊断学．第1版．北京:人民卫生出版社，1989．1132-133．

3 李芳．老年高血压患者凌晨血压增高与血液流变学的相关性研究．河北医药，2007，29:940-941．

4 孟庆军，周惜才，章咏裳．ESWL对机体凝血及纤溶系统的影响和钙拮抗剂的防护性作用．中华泌尿外科杂志，1996，10:61-63．