高大文,安 瑞,2,陶 彧,付 源,任南琪
(1.哈尔滨工业大学城市水资源与水环境国家重点实验室,哈尔滨150090; 2.深圳市水务(集团)有限公司,广东深圳518000,gaodw@hit.edu.cn)
随着社会的不断发展和进步,人们对水环境质量的要求越来越高,同时经济的发展所带来的水资源日益短缺的现状也迫切要求开发合适的污水深度处理技术,以缓解水资源的供需矛盾[1].在城市化进程不断加快的今天,生活污水的资源化利用和深度处理成为未来水处理的趋势之一.因此,我国环境保护“十一五”规划对城市生活污水处理的普及和污水的深度处理提出了更高的要求.膜生物反应器(MBR)是一种膜分离单元与生物处理单元相结合的水处理技术,它以膜组件取代二沉池,与传统的生化水处理技术相比,膜组件能将活性污泥完全截留在反应器内,大大提高了反应速率,增强了系统的耐冲击负荷的能力,且污泥的产量也相应减少[2].膜生物反应器实现了SRT和HRT的分离,有利于实现自动化控制和延长水力停留时间,出水水质稳定,是中水回用的重要技术手段,同时也是污泥减量化研究的热点之一.与此同时,随着MBR在水污染控制中发挥着越来越重要的作用,研究者的目光越来越多地集中在通过厌氧(缺氧)-好氧MBR系统同时实现有机物和氮的脱除[3-6].本文以实际生活污水为处理对象,考察了在不同有机负荷条件下缺氧-好氧MBR系统去除COD和脱氮的效能,以及该系统在不同有机负荷下污泥产生的情况.此外,借助PCR-DGGE和16S rDNA方法研究了在不同有机负荷条件下系统内微生物种群结构的变化.
整个工艺主要由配水箱、缺氧罐和内置式好氧MBR三部分组成(见图1),每部分均由厚8 mm有机玻璃制成.缺氧反应器的有效体积为8 L,内设电磁搅拌器;好氧MBR的有效体积为8 L,膜组件采用日本三菱公司生产的PE中空纤维膜,膜表面孔径为0.4 μm.试验用膜组件采用0.11 m2的膜丝,MBR理论膜通量为30.38 L·d-1.维持缺氧-好氧MBR系统温度为(23±2)℃.回流比设定为2.5,缺氧罐和MBR的水力停留时间(HRT)均设定为8 h,控制MBR的曝气量为0.4 m3·h-1(DO含量为5~6 mg·L-1).
用于接种缺氧-好氧MBR的污泥取自实验室用于处理生活污水的A2/O工艺二沉池.本研究所用生活污水取自哈尔滨市某生活区,但首先经过了1个有效体积为5.9 L的升流式厌氧固定床反应器(UAFB).经过UAFB预处理后的生活污水与原水相比悬浮固体(MLSS)和COD含量有所降低,且氨氮质量浓度提高10%左右.由于设定UAFB的HRT分别为6、3、1 h,UAFB出水COD的含量逐渐升高,因此,以不同HRT阶段的UAFB出水作为缺氧-好氧MBR系统的进水,在固定缺氧-好氧MBR系统的HRT为8 h的情况下,其有机负荷也逐渐增加,以COD计,有机负荷平均值分别为315.8,407.5,507.7 g·m-3·d-1.
试验中需要测定的污染性指标主要有COD、NH4+-N、NO2--N、NO3--N质量浓度等,污泥指标有悬浮固体(MLSS)含量,其检测方法主要参照国家环保总局颁布的水和废水监测和分析方法[7].对DO含量、氧化还原电位(ORP)、pH、温度等运行参数的测定借助于WTW(pH/ Oxi 340i)手提式多参数测试仪,每天选择反应器在稳定、正常的运行状态时检测系统各单元的运行参数.
图1 反应器装置图
聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳(PCRDGGE)是近十几年中应用于微生物生态学中的分子生物学分析方法,由于其具有可靠性强、重复性好、方便快捷等优点,已被广泛应用于环境生态学中微生物种群多样性、动态性分析及功能细菌的跟踪中[8].本文利用PCR-DGGE和16S rDNA方法分析好氧MBR中微生物种群结构的变化情况.基因组DNA的提取和扩增方法、变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析、目的条带的克隆与测序、DGGE图谱及多样性分析以及序列分析的详细方法参考文献[9].
由于采用经预处理之后的实际生活污水作为缺氧-好氧MBR的进水,每日进水COD有一定波动,但是由于UAFB的出水COD含量在不同水力停留时间的试验阶段的平均值具有一定梯度(COD含量的平均值分别为105.3,135.8、169.2 mg·L-1),对应的缺氧-好氧MBR进水平均有机负荷分别为315.8、407.5、507.7 g·m-3d-1.缺氧段出水COD含量始终在55~60 mg·L-1之间,与进水有机负荷关系不大,这可能与缺氧段污泥长期处于饥饿状态有关.MBR出水COD含量相对稳定,在不同有机负荷条件下分别为27、22、18 mg·L-1,由此可知,缺氧-好氧MBR具有一定耐有机负荷冲击能力.MBR出水 COD含量可以保证在50 mg·L-1以下,可以达到再生水回用于景观水体的水质标准.试验发现随着有机负荷的增加,缺氧-好氧MBR系统对COD的去除能力逐渐上升(见表1).
表1 不同进水有机负荷条件下COD去除率及脱氮情况
表2 不同进水有机负荷下各单元的氨氮及硝酸氮的去除情况
一般说来,由于绝大多数硝化细菌是自养菌,有机物的存在会影响部分硝化细菌的活性,从而降低系统去除-N的效率.但是本项研究发现在处理COD含量相对较低的生活污水时,有机物所致的抑制情况可以忽略,在保证DO含量充足的情况下,组合系统可以实现氨氮高效而稳定地去除.与此相反,组合系统对总氮的去除率不如氨氮去除率高,且依赖于进水有机负荷.
有两方面因素限制了反硝化的进程:一方面从MBR回流到缺氧罐中的泥水混合液中DO含量较高,破坏了反硝化菌所需要的缺氧状态;另一方面是系统进水的有机碳源不足.理论上来讲[10],脱除1 g总氮需要3~5 g有机物(以5 d生化需氧量BOD5计),按照实际生活污水可生化性(BOD5质量浓度/COD质量浓度)为0.4换算,处理含量为50 mg·L-1的-N至少需要COD含量达到375 mg·L-1.因此,如果要实现缺氧-好氧MBR系统更高的脱氮除效率,必须通过改变氮素脱除途径来提高系统的脱氮能力,例如基于-N积累的短程硝化反硝化[11-12].
基于已知的实际生活污水进水有机负荷进行脱氮能力的理论计算,结果表明3个有机负荷条件下最多可脱除总氮分别为8~13 mg·L-1、12~20 mg·L-1和16~27 mg·L-1,对应的总氮去除率分别为18%~31%、28%~48%和36%~60%.对比表1中所示总氮去除率可以发现,在较低有机负荷(315.8 g·m-3·d-1)时总氮去除率为理论最小值;在中等有机负荷(407.5 g·m-3·d-1)时总氮的去除率介于理论最大值与最小值之间;而当进水有机负荷达到较高水平(507.7 g·m-3·d-1)时总氮的去除率高于理论最大去除率.事实上,总氮去除率y与进水有机负荷x有较好的相关性,即y= 0.266 9x-68.231,R2=0.975 2).对于该组合系统而言,当有机负荷达到630 g·m-3·d-1,即进水COD含量达到210 mg·L-1时,即可实现总氮的全部去除,这一数值比单纯的理论计算值小45%,这意味着缺氧-好氧MBR系统可能具有节省有机碳源的优势.
MBR试验从启动到结束时间为111 d,尽管缺氧-好氧MBR系统的进水有机负荷发生了变化,但是对污泥含量的影响不大,从启动后20 d开始,MBR中污泥含量稳定在1 500~2 000 mg·L-1的水平(见图2).这主要是因为一方面进水固体含量较低,另一方面系统中有机物含量较低使微生物长期处于饥饿或半饥饿状态,内源呼吸作用明显.从反应器运行效果来看,系统实现了污泥减量化,且较低的污泥含量可有效缓解膜污染.在整个试验期间,MBR没有出现严重的膜污染现象.
图2 MBR中污泥含量的变化趋势图
MBR成为处理生活污水的有力工艺的一个重要原因是MBR相比于传统的活性污泥法可以在一定程度上实现污泥减量化.一般理论认为MBR利用膜过滤实现了泥水混合物的分离,同时也实现了水力停留时间和污泥停留时间的分离,因此污泥停留时间理论上可以无限长.因此能够捕食细菌的原生动物和微型后生动物数量明显增加,有效地减小了污泥增长速度.本文中,系统内污泥增长缓慢除了得益于较长的污泥停留时间外,还因为缺氧-好氧MBR进水的COD含量较低,异养菌长期处于内源呼吸期,同时为了缓解膜污染,MBR中曝气充分,DO含量处于较高水平,微生物在这样低碳源高溶解氧的条件下能够维持一定的自我消耗速率,有效的减小了污泥的增长速率,实现了污泥减量化.
进水中不同有机物含量会引起反应器中微生物种群结构的变化.图3反映了MBR在不同有机负荷条件下运行时微生物种群结构的变化情况(图中A泳道为Marker,B、C、D泳道分别表示有机负荷为315.8、407.5、507.7 g·m-3·d-1条件).结果表明不同有机负荷条件下的主要微生物种群结构存在较大差别,尤其是优势种群变化较大.
在不同有机负荷条件下,能够一直稳定存在的菌群有条带12、13、15,随着有机负荷的增加逐渐失去优势地位甚至消亡的种群有条带3、4、5、11,而随着有机负荷的增加逐渐出现并成为优势种群的有条带1、2、8、10、14、15,这说明有机负荷的增加可以增加系统中微生物的丰富度,另外在有机负荷为407.5 g·m-3·d-1条件下运行时MBR中所特有的菌种为条带6、7、9.
图3 MBR中微生物种结构的变化
通过对图3中DGGE结果的某些关键条带进行16S rDNA分析发现,在中等有机负荷条件下,MBR中所特有的微生物种群为硝化功能菌群,因此该条件下氨氮和总氮的去除情况相对较好.此外,MBR中的主要微生物类群分布在不同的纲、属之中,它们多是变形菌纲及拟杆菌纲的某些属,比较适应MBR长期运行中底物缺乏且基质不足的不良环境,能够在一定程度上长期保持内源呼吸状态.
在MBR中优势地位最为明显的条带10为假单胞菌属,属化能异养菌,严格好氧,呼吸代谢产能,对环境的适应能力较强,最适应MBR内的生存条件.条带1,Dechloromonas;条带3,Nitrospira;条带8,Chlorobi;条带9,Nitrosovibrio;条带16,Betaproteobacteria等都与脱氮有关,反映了系统具有较强的脱氮水平和潜力.其他功能菌群,如与脱硫除磷有关的菌群,虽然不处于优势地位但也从侧面反映了系统对于主要污染物的去除具有一定功效.
通过对图3中各条带的强度作进一步分析,当有机负荷较低时,MBR没有明显的优势种群,而且生物种群结构比较简单,生物种类较少;随着有机负荷的增加,MBR中微生物种类增加,种群结构明显复杂,出现较明显的优势菌种,可以形成更为稳定的生态系统;当有机负荷进一步增加时,MBR中的微生物种类有所减少,一些菌种被淘汰,但是出现了明显的优势种(条带14,Dechloromonas;条带15,Azospira;条带16,Betaproteobacteria).不同有机负荷条件下MBR中微生物群落的Shannon指数分别为0.67、0.95、0.76,这说明系统在中等有机负荷下达到相对稳定的状态,一些功能菌群大量繁殖成为优势种群(如条带1,Dechloromonas;条带 6,Niabella;条带 10,Variovorax;条带 13,Saprospiraceae;条带 14,Dechloromonas;条带16,Betaproteobacteria),且大多与脱氮有关.随着这些功能菌群的大量出现并成为优势菌,MBR此时的处理效率最好,污泥活性也较高.这说明在中等有机负荷(407.5 g·m-3·d-1)条件下系统的运行效能最高.
1)随着进水有机负荷的提高,缺氧-好氧MBR系统对COD的去除以及对总氮的去除能力逐渐增强,分别从 65.9%提高到 85.9%,从18.5%提高到69.5%,但是进水有机负荷对氨氮的去除影响不大.
2)较长的SRT和充分曝气使得好氧MBR内的微生物长期处于内源呼吸期,污泥增长速率得到有效减少,MBR内污泥含量在111 d的运行中稳定在1500~2000 mg·L-1之间,实现了系统的污泥减量化.
3)不同进水有机负荷条件下好氧MBR的微生物种群结构存在较大差别,优势种群变化较大.系统在中等有机负荷(407.5g·m-3·d-1)时微生物群落的Shannon指数达到最大值(0.95),以脱氮为主的功能菌群成为优势菌种,系统达到相对稳定的状态,因此运行效能最高.
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